目的 通过小鼠肺炎病毒(pneumonia virus of mice,PVM)感染近交系BALB/c小鼠建立病毒感染肺炎动物模型,观察PVM感染过程中促炎症警报素分子高迁移率族蛋白B1(high mobility group box 1,HMGB1)的变化,以及HMGB1抑制剂甘草酸(glycyrrhizic acid,GA)对小鼠肺脏感染损伤的在体干预作用.方法 将3周龄的雌性BALB/c小鼠随机分为3组,每组6只.一组未经PVM感染,作为对照组(Control);另外两组先以1×104半数组织培养感染剂量(50％tissue culture infective dose,TCID50)/25 μL剂量滴鼻接种PVM,然后分别给予GA生理盐水溶液灌胃(GA组)或单纯生理盐水灌胃(normal saline,NS组)处理,连续15d.其间,观察并记录各组小鼠体重、外观等改变.在实验终点采集各组小鼠的肺脏组织样本,通过苏木精-伊红染色和免疫组织化学法检测小鼠肺脏组织内PVM和HMGB1蛋白的分布情况;通过实时荧光定量PCR法检测小鼠肺脏组织中HMGB1、Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR-4)、晚期糖基化终产物特异性受体(advanced glycosylation end-product-specific receptor,AGER),以及白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-2和肿瘤坏死因子a(tumor necrosis factor-a,TNF-a)等炎症因子的表达水平.结果 与Control组相比,NS组小鼠6d后体重显著下降(P＜0.05),组织病理学结果显示其肺脏有明显的炎症病变,免疫组织化学结果显示HMGB1从细胞核释放至细胞质,实时荧光定量PCR结果显示HMGB1、IL-1β和IL-2的表达水平均显著上调(P＜0.05);GA干预组的临床症状和体重无明显变化.而与NS组相比,GA干预组肺组织的病理损伤明显减轻,且肺组织中HMGB1、IL-1β、IL-2和干扰素γ(interferon-γ,IFN-γ)的表达水平显著下降(P＜0.05),但AGER的表达水平显著增高(P＜0.05).结论 PVM感染能引起明显的小鼠肺部炎症性病理损伤,而GA能有效减轻其损伤,其作用机制可能与激活HMGB1信号通路相关.

目的·初步探究结直肠癌(colorectal cancer,CRC)患者肿瘤组织中免疫微环境的组成,分析自然杀伤细胞(natural killer cell,NK细胞)在CRC中的比例、表型及功能特征.方法·收集CRC患者肿瘤组织及配对的癌旁组织和匹配的CRC患者外周血样本,消化组织制备成单细胞悬液,使用流式细胞术检测各类免疫细胞比例,通过t-SNE(t-distributed stochastic neighbor embedding)降维与统计学分析,描述CRC肿瘤免疫微环境的特征.运用流式细胞术检测肿瘤组织和癌旁组织中NK细胞表面活化分子的表达情况,包括CD16、CD27、CD69、晚期活化标志人类白细胞抗原-DR(human leukocyte antigen-DR,HLA-DR)、细胞耗竭标志T细胞免疫球蛋白与黏蛋白结构域3(T cellimmunoglobulin domain and mucin domain-3,TIM-3).运用流式细胞术探究CD38分子在NK细胞上的表达水平,描述CD38highNK细胞的表型特征.利用细胞刺激试剂盒激活NK细胞,通过流式细胞术胞内染色检测NK细胞的功能,包括细胞因子Y干扰素(interferon-γ,IFN-y)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony-stimulating factor,GM-CSF)的表达水平.