目的:探讨布比卡因对肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其机制。方法:分别使用浓度为100（BUP组）、300、600、1 000 μmol/L的布比卡因处理H1299细胞，未使用布比卡因处理的设为对照组。分别将miR-NC、miR-381-3p、si-NC、si-HERC4、anti-miR-NC、anti-miR-381-3p转染至H1299细胞中，其中转染anti-miR-NC和anti-miR-381-3p的细胞再使用100 μmol/L布比卡因进行处理，分别记为miR-NC组、miR-381-3p组、si-NC组、si-HERC4组、BUP+anti-miR-NC组、BUP+anti-miR-381-3p组。qRT-PCR检测miR-381-3p和HERC4 mRNA的表达水平，免疫印迹法检测细胞周期蛋白D1（CyclinD1）、基质金属蛋白酶2（MMP-2）、MMP-9、p21等蛋白表达，MTT法检测细胞增殖抑制率，Transwell实验检测细胞迁移和侵袭，双荧光素酶报告基因检测实验检测miR-381-3p对HERC4的靶向调控作用。结果:与对照组比较，随着布比卡因浓度增加，细胞增殖抑制率显著升高，细胞迁移和侵袭数量显著降低；且miR-381-3p表达水平显著升高，HERC4 mRNA和蛋白表达水平显著降低（均 P<0.05）。双荧光素酶报告基因检测实验和免疫印迹显示，miR-381-3p靶向负调控HERC4的表达。过表达miR-381-3p或抑制HERC4表达均可抑制肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭，而下调miR-381-3p表达可逆转布比卡因对肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用。 结论:布比卡因可抑制肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭，其机制可能与调控miR-381-3p/HERC4的表达有关。

目的:探讨玻璃体腔注射雷珠单抗治疗湿性年龄相关性黄斑变性(wAMD)的临床疗效，及其对患者血浆中微小RNA(miRNA)-126、血管内皮生长因子(VEGF)-A的表达水平的影响。方法:前瞻性研究。纳入2018年6月—2019年6月蚌埠医学院第一附属manbet官网登录 眼科收治40例(40只眼)wAMD患者为wAMD组，其中男17例、女23例，年龄50～86岁。纳入同期在蚌埠医学院第一附属manbet官网登录 体检中心进行健康体检的中老年人为对照组(40人)，其中男18人、女22人，年龄53～81岁。wAMD组患者均接受单次玻璃体腔注射雷珠单抗0.05 mL治疗。采用实时荧光定量PCR(qPCR)法检测对照组和wAMD组治疗前及治疗后1个月血浆miRNA-126相对表达水平，酶联免疫吸附试验检测血浆中VEGF-A水平。(1)比较对照组、wAMD组治疗前miRNA-126及VEGF-A的表达水平。(2)比较wAMD组治疗前、治疗后1个月血浆miRNA-126、VEGF-A表达水平，以及最佳矫正视力(BCVA)、黄斑中央区视网膜厚度(CMT)、脉络膜新生血管(CNV)面积的变化情况。(3)分析wAMD组患者治疗前、治疗后1个月血浆miRNA-126的相对表达量与VEGF-A水平、CMT、CNV面积的相关性。结果:(1)wAMD组患者的miRNA-126相对表达量(0.86±0.11)低于对照组(1.04±0.10)，VEGF-A水平(329.09±17.58)pg/mL高于对照组(295.74±14.80)pg/mL，差异均有统计学意义( t＝8.010、9.179， P值均<0.01)。(2)wAMD组治疗后1个月miRNA-126相对表达量(1.47±0.27)较治疗前(0.86±0.11)增加，VEGF-A水平(315.36±15.44)pg/mL较治疗前(329.09±17.58)pg/mL降低，差异均有统计学意义( t＝19.410、8.048， P值均<0.01)；BCVA(0.45±0.11)较治疗前(0.83±0.16)增加，CMT与CNV面积分别为(296.53±21.52)μm，(0.58±0.18)mm 2，较治疗前的(311.88±37.25)μm、(0.70±0.17)mm 2均降低，差异均有统计学意义( t＝12.667、3.602、4.906， P值均<0.01)。