目的 探讨扶正化瘀方对博来霉素诱导肺纤维化小鼠的作用.方法 将小鼠随机分为模型组、扶正化瘀方组(5.6 g/kg)和尼达尼布组(60mg/kg),每组15只,采用无创气管插管经气道滴注博来霉素(2.5mg/kg)复制小鼠肺纤维化模型;另取10只正常小鼠予气道滴注等体积生理盐水,作为正常组.造模7 d后,各组灌胃相应剂量药物,连续给药14d.末次给药24 h后,使用肺功能仪测定小鼠气道狭窄指数、呼吸频率和潮气量,试剂盒检测血清羟脯氨酸(Hyp)水平,苏木素-伊红和Masson染色分别观察肺组织炎症和胶原沉积水平,ELISA法检测肺泡灌洗液中TNF-α、IL-6水平,免疫组化观察肺组织α-SMA表达,蛋白印迹法检测小鼠肺组织α-SMA、TGF-β1、Smad2/3、p-Smad2、p-Smad3蛋白表达.结果 与正常组比较,模型组小鼠呼吸急促,体质量降低(P＜0.01),Penh值增加(P＜0.01),f、TV减少(P＜0.01),肺组织大量炎性细胞浸润和大量胶原纤维沉积并有纤维节结生成,血清Hyp、IL-6、TNF-α水平升高(P＜0.01),肺组织 α-SMA、TGF-β1、Smad2/3、p-Smad2、p-Smad3 蛋白表达升高(P＜0.01);与模型组比较,扶正化瘀方组和尼达尼布组小鼠呼吸平稳,Penh值降低(P＜0.01),f、TV增加(P＜0.01),肺组织炎性细胞浸润和胶原纤维沉积减少(P＜0.01),血清Hyp、IL-6、TNF-α水平降低(P＜0.01),肺组织α-SMA、TGF-β1、Smad2/3、p-Smad2、p-Smad3蛋白表达降低(P＜0.01).结论 扶正化瘀方可抑制博来霉素诱导的小鼠实验性肺纤维化,其作用机制可能与调控TGF-β/Smad信号通路有关.

目的 探讨芹菜素对糖尿病肾病(DKD)小鼠肾损伤的保护作用.方法 体内实验,通过高脂饮食联合链脲佐菌素腹腔注射建立DKD小鼠模型并分为模型组、芹菜素组,同时设正常组,芹菜素组灌胃给予50 mg/kg芹菜素干预8周后处死小鼠,检测小鼠尿白蛋白肌酐比(UACR)、空腹血糖(FBG)、血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)和总胆固醇(TC)水平,采用HE、PAS及Masson染色观察小鼠肾脏组织病理改变,ELISA法检测肾组织炎症因子TNF-α和IL-6水平,免疫组化检测肾组织Sirt6及Nrf2表达情况,Western blot法检测肾组织Sirt6、Nrf2、TNF-α和IL-6蛋白表达.体外实验,人肾小球内皮细胞分为对照组、高糖组、si-Sirt6组、芹菜素组、芹菜素+si-Sirt6组,Western blot法检测细胞Sirt6、Nrf2、TNF-α和IL-6蛋白表达.结果 动物实验结果显示,与模型组比较,芹菜素组小鼠UACR、FBG、SCr、BUN和TC水平均降低(P＜0.05),肾组织病理损伤减轻;肾组织Sirt6、Nrf2蛋白表达升高(P＜0.05),TNF-α、IL-6表达降低(P＜0.05).细胞实验结果显示,与模型组比较,芹菜素组Sirt6、Nrf2蛋白表达升高(P＜0.05),TNF-α、IL-6蛋白表达降低(P＜0.05),而沉默Sirt6可逆转芹菜素对高糖诱导的Nrf2表达及炎性损伤的作用(P＜0.05).结论 芹菜素可通过靶向Sirt6/Nrf2信号通路,改善DKD肾小球内皮细胞炎性损伤.

