目的 采用多聚赖氨酸修饰的超顺磁性氧化铁(Polylysine coated superparamagnetic iron oxide,PLL-SPIO)纳米颗粒标记兔脂肪间充质干细胞(Adipose derived stem cell,ADSCs),探讨不同SPIO浓度及孵育时间对ADSCs标记率、存活率及细胞增殖率的影响,筛选SPIO标记ADSCs的最优标记条件.方法 用含不同浓度的SPIO(12、25、50 μg/mL)培养基培养第3代兔ADSCs,分别孵育不同时间(6、12、24、48 h),孵育完成后,普鲁士蓝染色计算细胞标记率;细胞毒性实验检测细胞存活率;根据细胞毒性实验结果筛选细胞存活率较大的6组细胞进行细胞增殖能力检测,检测细胞增殖率.结果 普鲁士蓝染色结果显示,各组细胞标记率及细胞内蓝染颗粒数量,随着SPIO浓度增大及孵育时间的延长而增多.细胞毒性实验结果显示,在较低SPIO浓度和较短孵育时间下,细胞存活率不受影响,且各组之间细胞存活率无明显差异,随着SPIO浓度增大及孵育时间延长,细胞存活率呈下降趋势,48 h时细胞存活率下降最明显.细胞增殖实验结果显示,实验组各组细胞增殖率,随SPIO浓度增大及孵育时间延长而降低;且细胞进入快速增长期后,实验组细胞增殖率与阴性对照组相比,均存在明显差异,其中12 μg/mL SPIO-6 h组和25 μg/mL SPIO-6 h组细胞增殖率与阴性对照组差异较其他各组小.结论 从细胞内SPIO颗粒含量及细胞标记率、存活率及增殖率几方面综合评价,25 μg/mL SPIO孵育6 h,是本研究所选出的PLL-SPIO 标记ADSCs的最优标记条件.

目的 探讨超声微弧氧化(MAO)、聚乳酸羟基乙酸共聚物(PLGA)复合涂层多孔镁材料对修复大兔颌骨缺损模型效果的影响.方法 选取18 只健康的雄性新西兰大白兔为研究对象,将其随机分为3 组,每组各6 只.多孔镁柱形材料用超声MAO和PLGA溶液浸泡后得到新型多孔镁材料.将新型多孔镁材料(Mg-MAO-PLGA组)、传统MAO多孔镁柱(Mg-MAO组)分别植入大兔颌骨骨缺损区域,同时设置大兔颌骨骨缺损自愈组(对照组).在第2、4、8 周后取材,应用扫描电子显微镜、能谱分析、苏木精-伊红(HE)染色及骨形态发生蛋白(BMP)-2 免疫组化分析不同材料植入后的材料变化及骨缺损区域愈合变化情况.结果 Mg-MAO组处理后表面形成均匀管阵列结构,而Mg-MAO-PLGA组孔隙结构被涂层遮盖.手术后,锥形束CT显示植入物位置良好.Mg-MAO-PLGA组植入物界面清晰连续且边界区域面积比Mg-MAO组小.Mg-MAO-PLGA组边界区域的Ca、P信号强于同时间点的Mg-MAO组,即新骨生成更为活跃.Mg-MAO-PLGA组新生骨组织密度高,且BMP-2阳性表达率高于Mg-MAO组和对照组.结论 经过超声MAO和PLGA复合涂层处理的多孔镁材料可以有效减缓生物体内的反应速率,且有助于骨缺损区域新骨生成.本材料在促进骨缺损愈合方面具有潜在的应用价值,有望为骨缺损愈合治疗提供新思路.