结果·收集25例CRC患者肿瘤组织及配对的癌旁组织和15例匹配的CRC患者外周血样本.CRC肿瘤组织中包含T淋巴细胞、B淋巴细胞、NK细胞及髓系细胞等免疫细胞.与癌旁组织相比,肿瘤组织中T淋巴细胞(P=0.000)和髓系细胞(P=0.026)的比例显著升高,NK细胞(P=0.007)的比例显著降低,B淋巴细胞比例差异无统计学意义.与癌旁组织相比,肿瘤组织中NK细胞表面CD27(P=0.000)、CD69(P=0.001)表达水平显著降低,同时CD16(P=0.008)、HLA-DR(P=0.000)和TIM-3(P=0.024)的表达水平显著升高,呈现晚期活化和耗竭表型.NK细胞按CD38的表达水平可分为CD38highNK和CD38lowNK2个亚群.与癌旁组织相比,肿瘤组织CD38highNK(P=0.003)比例显著降低,CD38lowNK比例差异无统计学意义.相比CD38lowNK,CD38highNK的CD27高表达,CD16、NKp46、CD57、CD94、HLA-DR和CD158a低表达(均P=0.000),处于早期分化和未活化的状态.肿瘤浸润的NK细胞与癌旁组织相比,分泌细胞因子IFN-y(P=0.032)、TNF-α(P=0.042)和GM-CSF(P=0.019)的水平显著降低,表明NK细胞杀伤功能受损.结论·CRC患者肿瘤组织中NK细胞浸润减少,早期分化状态的CD38highNK细胞亚群下降,分泌细胞因子的能力下降并呈现耗竭表型.这些结果提示NK细胞在CRC中功能受损,介导的抗肿瘤免疫应答下降.

目的 研究血必净注射液调控高迁移率族蛋白1(HMGB1)/Toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)通路对脓毒症小鼠肺损伤的保护作用.方法 雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组,模型组和低、中、高剂量血必净组,阴性对照(NC)组,NC+模型组,NC+高剂量血必净组,HMGB1+高剂量血必净组.采用盲肠结扎穿孔术建立脓毒症肺损伤模型,造模前给予NC慢病毒或HMGB1慢病毒尾静脉注射,造模当天给予血必净注射液(剂量5、10、15 mL/kg)腹腔注射,2次/d,连续3 d,末次给药后24 h进行取材和检测.比较各组间肺组织病理改变,湿重(W)/干重(D)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量,裂解型Caspase-3、HMGB1、TLR4、NF-κB表达水平的差异.结果 模型组小鼠肺组织出现肺损伤的病理改变,W/D、TNF-α、IL-1β、IL-6、MDA的含量及裂解型Caspase-3、HMGB1、TLR4、NF-κB的表达水平均高于对照组,SOD的含量低于对照组(P＜0.05).不同剂量血必净组小鼠肺损伤的病理改变减轻,W/D、TNF-α、IL-1β、IL-6、MDA 的含量及裂解型 Caspase-3、HMGB1、TLR4、NF-κB 的表达水平低于模型组,SOD的含量高于模型组(P＜0.05).HMGB1+高剂量血必净组小鼠肺损伤的病理改变加重,W/D、TNF-α、IL-1β、IL-6、MDA的含量及裂解型Caspase-3、HMGB1、TLR4、NF-κB的表达水平均高于NC+高剂量血必净组,SOD的含量低于NC+高剂量血必净组(P＜0.05).结论 血必净注射液对脓毒症小鼠肺损伤具有保护作用,并减轻炎症反应、氧化应激、细胞凋亡,其相关的分子机制为抑制HMGB1/TLR4/NF-κB通路.

