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免疫性血小板输注无效患者HLA/HPA抗体特性分析及其对血小板输注效果的影响
编辑人员丨1周前
目的探讨免疫性血小板输注无效(PTR)患者HLA/HPA抗体特异性分布特征及其对血小板输注效果的影响.方法 本研究以86例免疫性PTR患者为研究对象,收集其性别、年龄、身高、体重、配血次数、疾病类型、输注前后血小板计数等临床资料,通过微珠法进行HLA特异性抗体的检测,并分析抗体特性对血小板输注效果的影响.结果86例PTR患者中,单独HLA抗体、单独HPA抗体、HLA+HPA抗体阳性的患者分别为72例(83.72%)、8例(9.30%)、6例(6.98%).HLA抗体在各位点中检出频率最高的抗体对应等位基因分别为A*25:01、B*15:12、C*02:02(和C*17:01),检出率分别为81.48%、87.04%、48.15%;而对应抗原表位出现频率最高的前三位为163LG、97V、71ATD,检出率分别为87.04%、77.78%、74.07%.仅存在HLA抗体的患者,输注交叉配型相合血小板的24 h血小板计数纠正增加指数(CCI)及输注有效情况均明显优于随机血小板(P<0.01).在血小板交叉配型阴性结果的患者中,HLA抗体强度与交叉配型相合血小板的24 h CCI值及输注有效情况呈负相关关系,强度越高,输注效果越差(P<0.01).HLA抗体强度为中、低等水平的患者,输注交叉配型相合血小板的24 h CCI值及输注有效情况均优于输注随机血小板(P<0.05).结论 本研究所得到的PTR患者HLA/HPA抗体特性及其对血小板输注效果影响的结果,可为血小板库建立时供者的选择提供指导,同时对临床PTR患者的治疗方式选择有一定的参考价值.
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编辑人员丨1周前
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硫氧还蛋白在胰腺癌中的表达及临床意义
编辑人员丨1周前
目的:探究硫氧还蛋白(TXN)在胰腺癌中的表达及对胰腺癌细胞增殖、侵袭、迁移、凋亡的影响.方法:通过收集泛癌和TCGA胰腺癌转录组和临床数据,分析TXN家族基因的表达水平.通过荧光定量PCR(RT-qPCR)技术、蛋白免疫印迹法(Western blot)检测TXN在癌组织与癌旁组织中及不同细胞系的表达水平.通过使用小干扰RNA(siRNA)抑制胰腺癌Panc-1、BxPC-3细胞中TXN基因的表达,并与未抑制TXN基因表达的Panc-1、BxPC-3细胞进行对照实验,进而探究TXN对这2种细胞的增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响.使用转录组数据和生存结果资料,以TXN表达中位值分为两组,绘制TXN高低表达两组的生存曲线图.结果:在胰腺癌组织和细胞中,TXN的表达水平明显高于癌旁组织和正常细胞(P<0.05).抑制胰腺癌细胞的TXN的表达水平后,低表达的TXN水平的胰腺癌细胞增殖率、侵袭细胞数量、愈合率低于对照组的胰腺癌细胞,其凋亡率较正常胰腺癌细胞明显升高(P<0.05).TXN在胰腺癌患者肿瘤内表达水平越高,其生存时间越短(P<0.05).结论:TXN能增强胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力,并减弱细胞凋亡程度;胰腺癌组织中TXN表达量越高,预后越差.
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编辑人员丨1周前
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纤维粘连蛋白靶向JAK/STAT3信号通路调控粘连性肠梗阻的机制
编辑人员丨1周前
目的:探究纤维粘连蛋白(FN)靶向JAK/STAT3信号通路调控粘连性肠梗阻的作用机制.方法:选取2019年1月-2020年12月就诊行肠切除手术的粘连性肠梗阻患者65例(观察组),同期行腹股沟疝手术患者65例(对照组),取患者肠组织及术前血液样本,采用qRT-PCR、Western blot及免疫组织化学实验检测肠组织样本中FN、STAT3、p-STAT3基因及蛋白表达,采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清样本中FN表达.体外培养人肠上皮细胞系HIEC-6,采用慢病毒转染抑制细胞FN表达,采用CCK8、Transwell迁移实验观察FN对细胞增殖及分化的影响,同时采用qRT-PCR、Western Blot实验检测FN对细胞STAT3、p-STAT3表达的影响.结果:与对照组比较,观察组肠组织中FN mRNA及蛋白表达明显较高(P<0.05),STAT3、p-STAT3 mRNA及蛋白表达则明显较低(P<0.05),且观察组血清中分泌型FN含量也明显较高(P<0.05).体外实验显示,与NC siRNA组HIEC-6细胞比较,LV-FN siRNA组HIEC-6细胞在48、72、96、120 h的增殖率均明显较低(P<0.05),细胞迁移能力也明显较低(P<0.05),其FN mRNA及蛋白表达明显较低(P<0.05),STAT3、p-STAT3 mRNA及蛋白则明显较高(P<0.05).结论:纤维粘连蛋白在粘连性肠梗阻患者肠组织及血清中呈明显高表达,可通过JAK/STAT3信号通路的异常激活影响细胞的增殖和迁移,引I起病变肠段发病.