(3)wAMD组患者治疗前及治疗后1个月血浆miRNA-126相对表达水平与VEGF-A、CMT、CNV面积均呈显著负相关( r治疗前＝－0.706、－0.723、－0.552， r治疗后1个月＝－0.783、－0.709、－0.620, P值均<0.01)。治疗前拟合VEGF-A、CMT、CNV面积与miRNA-126相对表达量之间的线性回归方程分别为： ?VEGF-A＝－112 XmiRNA－126＋426, ?CMT＝－243 XmiRNA-126＋522, ?CNV＝－0.84 XmiRNA-126＋1.42；治疗后线性回归方程分别为： ?VEGF-A＝－45.64 XmiRNA-126＋382， ?CMT＝－57.53 XmiRNA-126＋381， ?CNV＝－0.41 XmiRNA-126＋1.18。 结论:雷珠单抗可通过降低VEGF-A的表达，减少CMT及CNV面积，有效改善BCVA。雷珠单抗在取得临床疗效的同时，可能通过增强miRNA-126基因表达活性而延缓wAMD的进展。

目的:检测初治多发性大动脉炎（TAK）患者血浆外泌体携带的微小RNA和蛋白，分析其在TAK发病机制中的可能作用。方法:选2020年6月至11月北京协和manbet官网登录 风湿免疫科确诊的初治TAK患者10例，另选与之年龄性别匹配的健康对照者5例，分别通过RNA测序和蛋白质谱技术检测血浆外泌体携带的微小RNA和蛋白，筛选出差异表达的微小RNA和蛋白，并对其进行层次聚类分析、功能、信号通路和结构域富集分析，最终筛选出与血管炎有关的微小RNA和蛋白，探究其在TAK发病机制中的可能作用。统计学采用Fisher精确概率检验或 χ2检验。 结果:TAK患者血浆外泌体携带的差异表达的微小RNA 29个，其中miR-101-3p、miR-122-5p、miR-143-3p、miR-185-3p、miR-192-5p、miR-194-5p、miR-19a-3p、miR-19b-3p、miR-20b-5p、miR-21-5p、miR-22-3p、miR-335-5p、miR-34a-5p、miR-3613-5p、miR-548ad-5p、miR-590-3p、miR-7-5p表达上调，miR-1249-3p、miR-141-3p、miR-199a-5p、miR-199b-5p、miR-200a-3p、miR-200c-3p、miR-204-5p、miR-29c-5p、miR-335-3p、miR-381-3p、miR-4433b-5p、miR-584-5p表达下调。差异表达的蛋白357个，其中236个表达上调，121个表达下调，最终筛选前激肽释放酶、激肽原1、桥粒蛋白。结论:血浆外泌体携带的miR-34a-5p、miR-200c-3p、miR-143-3p、miR-22-3p、miR-21-5p、前激肽释放酶、激肽原1、桥粒蛋白可能通过调节血管生理过程、炎症反应、自身免疫等过程参与TAK的发病机制，具有作为TAK生物标志物和治疗靶点的潜在作用。

目的:观察长链非编码RNA Linc00472(LncRNA Linc00472)靶向调控微小RNA-381(miR-381)对骨肉瘤细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响。方法:收集2017年3月至2018年5月郑州大学第一附属manbet官网登录 收治的骨肉瘤患者29例为研究对象，实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测骨肉瘤组织和瘤旁组织中Linc00472的表达。将骨肉瘤U2OS细胞分为pcDNA3.1组、pcDNA3.1-Linc00472组、pcDNA3.1-Linc00472＋miR-NC组、pcDNA3.1-Linc00472＋miR-381组。甲基噻唑基四唑(MTT)检测细胞增殖；流式细胞术检测细胞凋亡；Transwell实验检测细胞迁移及侵袭。双荧光素酶报告实验鉴定Linc00472与miR-381的靶向关系。