目的 探讨玉屏风散对程序性死亡受体1(PD-1)-程序性死亡配体-1(PD-L1)结合及对肺癌细胞在体内外生长的影响.方法 MTT法检测玉屏风散提取物对小鼠Lewis肺癌LLC细胞生长的影响;乳酸脱氢酶(LDH)释放实验检测玉屏风散提取物对T细胞和LCC细胞共培养中靶细胞杀伤性作用;酶联免疫吸附(ELISA)实验检测玉屏风散提取物对PD-1和PD-L1结合的阻断作用,以及对γ干扰素(IFN-γ)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)释放水平的影响;同基因肿瘤模型分析玉屏风散对肺癌LLC细胞体内生长的抑制作用;免疫组化染色考察玉屏风散对肿瘤组织内CD4+T细胞、CD8+T细胞浸润的影响.结果 玉屏风散呈剂量依赖性抑制LLC细胞的生长及内源性PD-L1蛋白表达(P＜0.05,P＜0.01),竞争性阻断 PD-1 和 PD-L1 结合(P＜0.05,P＜0.01),促进 T 细胞 IFN-γ和 TNF-α 的释放(P＜0.05,P＜0.01),阻断PD-L1对T细胞功能性抑制作用(P＜0.05,P＜0.01).玉屏风散可以抑制LLC肿瘤生长(P＜0.01),增加CD4+T、CD8+T细胞的浸润数量(P＜0.01).结论 玉屏风散在体外细胞模型中可阻断PD-L1对T细胞功能的抑制作用,在同源小鼠肿瘤模型中具有抗肿瘤效果,可增强CD4+T细胞、CD8+T细胞对癌细胞的杀伤作用.

目的 分析致敏红细胞的携氧/释氧能力并初步探讨出现异常的原因.方法 用微柱凝胶卡检测致敏红细胞,用携氧/释氧功能评价装置分析自身免疫性溶血性贫血(AIHA)和新生儿溶血病(HDN)患者的致敏红细胞的携氧/释氧能力.使用健康成人的血浆构建输血性溶血反应小鼠模型,对照组给予PBS,记录小鼠负重游泳至力竭的时间,分离小鼠红细胞并分析其携氧/释氧能力,利用蛋白组学对小鼠溶血组与正常组血浆中差异蛋白进行GO和KEGG富集分析.采用ELISA方法检测致敏红细胞BPGM酶活性和2,3-DPG含量.结果 与相应对照组相比,AIHA、HDN和输血性溶血反应模型小鼠的红细胞的氧解离曲线均发生左移和P50下降.溶血模型小鼠的负重游泳时间明显缩短,蛋白组学筛选结果发现红细胞BPGM异常,致敏红细胞BPGM酶活性降低且细胞内2,3-DPG含量下降.结论 致敏红细胞BPGM酶活性降低导致红细胞释放氧气能力下降.

目的 研究交泰丸对高脂饮食诱导的肥胖小鼠大脑皮质血脑屏障的影响.方法 将小鼠随机分为正常组(15只)和造模组(45只),高脂饮食喂养8周进行造模,以造模组体质量平均值高出正常组体质量的20％,视为小鼠肥胖模型建立成功.将造模成功的小鼠随机分为模型组、交泰丸组和阳性药组(二甲双胍),每组15只.给药4周后检测体质量及空腹血糖(FBG)水平,免疫荧光检测大脑皮质中紧密连接蛋白Claudin-5、ZO-1以及血管外渗IgG的表达;分离大脑皮质血管后采用Western blot法检测RhoA、ROCK2蛋白表达.结果 与正常组比较,模型组小鼠体质量和FBG水平升高(P＜0.01),大脑皮质血脑屏障紧密连接受损,Claudin-5、ZO-1表达降低(P＜0.01),血管外渗IgG表达升高(P＜0.01),RhoA、ROCK2蛋白表达升高(P＜0.05);与模型组比较,二甲双胍组和交泰丸组小鼠体质量和FBG水平降低(P＜0.05),大脑皮质血脑屏障紧密连接形态改善,且Claudin-5和ZO-1表达升高(P＜0.05),血管外渗IgG表达降低(P＜0.01),RhoA、ROCK2蛋白表达降低(P＜0.05).结论 交泰丸能够改善高脂饮食诱导肥胖小鼠大脑皮质中紧密连接结构和血脑屏障功能,其机制与抑制RhoA/ROCK2信号通路有关.