目的 探究负压封闭引流(vacuum sealing drainage,VSD)与伤口常规换药对腹部术后伤口愈合不良的临床疗效.方法 选取2020-08-01/2023-09-30日作者manbet官网登录 普通外科225例腹部术后伤口愈合不良患者进行回顾性研究.根据伤口换药方式,将患者分为VSD组(n=110)和常规伤口换药组(n=115).比较两组腹部术后伤口愈合不良患者的临床疗效、住院天数、换药次数、换药天数、Ⅱ期清创缝合时间、血清学炎症指标.结果 225例腹部术后伤口愈合不良患者中,伤口出现脂肪液化或组织坏死110例(VSD组53例、常规伤口换药组57例),大量脓液或深部脓腔80例(VSD组42例、常规伤口换药组38例),切口裂开35例(VSD组15例、常规伤口换药组20例).两组腹部术后伤口愈合不良患者的基线资料比较差异无统计学意义(P＞0.05).VSD组腹部术后伤口愈合不良患者中,伤口出现脂肪液化或组织坏死、大量脓液或深部脓腔、切口裂开的患者的临床疗效总有效率明显高于常规伤口换药组,住院天数、换药天数、换药次数、Ⅱ期清创缝合时间均少于常规伤口换药组,差异均有统计学意义(P均＜0.05).换药后,两组腹部术后伤口愈合不良患者伤口出现脂肪液化或组织坏死、大量脓液或深部脓腔、切口裂开的患者的白细胞(white blood cell,WBC)、中性粒细胞(neutrophil,NEU)、白细胞介素 6(interleukin 6,IL-6)、降钙素原(procalcitonin,PCT)、C-反应蛋白(C-reactive pro-tein,CRP)水平较换药前均明显下降,且VSD组低于常规换药组(P均＜0.05).结论 与常规伤口换药相比,应用VSD伤口换药有利于加快腹部术后伤口愈合不良患者伤口恢复,降低感染发生率,有效缩短创面Ⅱ期清创缝合时间,改善患者血清炎症指标,促进术后恢复,值得临床推广应用.

目的 探讨地塞米松联合硼替佐米与环磷酰胺方案治疗初诊多发性骨髓瘤患者疗效及对血清白细胞介素-17(IL-17)、转化生长因子-β(TGF-β)与免疫细胞的影响,为临床多发性骨髓瘤患者的诊治提供参考.方法 选取浙江省龙游县人民manbet官网登录 2019年1月至2023年12月接收的95例多发性骨髓瘤患者为研究对象,均为初次确诊,根据治疗方法进行分组,其中47例患者给予硼替佐米+环磷酰胺方案,为对照组;48例患者于上述基础治疗上联合地塞米松,为观察组.统计2组临床疗效,采用酶联免疫吸附试验测量炎症因子IL-17、TGF-β、C反应蛋白(CRP),采用流式细胞术检测免疫细胞水平(CD3+CD4+、CD3+CD8+和CD3+CD4+/CD3+CD8+),比较2组患者治疗前后各项指标之间的差异及其用药安全性.结果 观察组总有效率96％(46/48)与对照组81％(38/47)相比,差异有统计学意义(x2=5.206,P＜0.05);治疗前2组IL-17、TGF-β、CRP比较差异无统计学意义(P＞0.05),治疗后均降低(P＜0.05),且观察组IL-17、TGF-β、CRP低于对照组(P＜0.05);治疗后观察组CD3+CD4+、CD3+CD4+/CD3+CD8+高于对照组,CD3+CD8+低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);治疗期间不良反应观察组总发生率(21％)高于对照组(15％),差异无统计学意义(x2=0.570,P＞0.05).结论 地塞米松联合硼替佐米与环磷酰胺方案治疗初诊多发性骨髓瘤患者疗效好,可降低炎性因子反应状态,减轻机体损伤,改善患者免疫细胞水平,值得临床推广应用.