两组间比较采用独立样本 t检验，多组间比较采用单因素方差分析。 结果:Linc00472在骨肉瘤组织中的表达水平低于瘤旁组织(0.31±0.03比1.03±0.10， t＝37.138， P<0.05)，差异有统计学意义；与pcDNA3.1组比较，pcDNA3.1-Linc00472组细胞存活率[(100.29±10.12)%比(53.29±5.44)%]低于pcDNA3.1组( t＝12.272， P<0.05)，差异有统计学意义，迁移细胞数[(266.00±23.61)个比(124.00±12.01)个]与侵袭细胞数[(131.00±13.06)个比(62.00±6.24)个]少于pcDNA3.1组( t＝16.082， P<0.05； t＝14.301， P<0.05)，差异有统计学意义，而细胞凋亡率[(8.58±0.91)%比(26.61±2.64)%]高于pcDNA3.1组( t＝19.370， P<0.05)，差异有统计学意义；miR-381过表达可抑制野生型载体WT-Linc00472细胞的荧光素酶活性( t＝19.827， P<0.05)，差异有统计学意义；与pcDNA3.1-Linc00472＋miR-NC组比较，pcDNA3.1-Linc00472＋miR-381组可增强细胞增殖[(53.17±5.33)%比(85.26±8.62)%]、迁移[(122.00±12.31)个比(223.00±22.18)个]及侵袭[(64.00±6.36)个比(104.00±10.20)个]能力高于pcDNA3.1-Linc00472＋miR-NC组( t＝9.499， P<0.05； t＝11.945， P<0.05； t＝9.983， P<0.05)，细胞凋亡率[(26.11±2.62)%比(13.11±1.34)%]低于pcDNA3.1-Linc00472＋miR-NC组( t＝13.253， P<0.05)，差异有统计学意义。 结论:LncRNA Linc00472通过靶向调控miR-381可抑制骨肉瘤细胞增殖、迁移及侵袭并诱导细胞凋亡。

目的 探讨微小RNA-381-3p(MicroRNA-381-3p,miR-381-3p)对脊髓损伤(Spinal cord injury,SCI)大鼠继发性损伤的修复机制以及其对肿瘤抑制蛋白基因(Tumor protein p53,TP53)表达水平的调控机制.方法 双荧光素酶以及蛋白质免疫共沉淀检测miR-381-3p和TP53的作用;用改良Allen's重物垂直撞击法复制大鼠SCI模型;实验动物分为假手术(Sham)组、SCI组、miR-381-3p-mimic(mimic)组、mimic+pc DNA3.1 TP53(mimic+pc)组,每组各 10 只;mimic 组大鼠尾静脉注射 miR-318-3p mimic;mimic+pc 组大鼠尾静脉注射 miR-318-3p mimic 和 pc DNA3.1 TP53;Sham 组和 SCI 组大鼠尾静脉注射 miR-318-3p mimic-NC和pc DNA3.1 TP53-NC;检测各组大鼠的运动功能评分(Basso beattie bresnahan,BBB)评分;脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记试剂盒(Terminal-deoxynucleoitidyl transferase-mediated nick end labeling,TUNEL)检测各组大鼠脊髓组织的细胞凋亡;超氧化物阴离子二氢乙啶(Dihydroethidium,DHE)荧光探针检测脊髓组织中活性氧(Reactive oxygen species,ROS)自由基的水平;免疫荧光检测各组大鼠脊髓组织中小胶质细胞的表型转换;酶联免疫吸附(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测各组大鼠血清中超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)、白细胞介素-1β(Interleukin-1 β,IL-1β),IL-6,IL-4和IL-10的水平;彗星实验检测各组脊髓组织中的DNA损伤;Western blot实验检测各组大鼠脊髓组织中肿瘤抑制蛋白基因(Tumor protein p53,TP53)、核转录因子(Nuclear factor κB,NF-κB)、磷酸化组蛋白(γ-Histone family 2A variant,γ-H2AX)、B 淋巴细胞瘤-2(B cell lymphoma-2,Bcl-2)和 Bcl-2 相关 X 蛋白(Bcl2-associated × protein,Bax)水平.