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编辑人员丨1周前
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SOCS3基因多态性与急性脑梗死遗传易感性及进展的关系
编辑人员丨1周前
目的:分析急性脑梗死(ACI)病人的SOCS3基因多态性,并探讨其与疾病进展的关系.方法:根据入院时美国国家卒中量表(NIHSS),将310例ACI病人分为轻度和中重度.根据入院后7 d的NIHSS评分将病人进一步分为进展组和非进展组.根据SOCS3基因rs8064821的测序结果,检测到CC、CA和AA三种基因型,分析各基因型的分布差异及其对疾病进展的预测价值.结果:ACI病人SOCS3基因rs8064821位点的基因型分布为CC(161例)、CA(127例)和AA(22例),频率分别为51.93%、40.97%和7.10%.中重度组病人的CC基因型比例低于轻度组,CA、AA基因型比例高于轻度组(P<0.01).与非进展组相比,进展为神经功能缺损的病人CC基因型比例较低,CA和AA基因型比例较高(P<0.01).结论:CA和AA基因型是皖北地区ACI病人SOCS3基因rs8064821位点的主要基因型,携带CA和AA基因型的病人更易出现神经功能障碍.
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编辑人员丨1周前
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COL5A2在胃癌组织中表达及其对胃癌细胞增殖、侵袭能力的影响
编辑人员丨1周前
目的:探讨Ⅴ型胶原蛋白α2(COL5A2)在胃癌组织中表达情况及其对胃癌细胞BGC823表型影响,并研究其相关影响机制.方法:收集手术切除的胃癌组织及相应癌旁正常组织各18例,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)及Western blotting检测COL5A2表达差异.人胃癌细胞株BGC823转染siRNA,敲低COL5A2基因在细胞中表达量,通过qRT-PCR及Western blotting验证转染效率.通过克隆形成实验检测各组细胞增殖变化,Transwell检测细胞侵袭变化,Western blotting检测细胞中Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白MMP9、Wnt、β-catenin表达.结果:与癌旁正常组织相比,胃癌组织中COL5A2蛋白表达增高(P<0.05).沉默COL5A2表达后,BGC823细胞增殖及侵袭能力均降低(P<0.05),且MMP9、Wnt、β-catenin蛋白表达量均下调(P<0.05).结论:COL5A2蛋白表达在胃癌组织中表达上调,并且可能通过Wnt/β-catenin信号通路影响胃癌细胞增殖及侵袭.
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编辑人员丨1周前
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Oxford Nanopore Technology在HLA-DPB1模棱两可基因分型中的应用初探
编辑人员丨1周前
目的 通过对比PCR-SBT、NGS、TGS三种测序试剂在HLA-DPB1基因分型的结果,分析基于ONT平台的TGS测序技术在处理HLA-DPB1基因分型模棱两可情况时的效率、优势及原因.方法 采用PCR-SBT、NGS(Illumina平台)、TGS(ONT平台)三种测序试剂分别对48例样本进行HLA-DPB1检测分型.NGS测序和TGS测序以HLA-DPB1命名*后三个区域数字作为高分辨结果进行统计,SBT测序以HLA-DPB1命名*后二个区域数字作为高分辨结果进行统计.结果48例样本中,TGS没有出现模棱两可结果,全部为唯一结果,而PCR-SBT测序共有45个样本出现模棱两可结果,占比93%(45/48),NGS共有5个样本出现模棱两可结果,占比10%(5/48).结论 与NGS测序和PCR-SBT测序技术相比,TGS测序可以解决HLA-DPB1基因分型的绝大部分模棱两可情况,提高了测序效率和准确性.
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编辑人员丨1周前
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细针穿刺细胞学联合多基因检测在甲状腺结节诊断中的应用效果研究
编辑人员丨1周前
目的 研究超声引导下细针穿刺标本中BRAF、RAS、TERT基因的表达特点及其在甲状腺结节术前诊断中的应用价值.方法 回顾性分析航空总manbet官网登录 甲状腺结节细针穿刺标本537例.每例标本的细胞涂片和液基细胞制片行巴氏染色,并依据Bethesda分级系统判读结果.穿刺组织采用实时荧光定量PCR分析基因突变情况.结果 Bethesda Ⅰ类结节65例(12.10%),Ⅱ类153例(28.49%),Ⅲ类84例(15.64%),Ⅳ类9例(1.68%),Ⅴ类73例(13.59%),Ⅵ类153例(28.49%).BRAF V600E突变220例(40.97%),NRAS突变21例(3.91%),KRAS突变6例(1.12%),HRAS突变2例(0.37%).其中BRAF V600E与KRAS共突变1例.BRAF V600E基因突变与患者细胞学诊断结果具有相关性(P<0.05);年龄较小者更易发生BRAF V600E突变(P<0.05);相较于女性患者,男性更易发生BRAF V600E突变(P<0.05);甲状腺左叶的结节更易发生KRAS突变(P<0.05).结论 在甲状腺细针穿刺标本中,BRAF V600E基因突变最常见,在RAS基因突变中NRAS突变居多.