走过2023不平凡的癸卯兔年，龙腾虎跃的2024——甲辰龙年悄然而至。值此新春佳节来临之际，《中华行为医学与脑科学杂志》编辑委员会和编辑部全体同事向全国行为医学同道和神经科学、脑科学领域同仁致以崇高的敬意！向《中华行为医学与脑科学杂志》的全体作者、读者和编者致以新春的美好祝福！

目的:探讨转化生长因子-β(TGF-β)对兔胫骨平台骨折愈合的影响及机制。方法:75只大白兔随机数字表法分为对照组、骨折模型组和TGF-β组，骨折模型组和TGF-β组兔构建胫骨平台关节塌陷性骨折；对照组仅暴露皮肤，不行胫骨平台骨折。TGF-β组兔经骨折部位注射过表达TGF-β的腺相关病毒1×10 11 vg；对照组和骨折模型组经相同部位注射空载腺相关病毒1×10 11 vg。治疗4周后，采用X线测定骨折愈合情况；测量3组兔膝关节活性度和肿胀程度变化；采用X线扫描测定3组兔胫骨骨密度；采用马松三色法测定3组兔膝关节韧带纤维化程度；采用三点弯曲法测定胫骨平台生物力学变化。计量资料比较采用方差分析，组间两两比较采用LSD法。 结果:TGF-β组大白兔骨折部位X线片评分[(17.09±4.18)分]明显高于骨折模型组[(13.69±3.71)分]，差异有统计学意义( t＝4.109， P<0.05)。TGF-β组大白兔骨密度(0.48±0.03)明显高于骨折模型组(0.27±0.02)，差异有统计学意义( t＝3.710， P<0.05)。TGF-β组大白兔膝关节活动度[(118.38±12.43)度]明显高于骨折模型组[(109.22±12.54)度]，差异有统计学意义( t＝4.011， P<0.05)。TGF-β组大白兔膝关节肿胀程度[(0.20±0.03) cm]明显高于骨折模型组[(0.25±0.03) cm]，差异有统计学意义( t＝4.381， P<0.05)。TGF-β组大白兔内侧韧带胶原纤维(蓝色)[(37.14±4.79)%]明显低于骨折模型组[(20.15±4.81)%]，差异有统计学意义( t＝4.193， P<0.05)。TGF-β组大白兔胫骨平台最大载荷、弹性载荷和刚度等三点弯曲指标[(129.75±7.62) N、(85.33±8.01) N、(168.39±9.38) N/mm]明显高于骨折模型组[(71.59±6.09) N、(60.43±6.19) N、(125.41±11.26) N/mm]，差异有统计学意义( t＝2.761、3.018、2.995， P<0.05)。 结论:腺相关病毒介导TGF-β可显著促进胫骨平台骨折愈合，改善膝关节功能，提高胫骨平台的生物力学特性。

目的:探讨超声造影及其量化分析技术在评价慢性酒精中毒导致的睾丸微血管损伤中的价值，以及其与睾丸生精细胞形态学变化的关系。方法:72只新西兰白兔随机分为对照组(S组)、低剂量酒精处理组(L组)、中剂量酒精处理组(M组)、高剂量酒精处理组(H组)，再按不同时间梯度(30 d、60 d、90 d)分为S1、S2、S3组，L1、L2、L3组，M1、M2、M3组，以及H1、H2、H3组。各组兔实验前均行常规超声检查，随后行超声造影，实验结束取睾丸组织行光镜及电镜病理检查。结果:①超声造影参数峰值强度及曲线下面积整体随酒精剂量及使用时间的增加逐步减低(均 P<0.05)，曲率亦逐步减低(均 P<0.05)，而达峰时间、平均渡越时间、峰值减半时间的差异无统计学意义(均 P>0.05)。②光镜下随酒精剂量及使用时间增加，生精小管上皮逐渐变薄，腔内精子逐渐减少或无精子生成。睾丸组织Johnsen′s评分整体上随酒精剂量及使用时间的增加而降低(均 P<0.05)。电镜下早期微血管内皮细胞胞质线粒体空泡化，随酒精剂量及使用时间增加，内皮细胞呈空泡，甚至脱落、基底膜中断。 结论:酒精对睾丸微血管及生精细胞的损伤呈剂量-效应及时间-效应关系。超声造影可用于评估慢性酒精中毒所致的睾丸微血管损伤，并可间接反映其生精细胞形态学的改变。