结果 双荧光素酶以及蛋白质免疫共沉淀显示miR-381-3p调控TP53的表达水平.与Sham组比较,SCI组、mimic组、mimic+pc组大鼠的BBB评分、血清中SOD的活性、脊髓组织中M2型细胞的比例、Bcl-2的表达水平明显降低,脊髓组织中的细胞凋亡率、ROS的水平,血清中MDA,IL-1β,IL-6,IL-4和IL-1 0的水平,脊髓组织中M1型细胞的比例、DNA的Olive尾矩、TP53,NF-κB,γH2AX和Bax的表达水平明显升高(P均＜0.05);与SCI组比较,mimic组、mimic+pc组大鼠的BBB评分、血清中SOD的活性以及IL-4和IL-10的水平、脊髓组织中M2型细胞的比例、Bcl-2的表达水平明显升高,脊髓组织中的细胞凋亡率、ROS的水平,血清中MDA,IL-1β,IL-6的水平,脊髓组织中M,型细胞的比例、DNA的Olive尾矩、TP53,NF-κB,yH2AX和Bax的表达水平明显降低(P均＜0.05);与mimic组比较,mimic+pc组大鼠的BBB评分、血清中SOD的活性以及IL-4和IL-10的水平、脊髓组织中M2型细胞的比例、Bcl-2的表达水平明显降低,脊髓组织中的细胞凋亡率、ROS的水平、血清中MDA,IL-1β,IL-6的水平,脊髓组织中M1型细胞的比例、DNA的Olive尾矩、TP53,NF-κB,γH2AX和Bax的表达水平明显升高(P均＜0.05).结论 SCI大鼠模型miR-318-3p的表达水平明显降低,TP53的表达水平明显升高,miR-318-3p靶向TP53的表达水平,过表达miR-318-3p后能明显抑制实验动物脊髓组织中的氧化和炎症应激,减轻细胞的DNA损伤,降低脊髓组织中的细胞凋亡率,缓解动物脊髓组织的病理损伤.

目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清微 RNA-374b-5p(miR-374b-5p)、血管内皮生长因子 C(VEGF-C)的表达及与预后的关系.方法 选取 2018 年 2 月至 2019 年 9 月山东省临沂市肿瘤manbet官网登录 (以下简称"我院")收治的 105 例NSCLC患者为NSCLC组,我院同期 54 名体检健康者为对照组.检测并比较两组血清miR-374b-5p与VEGF-C表达;TargetScan数据库预测miR-374b-5p与VEGF-C的关系;Pearson相关系数分析血清miR-374b-5p与VEGF-C表达的相关性;K-M法绘制不同miR-374b-5p、VEGF-C表达NSCLC患者生存曲线;NSCLC死亡的影响因素采用Cox回归分析.结果 NSCLC组血清miR-374b-5p表达低于对照组,VEGF-C表达高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).miR-374b-5p与VEGF-C的 3'-非翻译区 381-388 和 585-591 处存在结合位点.NSCLC患者血清miR-374b-5p与VEGF-C表达呈负相关(r=-0.735,P＜0.01).不同分化程度、TNM分期、淋巴结转移NSCLC患者血清miR-374b-5p、VEGF-C表达比较,差异有统计学意义(P＜0.05).不同miR-374b-5p、VEGF-C表达NSCLC患者生存曲线比较,差异有统计学意义(P＜0.05).TNM分期Ⅲ期、有淋巴结转移、VEGF-C升高为NSCLC死亡的独立危险因素(HR=3.195、4.212、1.102,P＜0.05),miR-374b-5p升高为独立保护因素(HR=0.988,P＜0.05).结论 NSCLC患者血清miR-374b-5p低表达和VEGF-C高表达,与分化程度、TNM分期、淋巴结转移和预后有关.