目的 探讨老年慢性心力衰竭(CHF)患者血清卵泡抑素样蛋白 1(FSTL1)、白细胞介素(IL)-11 表达的临床意义及对预后的影响.方法 前瞻性选取2019 年6 月至2022 年6 月我院137 例老年CHF患者作为研究对象.入院时记录患者基线资料,测定并记录患者心功能指标[左室舒张末期内径(LVEDd)、左室射血分数(LVEF)]和血清FSTL1、炎症指标(IL-11、IL-1β)、心肌损伤标志物[心肌肌钙蛋白I(cTnI)、N末端B型利钠肽原(NT-pro BNP)]水平等,实施治疗.随访6 个月,观察患者预后结局.根据随访6 个月内主要不良心脏事件(MACE)评估预后,比较不同预后患者基线资料、心功能相关指标及血清指标,重点分析CHF患者血清FSTL1、IL-11 表达的临床意义及对预后的影响.结果 治疗完成后经6 个月随访,137 例老年CHF患者中有22 例发生MACE,其中15 例恶性心律失常,7 例心力衰竭,不良预后患者占16.06%.单因素分析显示,预后不良组患者 LVEF、FSTL1 低于预后良好组,LVEDd、中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)、IL-11、IL-1β、cTnI、NT-Pro BNP高于预后良好组(P<0.05).经多因素Logistic回归分析显示,血清FSTL1、IL-11均是老年CHF患者预后的独立影响因素(P<0.05).绘制ROC曲线图,结果显示,入院时血清FSTL1、IL-11 单独及联合预测老年CHF患者预后不良的AUC分别为0.858、0.861、0.874,均有一定评估价值.经Spearman相关性分析检验,老年CHF患者血清FSTL1 与IL-11 水平呈负相关(r=-0.217,P=0.011).结论 血清FSTL1 高表达降低老年CHF患者预后不良风险,IL-11 高表达增加老年CHF患者预后不良风险,入院时血清FSTL1、IL-11 可用于预测老年CHF患者预后不良.

目的:探究清除Vγ4T细胞在小鼠皮肤紫外线损伤后表皮组织修复中的作用及其机制。方法:该研究为实验研究。将54只6~8周龄雌性C57BL/6J野生型小鼠按照随机数字表法分为Vγ4T细胞清除组和对照组（每组27只），分别腹腔注射亚美尼亚仓鼠抗小鼠Vγ4T细胞受体（TCR）单克隆抗体200 μg、等量同型对照IgG抗体。注射后1周（之后均在此时间点取小鼠），每组取3只小鼠（之后均从这2组另取小鼠），从背部皮肤组织和腋窝、腹股沟淋巴结中分别提取真皮细胞和淋巴结细胞，行流式细胞术检测真皮细胞和淋巴结细胞中Vγ4T细胞比例；每组取5只小鼠，观察背部皮肤情况，之后行苏木精-伊红（HE）染色观察皮肤组织结构并测量表皮组织厚度；每组取5只小鼠，提取表皮细胞后行流式细胞术检测表皮细胞中树突状表皮T细胞（DETC）比例。每组取3只小鼠，分别设为Vγ4T细胞清除+5次紫外线辐射（UVR）组和对照+5次UVR组，每日1次共行5次UVR，每日照射后即刻观察背部皮肤情况；每组取5只小鼠，分别设为Vγ4T细胞清除+1次UVR组和对照+1次UVR组，均行1次UVR后即刻行HE染色后测量表皮组织厚度。每组取3只小鼠，分别设为单纯Vγ4T细胞清除组、单纯对照组；再另取3只小鼠，分别设为Vγ4T细胞清除+1次UVR组和对照+1次UVR组；均同前处理后，采用实时荧光定量反转录PCR法检测表皮组织中胰岛素样生长因子Ⅰ（IGF-Ⅰ）、角质形成细胞生长因子（KGF）、Vγ5TCR、白细胞介素15（IL-15）、IL-1β、IL-23、自然杀伤细胞2族成员D（NKG2D）、组织相容性抗原60（H60）、小鼠UL16结合蛋白样转录子1（Mult1）、维甲酸早期诱导蛋白1（Rae1）的mRNA表达。