目的 探讨紫苏汤对肠道菌群失调小鼠多样性及组成的影响.方法 将小鼠随机分为正常组、模型组及紫苏汤低、高剂量组,每组8只.除正常组外,其余组连续灌胃给予抗生素8d后,再分别灌胃给予等量无菌水和紫苏汤溶液1.82、3.64 g/kg 8 d,记录小鼠体质量、摄食量、饮水量的变化.收集各组新鲜粪便样本,进行16S rRNA高通量测序,对肠道菌群多样性、物种差异性进行分析.结果 抗生素干预8 d后,小鼠精神状态较萎靡,有稀便现象出现,摄食量减少,饮水量增多;而停用抗生素后,小鼠摄食量增多,饮水量减少;紫苏汤可使小鼠精神状态恢复,减轻稀便,改善摄食量和饮水量.肠道菌群多样性分析显示,抗生素干预后,小鼠肠道菌群多样性降低,而紫苏汤可使小鼠肠道菌群丰富度和多样性增加,菌群结构向对照组靠近.门水平分析显示,紫苏汤干预后,小鼠肠道中厚壁菌门丰度增加,变形菌门和疣微菌门丰度降低.属水平分析显示,紫苏汤干预后,小鼠肠道中乳杆菌属丰度增加,克雷伯氏菌属、埃希氏-志贺氏菌属及韦荣氏球菌属丰度降低.结论 紫苏汤对肠道菌群失调有积极作用,可改善小鼠的肠道菌群结构,抑制致病菌并促进有益菌.

目的 基于NF-κB信号通路探讨阔叶十大功劳对溃疡性结肠炎(UC)小鼠结肠炎症反应的影响.方法 小鼠随机分为正常组、模型组、美沙拉嗪组和阔叶十大功劳低、中、高剂量组.除正常组外,其余各组均自由饮用2.5％葡聚糖硫酸钠(DSS)建立UC小鼠模型,每天记录小鼠体质量变化与DAI评分.给药结束后,记录结肠长度,HE染色观察结肠组织病理形态,ELISA法检测结肠组织TNF-α、IL-10、IL-1β和IL-6水平,Western blot法检测结肠组织ZO-1、Occludin、Claudin-1和NF-κB蛋白表达.结果 与模型组比较,阔叶十大功劳组小鼠体质量、结肠长度增加(P＜0.05,P＜0.01),DAI和结肠组织病理评分降低(P＜0.05,P＜0.01),结肠组织IL-1β、IL-6、TNF-α水平和胞核NF-κB 蛋白表达降低(P＜0.05,P＜0.01),IL-10 水平和 ZO-1、Occludin、Claudin-1、胞浆 NF-κB 蛋白表达升高(P＜0.05,P＜0.01).结论 阔叶十大功劳可改善由DSS诱发的UC小鼠结肠组织炎症反应,其机制可能与调控NF-κB信号通路有关.

目的 观察橙皮苷改善庆大霉素致小鼠急性肾损伤的作用,并探讨该作用与炎症与凋亡的相关性.方法 将小鼠随机分为正常组、模型组、维拉帕米组(21.43 mg/kg)及橙皮苷低、高剂量组(100、200 mg/kg),采用腹腔注射庆大霉素法建立AKI模型,随后各组给予相应药物干预14 d.给药结束后检测小鼠24 h尿蛋白、肾脏指数、肾功能指标,采用ELISA法检测血清及肾组织IL-10、IL-6、TNF-α水平,HE染色检测肾组织病理损伤,TUNEL染色检测肾组织细胞凋亡,RT-qPCR法检测肾组织caspase-3、Bcl-2、Baxm RNA表达,Western blot法检测肾组织cleaved caspase-3及PI3K/Akt信号通路相关蛋白表达.结果 与模型组比较,橙皮苷各剂量组小鼠24 h尿蛋白及肾脏指数降低(P＜0.05),肾组织病理损伤有不同程度的改善,血清BUN、Scr及CysC水平降低(P＜0.05),血清及肾组织IL-10水平升高(P＜0.05),IL-6、TNF-α 水平降低(P＜0.05),肾组织细胞凋亡率、caspase-3、Bax mRNA 表达及 cleaved caspase-3蛋白表达降低(P＜0.05),Bcl-2 mRNA表达及PI3K、p-Akt蛋白表达升高(P＜0.05).结论 橙皮苷对庆大霉素致小鼠急性肾损伤具有一定的改善作用,该作用与其抑制炎症及通过调控PI3K/Akt信号通路而产生的抗凋亡活性有关.