目的:探讨微小RNA(miR)-381-3p对抑郁症大鼠海马区神经元损伤的影响及可能的调控机制.方法:通过皮质酮(CORT)皮下注射制备大鼠抑郁症模型并予以氟西汀治疗,通过测定大鼠体重、旷场试验和生化指标判定氟西汀的治疗效果,检测海马区miR-381-3p、脑源性神经营养因子(BNDF)、Bcl-2和Bax的表达.新生大鼠海马神经元预转染miR-381-3p inhibitor后,用CORT培养细胞,评估细胞存活率,检测细胞中miR-381-3p、BNDF、Bcl-2和Bax的表达.利用萤光素酶报告基因法验证miR-381-3p对BNDF的靶向调控作用.结果:与抑郁症模型大鼠相比,氟西汀治疗可增加大鼠的体重,增加跨场水平活动次数,提高去甲肾上腺素含量,抑制海马区miR-381-3p表达,并促进海马区BNDF的表达.沉默miR-381-3p可逆转CORT的效应,提高海马神经元的存活率,促进BD-NF和Bcl-2的表达,抑制Bax的表达.miR-381-3p靶向调控BNDF表达.结论:沉默miR-381-3p可减轻大鼠海马神经元CORT损伤,其机制可能与上调BNDF表达有关.

目的 探讨miR-381对胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及机制.方法 实时定量 PCR(qRT-PCR)检测人正常胰腺导管上皮细胞系 HPDE6-C7及胰腺癌细胞系PANC-1、AsPC-1、Capan-1、BxPC-3中miR-381的表达量,将PANC-1细胞系分成miR-381模拟物组和阴性对照组,采用Lipofectamine 2000分别转染miR-381 mimics和scramble序列,转染24 h后,qRT-PCR测定两组细胞中miR-381的表达水平,CCK-8法测定细胞的增殖能力,细胞划痕实验和 Tr-answell实验检测两组细胞的迁移和侵袭能力,qRT-PCR和Western blot测定两组细胞肝受体类似物1(liver receptor homolog-1,LRH-1)mRNA和蛋白质的表达水平.结果 miR-381在胰腺癌细胞系PANC-1、AsPC-1、Capan-1及BxPC-3中的表达量显著低于 HPDE6-C7(均 P<0.05).转染24 h后,miRNA-381模拟物组miR-381的表达水平显著高于阴性对照组(P<0.01).CCK-8实验示:miR-381模拟物组在转染后3、4 d,A450 nm值显著低于阴性对照组.miR-381模拟物组划痕愈合率显著低于阴性对照组[(32.8 ± 2.3)% vs.(61.9 ± 5.6)%,P<0.05];miR-381模拟物组侵袭细胞数显著少于阴性对照组[(85.1 ± 3.9)vs.(215.3 ± 5.1),P<0.01].miR-381模拟物组LRH-1 mRNA相对表达量显著低于阴性对照组[(0.43 ± 0.04)vs.1.0,P<0.01];miR-381模拟物组LRH-1蛋白相对表达量显著低于阴性对照组(P<0.05).结论 miR-381在胰腺癌细胞系中低表达,miR-381过表达可抑制胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭,其机制可能与下调LRH-1表达有关.

目的 探究微小RNA-381(miR-381)调控高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对甲状腺乳头状瘤IHH-4细胞生长、侵袭及迁移的影响.方法 购置甲状腺乳头状瘤IHH-4细胞及正常甲状腺细胞Nthy-ori-3各1株,取第3代细胞培养48 h后,采用实时定量PCR(qRT-PCR)检测miR-381和HMGB1在甲状腺乳头状瘤IHH-4细胞和正常甲状腺Nthy-ori-3细胞中的表达水平.利用Lipofectamine 2000转染miR-381 mimic后,检测IHH-4细胞中miR-381和HMGB1的表达水平.生物信息学预测miR-381和HMGB1的靶向关系,并用荧光素酶报告实验验证两者的靶向关系.每孔按2×105/mL细胞密度接种IHH-4细胞,分为IHH-4组(甲状腺乳头状瘤细胞IHH-4组)、miR-381 mimic组(miR-381 mimic转染组)、pc-HMGB1组(HMGB1过表达转染组)、mimic+pc-HMGB1组(miR-381 mimic和pc-HMGB1共同转染组),每组设3个复孔,采用CCK8法检测各组IHH-4细胞活性,Transwell及划痕实验分别检测IHH-4细胞侵袭及迁移能力,免疫印迹法检测IHH-4细胞中Ki67、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、MMP-9和晚期糖基化终产物受体(RAGE)的表达水平.结果 与Nthy-ori-3细胞比较,IHH-4细胞中miR-381 mRNA水平降低,HMGB1 mRNA水平升高,差异有统计学意义(P<0.01).与IHH-4组相比,miR-381 mimic组miR-381表达增加(P<0.01).miR-381和HMGB1存在靶向关系.与IHH-4组相比,miR-381 mimic组细胞增殖倍数、Ki67表达、侵袭细胞数、划痕闭合率、MMP-2、MMP-9和RAGE表达均降低(P均<0.01),pc-HMGB1组上述指标均升高(P均<0.01);与miR-381 mimic组相比,mimic+pc-HMGB1组细胞增殖倍数、Ki67表达、侵袭细胞数、划痕闭合率、MMP-2、MMP-9和RAGE水平也明显上升(P均<0.01).结论 miR-381通过靶向下调HMGB1表达,抑制IHH-4细胞增殖、侵袭和迁移.