结果:注射后1周，Vγ4T细胞清除组小鼠真皮细胞、淋巴结细胞中Vγ4T细胞比例均明显低于对照组（ t值分别为27.99、13.12， P<0.05）；Vγ4T细胞清除组和对照组小鼠皮肤大体情况和组织结构无明显区别，表皮组织厚度相近（ P>0.05）；Vγ4T细胞清除组小鼠表皮细胞中DETC比例为（3.9±0.8）%，明显高于对照组的（1.6±0.5）%（ t=4.84， P<0.05）。与对照+5次UVR组相比，Vγ4T细胞清除+5次UVR组小鼠进行1次UVR后皮肤鳞屑增多，照射2次出现鳞屑样痂皮，照射3~5次鳞屑样痂皮明显增多。行UVR后即刻，Vγ4T细胞清除+1次UVR组小鼠表皮组织厚度较对照+1次UVR组明显增加（ t=11.50， P<0.05）。与单纯对照组相比，单纯Vγ4T细胞清除组小鼠表皮组织中Vγ5TCR的mRNA表达明显上调（ t=41.16， P<0.05），IL-23的mRNA表达明显下调（ t=6.52， P<0.05）；与单纯对照组相比，对照+1次UVR组小鼠表皮组织中Vγ5TCR、KGF的mRNA表达均明显上调（ t值分别为15.22、13.22， P<0.05），IGF-Ⅰ、IL-23的mRNA表达均明显下调（ t值分别为3.71、4.95， P<0.05）；与单纯Vγ4T细胞清除组相比，Vγ4T细胞清除+1次UVR组小鼠表皮组织中IGF-Ⅰ、KGF的mRNA表达均明显上调（ t值分别为11.40、18.88， P<0.05），IL-1β的mRNA表达明显下调（ t=4.42， P<0.05）；与对照+1次UVR组相比，Vγ4T细胞清除+1次UVR组小鼠表皮组织中Vγ5TCR、IGF-Ⅰ、KGF的mRNA表达均明显上调（ t值分别为4.52、15.24、9.43， P<0.05）；4组小鼠表皮组织中IL-15的mRNA表达总体相近（ P>0.05）。与单纯对照组相比，单纯Vγ4T细胞清除组表皮组织中NKG2D、Rae1的mRNA表达均明显上调（ t值分别为3.67、47.40， P<0.05），对照+1次UVR组小鼠表皮组织中NKG2D、Mult1、Rae1的mRNA表达均明显上调（ t值分别为5.30、6.50、9.16， P<0.05）；与单纯Vγ4T细胞清除组相比，Vγ4T细胞清除+1次UVR组小鼠表皮组织中NKG2D、H60、Mult1、Rae1的mRNA表达均明显下调（ t值分别为4.57、4.13、4.67、27.36， P<0.05）；与对照+1次UVR组相比，Vγ4T细胞清除+1次UVR组小鼠表皮组织中NKG2D、H60、Mult1、Rae1的mRNA表达均明显下调（ t值分别为5.77、8.18、12.90、8.08， P<0.05）。 结论:清除Vγ4T细胞有利于DETC增殖和毒性下调，可能促进UVR后小鼠表皮损伤修复 。

目的:探讨miR-146a在全身型幼年特发性关节炎(sJIA)发病机制中的作用及其临床意义。方法:前瞻性临床队列研究。选择2018年6月至2020年12月安徽省儿童manbet官网登录 风湿免疫科收治的sJIA患儿26例(初发活动组14例，稳定组12例)、多关节型幼年特发性关节炎(JIA)患儿15例、少关节型JIA患儿15例。门诊健康体检儿童20例为健康对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测研究对象外周血单个核细胞(PBMCs)中miR-146a表达水平，采用酶联免疫吸附试验检测sJIA患儿、健康对照组儿童血清中白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-1β水平。采用方差分析比较不同组间PBMCs中miR-146a表达水平及细胞因子水平的差异；采用 Pearson相关分析对sJIA患儿PBMCs中miR-146a相对表达水平与临床炎症指标及血清中细胞因子进行相关性分析。 结果:1．miR-146a在初发sJIA患儿PBMCs中相对表达水平显著高于多关节型JIA组、少关节型JIA组(8.77±3.15比4.40±1.59、2.55±1.15， t＝6.27、14.23，均 P<0.05)；sJIA活动组显著高于sJIA稳定组(8.77±3.15比3.63±1.37， t＝10.27， P<0.05)，差异均有统计学意义；sJIA稳定组与健康对照组比较，差异无统计学意义( P>0.05)。