目的:探索羟基红花黄色素A(HSYA)联合透明质酸酶(HAase)治疗透明质酸(HA)动脉栓塞的效果。方法:32只雄性白色家兔采用随机数字表法分为4组，每组8只，其中A、B、C组为试验组，D组为对照组。建立HA动脉栓塞模型：于兔耳背侧面以中央动脉为轴，距耳根部4.0 cm，蒂宽1.0 cm，切开大小为2.0 cm × 5.0 cm的矩形复合组织瓣(深度达耳腹侧软骨膜)，原位连续缝合，自近端向远端分3等分(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ区)；距组织瓣近端1 cm与中央动脉交点为进针点，注入HA 50 μl。在栓塞60 min后，对各组进行治疗。A组：于大腿隐静脉缓慢注入HSYA溶液20 ml(HSYA按10 mg/kg计算用量)；B组：于耳进针点注入HAase溶液0.5 ml(400 U/ml)；C组：于耳进针点注入HAase溶液0.5 ml，大腿隐静脉缓慢注入HSYA溶液20 ml，药物剂量同A、B组；D组大腿隐静脉、耳进针点及A、B组除给药途径的另一注射部位给予等量生理盐水。腿部注药每日1次，共14 d。于术后即刻和第1、7、14天观察组织瓣情况，并拍摄兔耳背侧照和逆光照，计算术后第14天组织瓣成活面积百分比。术后第14天，对兔耳组织瓣Ⅱ区取材，做HE和Masson染色，并检测超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量。符合正态分布计量数据以 ± s表示，多组间比较采用单因素方差分析，采用LSD检验分析两组间差异， P < 0.05认为差异有统计学意义。 结果:术后即刻各组组织瓣均呈苍白色。术后第1天，各组远端出现暗淡的缺血区。术后第7天，各组缺血区不同程度坏死、发黑，非坏死区肿胀明显。术后第14天，各组缺血区进一步坏死、发黑、卷曲、边界清；C组组织瓣缺血坏死情况最轻，D组最重，A、B组介于其间，A、C组非坏死区基本消肿。HE染色示：D组血管内形成大量血栓，大量炎性细胞浸润；B组次之；A、C组血栓少见。Masson染色示：C组胶原纤维排列规则；D组大量胶原纤维崩解断裂；A、B组介于其间。A、B、C、D各组组织瓣成活面积百分比分别为(69.87±5.04)%、(85.03±6.58)%、(93.93±4.25)%、(49.22±9.64)%，组间两两比较差异均有统计学意义( P均< 0.01)。A、B、C、D各组SOD活性分别为(49.83±8.08)、(36.65±5.49)、(55.61±7.93)、(22.45±5.47)U/mg prot，除A组与C组差异无统计学意义外，其余组间两两比较差异均有统计学意义( P均< 0.01)。A、B、C、D各组MDA含量分别为(0.77±0.17)、(1.03±0.16)、(0.68±0.12)、(0.41±0.09)nmol/mg prot，除A组与C组差异无统计学意义外，其余组间两两比较差异均有统计学意义( P均< 0.01)。 结论:动物实验条件下，与单独应用HAase相比，HSYA联合HAase能明显增强HA动脉栓塞的治疗效果，增加组织瓣成活面积比例。