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编辑人员丨1周前
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玉屏风散对肺癌细胞PD-L1表达及T细胞功能的影响
编辑人员丨1周前
目的 探讨玉屏风散对程序性死亡受体1(PD-1)-程序性死亡配体-1(PD-L1)结合及对肺癌细胞在体内外生长的影响.方法 MTT法检测玉屏风散提取物对小鼠Lewis肺癌LLC细胞生长的影响;乳酸脱氢酶(LDH)释放实验检测玉屏风散提取物对T细胞和LCC细胞共培养中靶细胞杀伤性作用;酶联免疫吸附(ELISA)实验检测玉屏风散提取物对PD-1和PD-L1结合的阻断作用,以及对γ干扰素(IFN-γ)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)释放水平的影响;同基因肿瘤模型分析玉屏风散对肺癌LLC细胞体内生长的抑制作用;免疫组化染色考察玉屏风散对肿瘤组织内CD4+T细胞、CD8+T细胞浸润的影响.结果 玉屏风散呈剂量依赖性抑制LLC细胞的生长及内源性PD-L1蛋白表达(P<0.05,P<0.01),竞争性阻断 PD-1 和 PD-L1 结合(P<0.05,P<0.01),促进 T 细胞 IFN-γ和 TNF-α 的释放(P<0.05,P<0.01),阻断PD-L1对T细胞功能性抑制作用(P<0.05,P<0.01).玉屏风散可以抑制LLC肿瘤生长(P<0.01),增加CD4+T、CD8+T细胞的浸润数量(P<0.01).结论 玉屏风散在体外细胞模型中可阻断PD-L1对T细胞功能的抑制作用,在同源小鼠肿瘤模型中具有抗肿瘤效果,可增强CD4+T细胞、CD8+T细胞对癌细胞的杀伤作用.
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编辑人员丨1周前
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单分子实时测序在HLA基因分型中的应用初探
编辑人员丨1周前
目的 分析单分子实时(SMRT)测序技术判断HLA基因型、单体型的准确性,以探讨该方法应用于临床的可行性.方法 留取19例需行肾移植的患者血液标本,提取DNA后利用SMRT测序技术检测样本基因序列,并利用PCR-SBT方法验证其准确性.结果SMRT技术可鉴定出19例样本的HLA基因型和基因单体型,且结果与PCR-SBT方法相符.1和14号样本PCR-SBT方法的C位点结果存在模棱两可现象,结果为HLA-C*03:02/04;03:03/132,SMRT技术可直接区分,结果为HLA-C*03:02:02,03:03:01.另外,SMRT方法在1号样本的B位点发现新的HLA等位基因.结论SMRT测序技术应用于HLA高分辨率分型具有高度准确性,在HLA单体型分析具有精准定位多个长间距突变位置的独特优势.
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编辑人员丨1周前
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不同剂量率 60Co γ射线照射对人外周血辐射敏感基因表达变化的影响
编辑人员丨1周前
目的:探讨不同剂量率 60Co γ射线照射对辐射诱导的基因表达水平改变的影响。 方法:60Co γ射线照射3例正常人离体外周血,剂量率分别为0.2、1.0和2.0 Gy/min,照射剂量为0、1、2、4和6 Gy,照射后24 h收集细胞,实时荧光定量(PCR)法对11个基因(CDKN1A、MDM2、PCNA、FDXR、GADD45A、PHPT1、ASTN2、TNFSF4、POLH、GDF-15和PPM1D)mRNA表达水平进行相对定量检测;逐步回归法构建不同剂量率基因组合表达模型。 结果:不同剂量率0.2、1和2 Gy/min 60Co γ射线照射后,辐射诱导的11个基因的相对表达量随照射剂量增加而升高,具有显著的剂量依赖性( R2=0.744~0.998, P< 0.05);0.2 Gy/min 60Co γ射线照射2 Gy后,CDKN1A、FDXR、PHPT1和TNFSF4基因的表达量明显高于1和2 Gy/min剂量率组,差异具有统计学意义( t=3.73、5.73、2.44、2.77、3.53、2.68、2.43、2.05, P< 0.05);2 Gy/min 60Co γ射线照射6 Gy后,PPM1D基因表达量明显高于其他两个剂量率组( t=3.82、2.54, P< 0.05);不同剂量率基因组合表达模型由2~3个基因组成,回归方程的 R2值为0.951~0.976( P< 0.05)。 结论:在0.2~2 Gy/min剂量率范围内,不同剂量率 60Co γ射线照射可能会影响辐射诱导人外周血基因表达水平的改变。
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编辑人员丨1周前