2.sJIA活动组血清中IL-1β、IL-6、TNF-α表达水平显著高于sJIA稳定组[(58.56±17.47) ng/L比(26.32±10.54) ng/L，(73.72±11.16) ng/L比(23.20±9.12) ng/L，(70.93±19.97) ng/L比(24.25±9.49) ng/L]，差异均有统计学意义(均 P<0.05)；sJIA稳定组与健康对照组比较，差异均无统计学意义(均 P>0.05)。3.sJIA患儿PBMCs中miR-146a表达与血清铁蛋白、血小板、红细胞沉降率、C反应蛋白以及血清中IL-1β、IL-6、TNF-α表达水平均呈正相关( r＝0.542、0.433、0.329、0.306、0.333、0.342、0.319，均 P<0.05)。 结论:miR-146a可能参与sJIA疾病炎症活动过程；miR-146a能较好区分sJIA与多关节型JIA、少关节型JIA；TNF-α、IL-1β、IL-6参与sJIA炎症反应。

目的:阐明济南市非EV-A71肠道病毒(enterovirus A71, EV-A71)感染引起的手足口病(hand, foot, and mouth disease, HFMD)患者细胞因子表达谱变化，寻找特征性的细胞因子。方法:收集济南市2014—2017年非EV-A71感染HFMD患者急性期和恢复期双份血清，同时收集健康人血清作为对照组。采用Bio-plex液相芯片平台高通量同时检测27种细胞因子，使用GraphPad Prism和SPSS 22.0进行描述和统计分析。结果:非EV-A71感染患者较健康对照组22种血清细胞因子发生显著改变，包括11种白细胞介素(interleukin, IL)、5种趋化因子(chemokines)、2种生长因子(growth factors)、粒细胞－集落刺激因子(granulocyte colony stimulating factor，G-CSF)、干扰素-γ(interferon-γ，IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)和粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony stimulating factor，GM-CSF)。柯萨奇病毒A组16型(coxsackievirus A16, CV-A16)感染者急性期和恢复期分别有21种(秩均值17.06~19.00 pg/ml, 5.50~8.80 pg/ml， P<0.05)、20种(秩均值16.41~19.00 pg/ml，5.50~9.90 pg/ml， P<0.05)细胞因子表达较健康对照组升高，GM-CSF(秩均值9.65 pg/ml, 21.40 pg/ml，9.59 pg/ml, 21.50 pg/ml, P<0.05)均较健康对照组表达降低。CV-A6感染患者急性期和恢复期分别有19种(秩均值11.92~13.50 pg/ml, 5.50~6.45 pg/ml， P<0.05)和21种(秩均值12.00~13.50 pg/ml, 5.50~6.40 pg/ml， P<0.05)细胞因子表达较健康对照组升高，GM-CSF仅急性期(秩均值5.00 pg/ml，10.60 pg/ml， P<0.05)较健康对照组表达降低。