目的 探讨长链非编码RNA FLVCR1-AS1(lncRNA FLVCR1-AS1)调控微小RNA-381-3p(miR-381-3p)表达影响结直肠癌(CRC)细胞增殖、凋亡的作用及机制.方法 取正常结肠上皮细胞FHC及CRC细胞SW480、DLD-1、HCT116,采用qRT-PCR法检测细胞中的FLVCR1-AS1与miR-381-3p.将FLVCR1-AS1表达最高的CRC细胞随机分为7组:NC组不处理,si-FLVCR1-AS1组、si-con组分别转染FLVCR1-AS1小干扰RNA及乱序无意义序列,miR-381-3p组、miR-con组分别转染miR-381-3p模拟物(mimics)及阴性对照mimic NC序列(miR-con),si-FLVCR1-AS1+anti-miR-381-3p组、si-FLVCR1-AS1+anti-miR-con组分别共转染si-FLVCR1-AS1与miR-381-3p特异性寡核苷酸抑制剂及其阴性对照;采用MTT法测算细胞存活率,流式细胞术测算细胞凋亡率,Western blotting法检测细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved-Caspase-3).先用Starbase对FLVCR1-AS1和miR-381-3p结合进行预测,再以双荧光素酶报告基因检测FLVCR1-AS1与miR-381-3p的相互作用.结果 与FHC比较,SW480、DLD-1、HCT116中FLVCR1-AS1表达水平均升高而miR-381-3p表达水平均降低(P均<0.05),其中SW480的FLVCR1-AS1表达最高.与NC组、si-con组、miR-con组比较,si-FLVCR1-AS1组、si-FLVCR1-AS1+anti-miR-con组细胞存活率降低、细胞凋亡率升高,细胞中Cyclin D1蛋白表达量降低、Cleaved-Caspase-3蛋白表达量升高(P均<0.05);miR-381-3p组细胞存活率降低、细胞凋亡率升高,细胞中Cyclin D1蛋白表达量降低、Cleaved-Caspase-3蛋白表达量升高(P均<0.05);NC组、si-con组、miR-con组两两比较,差异均无统计学意义;与si-FLVCR1-AS1+anti-miR-con组比较,si-FLVCR1-AS1+anti-miR-381-3p组细胞存活率升高、细胞凋亡率降低,细胞中Cyclin D1蛋白表达量升高、Cleaved-Caspase-3蛋白表达量低(P均<0.05).Starbase预测显示,FLVCR1-AS1与miR-381-3p存在靶向结合位点;双荧光素酶报告实验显示,在转染野生型载体WT-FLVCR1-AS1的SW480细胞中,共转染miR-381-3p mimics的荧光素酶活性低于共转染miR-con的细胞(P<0.05).结论 lncRNA FLVCR1-AS1可靶向调节miR-381-3p以促进CRC细胞增殖、抑制细胞凋亡,该作用可能通过上调Cleaved-Caspase-3表达及下调Cyclin D1表达实现.