目的:研究兔眼部局部应用小檗碱溶液的安全性及其对兔眼角膜上皮修复的影响。方法:实验研究。日本大耳白兔92只，随机数字表法分为一般情况组（32只兔，64只眼）和角膜损伤组（60只兔，60只眼）。一般情况组再用随机数字表法分为4个组，每组8只兔（16只眼），根据给予去离子水或0.5、1.0、1.5 mg/ml小檗碱溶液，分为一般情况对照组及一般情况A、B、C组；双眼给药，每只眼先单次给药，观察72 h后再连续4周多次给药。角膜损伤组兔右眼制作角膜上皮损伤模型后，根据给予去离子水或0.5、1.0、1.5 mg/ml小檗碱溶液，分为角膜损伤对照组及角膜损伤A、B、C组，每组15只兔（15只眼），连续给药1周。一般情况组兔进行行为学观察，并应用Draize眼刺激性评分系统，对兔角膜、结膜、虹膜受累的面积、程度和反应进行评分，测量不同时间眼压，视网膜电图（ERG）检测b波振幅。角膜损伤组兔于角膜缺损后1、2、3、4、5、6、7 d观察角膜上皮缺损修复情况。所有兔停药后进行角膜组织病理学观察。兔泪液pH值比较采用配对 t检验，Draize眼刺激性评分采用秩和检验，眼压、视网膜电图b波振幅及角膜上皮损伤面积和修复时间的多组比较采用方差分析及SNK- q检验。 结果:单次给药和多次给药后一般情况组兔均无明显异常行为。一般情况对照及A、B、C组在多次给药1、2、4周时Draize眼刺激评分差异均无统计学意义，其中一般情况C组的Draize眼刺激评分分别为7（0，12）、6（0，10）、6（0，16）分（χ 2=1.640，0.265，1.963，1.381； P>0.05）。一般情况对照及A、B、C组在多次给药前后不同时间的眼压差异均无统计学意义（ F=0.065，0.292，0.015，0.041； P>0.05）。在多次给药前及给药后2、4周一般情况对照组的b波振幅分别为（127.75±17.12）、（129.18±15.83）、（128.81±13.58）μV，一般情况A组为（130.68±18.75）、（131.38±16.96）、（130.62±12.18）μV，一般情况B组为（128.00±16.74）、（128.44±16.64）、（129.06±16.16）μV，一般情况C组为（131.81±19.37）、（132.13±18.36）、（129.94±12.60）μV，各组在给药前后不同时间b波振幅差异均无统计学意义（ F=0.037，0.011，0.017，0.702； P>0.05）。一般情况对照组与一般情况A、B、C组角膜组织病理学检查结果无明显差异。角膜损伤各组在不同时间的角膜上皮缺损面积有统计学意义（ F=5.316，25.864，127.613； P<0.05），角膜损伤对照组与角膜损伤A、B、C组之间两两比较，角膜损伤C组的角膜上皮缺损面积明显大于其他3个组，差异具有统计学意义（ q=5.153，10.313，6.976； P<0.05）。角膜损伤对照及A、B、C组的修复愈合时间为（83.0±1.85）、（82.9±2.07）、（83.7±2.09）和（101.6±2.20）h，角膜损伤C组角膜上皮缺损修复时间长，差异有统计学意义（ F=301.437， P=0.000），角膜损伤对照组及角膜损伤A、B组之间比较，角膜上皮缺损修复时间差异无统计学意义（ F=0.813， P=0.450）；修复结束后，角膜损伤组之间角膜组织的病理学检查结果无明显差异。 结论:兔眼局部应用小檗碱溶液较安全，兔眼眼表未见明显的毒性反应，对视网膜未见明显影响。1.5 mg/ml浓度小檗碱溶液可延迟兔眼角膜上皮缺损修复，但对修复后的角膜组织结构的完整性无影响。 （中华眼科杂志，2020，56：131-137）

目的:研究脐带间充质干细胞改善卵巢早衰家兔卵巢功能的潜在机制。方法:将10只家兔按随机数表法分为治疗组和模型组各5只，均采用腹腔注射环磷酸酰胺（50 mg·kg -1·d -1，连续2 d）构建卵巢早衰模型。造模1周后，治疗组予以耳缘静脉注射人脐带间充质干细胞（2 mL/d，连续3 d），模型组予以注射等量无菌水。第28日后采集两组家兔卵巢组织标本，通过苏木精-伊红染色法观察两组家兔卵巢组织形态结构，并采用蛋白免疫印迹法、实时荧光定量PCR及免疫组织化学技术检测两组家兔卵巢组织内基质金属蛋白酶组织抑制物1（tissue inhibitor of metalloproteinases 1，TIMP1）、纤连蛋白（fibronectin，FN）、纤维形成相关因子基质金属蛋白酶9（matrix metalloproteinases 9，MMP9）在蛋白及mRNA水平上的表达。 结果:①模型组家兔卵巢组织内原始卵泡数量少，闭锁卵泡多，各级卵泡颗粒层排列紊乱，卵细胞核出现固缩，发生凋亡，卵巢间质出现纤维化；而治疗组家兔卵巢组织内原始、初级卵泡数量多，闭锁卵泡少，各级卵泡颗粒细胞排列规则。②与模型组相比较，治疗组家兔卵巢组织内TIMP1蛋白（0.546±0.021比0.820±0.085）和FN蛋白表达量增多（0.221±0.065比0.516±0.064）（ P均<0.001），而MMP9蛋白表达量减少（0.504±0.049比0.204±0.066， P<0.001）。③与模型组相比较，治疗组家兔卵巢组织内 TIMP1 mRNA（0.217±0.024比0.470±0.039）和 FN mRNA的表达量增多（0.039±0.006比0.125±0.012， P均<0.001），而 MMP9 mRNA的表达量减少（0.009±0.000比0.002±0.000， P<0.001）。④TIMP1和FN主要表达在颗粒细胞和卵细胞膜，TIMP1还表达在卵巢间质组织，治疗组TIMP1和FN的表达多于模型组，差异均具有统计学意义（ P<0.001， P=0.005）。MMP9主要表达在颗粒细胞和卵巢间质组织，治疗组MMP9的表达少于模型组，差异具有统计学意义（ P<0.001）。 结论:脐带间充质干细胞能够通过调节卵巢组织内TIMP1、FN和MMP9水平来改善卵巢功能。