双份血清分析显示：CV-A16感染患者恢复期IL-6(22.79pg/ml，35.88 pg/ml)和IFNγ诱导蛋白-10(interferon-induced protein 10，IP-10)(793.56 pg/ml, 2 157.32 pg/ml)表达较急性期降低；CV-A6感染患者恢复期IL-7(3.13 pg/ml, 1.165 pg/ml)、IL-15(27.84 pg/ml，16.005 pg/ml)和正常T细胞表达和分泌调节活化因子(regulated upon activation normal T cell expressed and secreted，RANTES)(22 605.96 pg/ml, 7 040.90 pg/ml)较急性期表达反而升高。 结论:非EV-A71肠道病毒感染所致HFMD患者体内表现出广泛的细胞因子表达谱改变；不同病原体、不同临床病程具有不同的细胞因子表达特征，可为寻找与病程进展、临床诊断和以及免疫治疗有意义的指标提供科学数据。

目的:探讨白念珠菌对小鼠骨髓来源巨噬细胞（BMDM）焦亡的影响。方法:通过活细胞工作站实时观察白念珠菌[感染复数（MOI）= 50，下同]体外诱导BMDM后是否发生焦亡；将BMDM分为对照组、白念珠菌组，分别用磷酸盐缓冲液和白念珠菌酵母诱导BMDM 6 h，实时荧光定量PCR检测NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3（NLRP3）、白细胞介素1β（IL-1β）、IL-18 mRNA表达水平，Western印迹法检测NLRP3、胱天蛋白酶1（Caspase-1）、Gasdermin D（GSDMD）的表达及剪切水平。用白念珠菌诱导BMDM不同时间（0、10、15、20及25 h）后，酶联免疫吸附试验检测IL-1β、IL-18分泌水平。白念珠菌体外诱导野生型（WT）BMDM及GSDMD敲除（KO）BMDM 15 min，采用流式细胞仪比较WT、GSDMD KO BMDM对白念珠菌的吞噬率；诱导6 h后，采用流式细胞仪及乳酸脱氢酶（LDH）释放法分别检测WT、GSDMD KO BMDM的死亡率。分别设置空白对照组、对照组、样品最大酶活性对照孔组、IL-1β组、白念珠菌组、IL-1β +白念珠菌组，用IL-1β和/或白念珠菌酵母诱导BMDM后用LDH释放法分析WT及GSDMD KO BMDM死亡率。采用非配对 t检验、Kruskal-Wallis检验、方差分析等统计学方法进行统计分析。 结果:白念珠菌体外诱导BMDM后细胞可出现气球样变及出泡现象，证实焦亡发生；与对照组相比，白念珠菌组诱导BMDM 6 h后NLRP3、IL-1β的mRNA表达水平明显升高（ t = 13.02、17.51， P =或<0.001），而IL-18 mRNA表达水平无明显变化（ P = 0.486），且白念珠菌诱导可引起炎症小体NLRP3表达增多及Caspase-1、GSDMD剪切。白念珠菌诱导BMDM不同时间（0、10、15、20及25 h）后IL-1β的分泌水平随时间逐渐升高（ H = 12.90， P = 0.012），而IL-18的分泌水平无明显变化（ F = 0.48， P = 0.753），且GSDMD KO组BMDM的IL-1β分泌水平低于WT BMDM组（ F = 24.22， P = 0.008）。白念珠菌体外诱导15 min后，GSDMD KO BMDM[（50.3 ± 1.10）%]对白念珠菌的吞噬率低于WT BMDM[（58.53 ± 1.19）%， t = 5.09， P = 0.007]；白念珠菌体外诱导6 h后，流式细胞仪检测显示GSDMD KO组BMDM的死亡率（38.40% ± 0.50%）高于WT组BMDM（34.37% ± 0.52%）， t = 4.72， P = 0.009；LDH检测同样显示GSDMD KO BMDM的死亡率（22.52% ± 0.18%）高于WT BMDM（12.48% ± 0.15%）， t = 42.36， P<0.001；IL-1β预处理后予白念珠菌体外诱导的WT BMDM及GSDMD KO BMDM的细胞死亡率均较单纯白念珠菌诱导组降低（均 P<0.001）。 结论:白念珠菌可诱导BMDM发生焦亡，焦亡的发生可促进IL-1β释放，并通过提高巨噬细胞的免疫活性，降低巨噬细胞死亡率。