目的:研究阿黑皮素原(POMC)在miR-21敲除小鼠表达下丘脑中的变化及其相应的能量代谢变化。方法:将miR-21敲除小鼠及野生型C57BL/6J小鼠分别分为糖尿病组和对照组，糖尿病组给予高脂饮食喂养联合小剂量链脲佐菌素腹腔注射，建立糖尿病模型。监测各组小鼠体重及血糖变化。实验结束后处死小鼠，取下丘脑组织检测POMC蛋白表达、STAT3 mRNA表达水平。结果:基线时各组小鼠体重及血糖水平均无明显差异( P>0.05)。造模后分别于3、6、9、12周比较各组小鼠体重及血糖的差异，结果显示，糖尿病组及miR-21敲除糖尿病组小鼠体重在各时间点均高于对照组( P<0.05)，并且，此2组间体重在3及12周时的差异也有统计学意义( P<0.05)。造模后糖尿病组小鼠血糖水平在各时间点均明显高于其他3组小鼠( P<0.05)。miR-21敲除糖尿病组小鼠在各时间点血糖水平均明显低于糖尿病组小鼠，而高于正常对照组，差异均具有统计学意义( P<0.05)。糖尿病小鼠下丘脑POMC蛋白及STAT3 mRNA水平较对照组明显降低，miR-21敲除的糖尿病小鼠下丘脑POMC蛋白及STAT3 mRNA水平较糖尿病组升高。 结论:miR-21敲除小鼠下丘脑POMC表达较未敲除miR-21糖尿病小鼠高，miR-21敲除可改善糖尿病小鼠血糖水平，减轻体重，改善能量代谢。

目的:探讨再殖小胶质细胞对小鼠脑出血（ICH）神经功能恢复的影响及其机制。方法:采用C57BL/6J成年雄性小鼠，脑立体定向注射胶原酶Ⅳ制备ICH模型。分组为假手术组、单纯ICH组和再殖小胶质细胞组。在ICH后第3天和第14天，采用改良神经功能缺损评分（mNSS）和转角试验评估小鼠神经功能缺损，实时荧光定量聚合酶链反应分析血肿周围脑组织白细胞介素（IL）-6和IL-1β等促炎性细胞因子水平。组间比较采用 t检验和单因素方差分析。 结果:与假手术组比较（0.38±0.48、50.00±8.88），ICH后第3天单纯ICH组（8.00±1.22、90.00±7.07）和再殖小胶质细胞组（7.13±1.27、83.75±9.92）小鼠mNSS评分（ F＝43.520， P<0.05）及右侧转角百分比（ F＝39.180， P<0.05）均显著高于假手术组；再殖小胶质细胞组mNSS评分及右侧转角百分比低于单纯ICH组，但差异无统计学意义（ P>0.05）。ICH后第14天，再殖小胶质细胞组小鼠（3.25±0.97、56.25±6.96）mNSS评分（ F＝109.400， P<0.05）及右侧转角百分比（ F＝12.590， P<0.05）明显低于单纯ICH组（4.75±1.39、68.75±7.81）。且与单纯ICH组（术后第3天：2.63±0.35、18.57±7.78；术后第14天：2.48±0.56、13.72±3.27）比较，再殖小胶质细胞组（术后第3天：1.47±0.31、4.46±4.56；术后第14天：1.20±0.02、4.57±1.83）小鼠血肿周围脑组织中IL-6、IL-1β等促炎性细胞因子在ICH后第3天（IL-6： t＝4.270， P<0.05；IL-1β： t＝2.710， P<0.05）和第14天（IL-6： t＝3.956， P<0.05；IL-1β： t＝4.232， P<0.05）的表达量均显著低于单纯ICH组。 结论:再殖小胶质细胞能改善小鼠ICH后长期神经功能缺损障碍，其机制可能是通过抑制神经炎症发挥作用。