目的:探讨冻干富血小板纤维蛋白(LPRF)应用于慢性难愈合创面治疗的可行性及临床效果。方法:动物实验中，抽取兔心脏血10~20 ml制备LPRF，将其应用在裸鼠糖尿病创面上，在应用后3、7、10、14 d测量创面大小。临床上，收集13例慢性难愈合创面患者，抽取各自新鲜外周血经离心、冷冻干燥等处理得到LPRF，辐照灭菌处理后，填充至清创后难愈合创面，无菌敷料覆盖，5~7 d后换药观察创面愈合情况。两组间比较创面愈合率，组间比较 t检验。 结果:LPRF应用于裸鼠糖尿病的创面14 d后创面完全上皮化，苏木精-伊红染色和马松染色均可看见LPRF治疗组创面被复层上皮覆盖，而常规辅料组仍有上皮缺失区域。临床上13例LPRF治疗的患者中除1例患者外其他均有效，其中6例患者经一次填充后创面愈合，1例患者发生复发。裸鼠糖尿病创面愈合率CON组低于LPRF组，差异有统计学意义(0.852±0.073比0.974±0.047， t＝－4.018， P<0.05)。 结论:LPRF可以有效的促进慢性创面愈合，可在临床上应用于多种慢性难愈合创面的治疗。

目的:制备针对呼吸道合胞病毒(RSV) N蛋白的兔多克隆抗体，以其作为检测抗体建立基于ELISA的快速中和抗体检测方法。方法:构建pET30a-N质粒，表达纯化N蛋白，免疫新西兰兔制备针对RSV N蛋白的多克隆抗体作为检测抗体。阳性血清系列稀释后与100半数组织培养感染剂量(TCID 50)/孔的RSV中和，接种Hep-2细胞培养，80%丙酮固定细胞，ELISA方法检测感染细胞中病毒的N蛋白，当每孔的吸光度值低于临界值时，视为中和试验阳性孔，阳性孔血清的最高稀释度为该血清的中和抗体滴度。优化抗体稀释度、检测时间、细胞密度及中和时间，建立基于N-ELISA的中和抗体检测方法，对建立的实验方法进行细胞代次、边缘孔效应、准确性、重复性以及精密度验证，初步应用于人RSV IgG阳性血清检测，分析与微量中和法的相关性。 结果:成功构建出pET30a-N质粒，表达纯化的N蛋白纯度较高，特异性良好；三免后兔血清效价为1∶51 200，可特异性结合RSV；制备的抗RSV N兔多抗的效价为1∶51 200，特异性良好，建立的快速中和抗体检测方法在4 d就可检测，中和时间可缩短至30 min，细胞代次、96孔板位置(边缘孔和非边缘孔)对该方法检测无影响，重复性、精密性、准确度良好，建立的方法和微量中和法检测64份RSV IgG阳性人血清，相关系数为0.929 6，证明两种方法具有良好的正相关性。结论:成功建立基于ELISA的快速中和抗体检测方法，可用于评价RSV疫苗接种后的血清抗体水平。