目的:探讨经方二妙散(EMS)对胶原诱导型关节炎(CIA)大鼠脾脏和关节中免疫调控基因 Gnαq 表达的影响.方法:建立CIA大鼠模型,并随机分为模型组(CIA组)、1.5、3.0和4.5 g/kg二妙散组(L-EMS、M-EMS和H-EMS组)、阳性对照组(MTX,氨甲蝶呤),各组给予相应药物进行治疗,同时设立健康对照组(Control组)与模型组给予等量生理盐水灌胃.ELISA技术检测各组炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α的表达,使用qRT-PCR和Western blot分析Gnαq mRNA和蛋白的表达,免疫组化技术对脾脏和关节中的Gnαq进行定位.结果:CIA组大鼠关节出现明显组织受损、组织增生与炎症浸润等特征改变;MTX组和EMS组关节组织破坏及增生减轻;CIA组IL-1β、IL-6和TNF-α的表达显著升高(P<0.01);MTX组和EMS组IL-1β(除H-EMS组)、IL-6和TNF-α的表达显著低于CIA组(P<0.05).L-EMS组IL-1β、IL-6和TNF-α的表达显著低于M-EMS和H-EMS组(P<0.05,P<0.01).CIA组大鼠脾脏和关节中Gnαq mRNA和蛋白表达显著高于Control组(P<0.01);EMS和MTX组脾脏和关节中Gnαq mRNA和蛋白表达显著低于CIA组(P<0.05);1.5 g/kg EMS组Gnαq mRNA和蛋白的表达量明显低于其他组(P<0.01,P<0.05).不同实验组大鼠脾脏和关节中均检测到不同程度的阳性信号.结论:CIA大鼠关节和脾脏组织中 Gnαq表达增强可能导致炎症反应,可能通过下调Gnαq减轻CIA大鼠炎症反应.

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)关节处于弱酸性环境,关节中RA成纤维样滑膜细胞(RA fibroblast-like syno-viocyte,RAFLS)被异常激活,分泌大量基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs),细胞膜上CD44 受体蛋白被特异性上调.血筒素(xuetongsu,XTS)是土家族药物血筒中抑制RAFLS增殖的主要活性成分,因靶向性差限制了其开发利用.该研究构建了一种可靶向CD44 的仿生XTS-普鲁士蓝纳米(Prussian blue nanoparticles,PB NPs)载药递送系统THMPX NPs.THMPX NPs表面有透明质酸(hyaluronic acid,HA)和三聚甘油单硬脂酸酯(triglycerol monostearate,TGMS)-3-氨基苯硼酸(3-amino-benzeneboronic acid,PBA)长链(PBA-TGMS)修饰.炎性 RAFLS 中过表达的 MMPs 和 H+可协同切割纳米粒表面的 PBA-TGMS,从而暴露HA与CD44 相互作用,使THMPX NPs在RAFLS中高度富集,近红外光照射后产热并释放XTS,抑制RAFLS细胞增殖和迁移.表征发现THMPX NPs为形态均一的立方形,粒径为(190.3±4.7)nm,平均电位在(-15.3±2.3)mV,近红外光照射 5 min温度可达 41.5℃,释药呈现MMPs和H+敏感性;生物安全性考察发现THMPX NPs溶血率小于 4%,对正常的RAW264.7 和HFLS无细胞毒性;体外摄取实验表明THMPX NPs有明显的RAFLS靶向性;自由基清除实验发现THMPX NPs有优异的自由基清除能力,可清除RAFLS中的活性氧;cell counting kit-8 和划痕实验表明THMPX NPs显著抑制RAFLS活力和迁移能力.该研究为开发抗RA中药民族药创新纳米靶向药物提供了思路.

目的 观察IL-22在类风湿关节炎相关间质性肺病中(RA-ILD)的表达情况,建立动物模型探讨IL-22在肺纤维化中的作用.方法 选择2021年10月—2022年10月在徐州医科大学附属manbet官网登录 初诊初治的类风湿关节炎合并(RA-ILD组)/未合并(RA-NILD组)间质性肺病患者各33例,同期14位健康体检者为健康对照组,采用ELISA测定3组外周血IL-22水平并比较.采用Pearson检验分析IL-22水平与肺HRCT评分的相关性;采用多因素logistic回归分析研究RA-ILD的危险因素并绘制ROC曲线.生理盐水(NS)和博来霉素(BLM)处理野生小鼠(WT)与IL-22敲基因小鼠(IL-22K0),建模后予腹腔注射IL-22,HE和Masson染色观察肺组织病理改变,RT-qPCR、Western blotting检测纤维化标志物水平.结果 RA-NILD组IL-22水平高于RA-ILD组及健康对照组,其水平与HRCT评分呈负相关关系(r=-0.940,P＜0.05).Logistic回归分析提示IL-22水平是RA-ILD的影响因素,IL-22 联合年龄、吸烟、APCA、MCHC 诊断 RA-ILD 的 AUC 为 0.959(95％CI:0.916～1.000),灵敏度为 97.0％,特异度为87.9％.病理染色示BLM组小鼠肺部胶原面积较NS组增多,Szapiel's评分和Ashcroft评分升高,纤维化相关基因(Collagen I、Vimentin、α-SMA)的mRNA和蛋白质表达也较NS组增高,其中IL-22K0组较WT组增高更显著(P＜0.05).IL-22治疗后胶原沉积及纤维化基因的mRNA和蛋白表达明显减少(P＜0.05).结论 IL-22可能对肺纤维化具有保护作用,未来可能成为潜在的治疗靶点,并可用于临床预测RA-ILD.

[目的]分析中医药治疗类风湿关节炎临床试验的结局指标,为构建类风湿关节炎临床试验的核心指标集奠定基础.[方法]计算机检索中国期刊全文数据库(CNKI)、万方数据知识服务平台(WANFANG DATA)、中国生物医学文献数据库(SinoMed)、维普数据库(VIP)、PubMed、The Cochrane Library和EMbase数据库,收集中医药治疗类风湿关节炎的临床研究,检索时限设定为 2020年.由两名研究者按照纳入与排除标准独立进行文献筛选和资料提取.[结果]纳入 69 项研究(随机对照试验 56 项,非随机同期对照研究 3 项,病例对照研究 9 项,自身前后对照研究1 项),共计4077 例患者,37 个(类)结局指标.单篇文章使用指标数量差异大,为 3～29个,平均为 11 个.使用频数排前 10 位的指标依次为:红细胞沉降率(73.91%)、C-反应蛋白(71.01%)、有效率(71.01%)、类风湿因子(66.67%)、不良反应(60.87%)、28 个关节疾病活动度(DAS28)评分(46.38%)、视觉模拟评分法(VAS)评分(40.58%)、关节压痛数(40.58%)、晨僵持续时间(40.58%)、肿胀关节数(39.13%).以指标功能属性为依据进行分类,所纳入研究指标域的设置比例由高到低依次为理化检测(92.75%)、疾病整体评价(91.30%)、症状/体征(73.91%)、安全性事件(60.87%)、中医病证(34.78%)、生活质量(4.35%),未涉及经济学评估及远期预后.[结论]类风湿关节炎临床试验的结局指标存在差异大、不规范、缺乏中医特色指标、缺乏远期预后与经济学评价等共性问题,亟需建立类风湿关节炎核心指标和中医药特色指标.

目的 探讨类风湿性关节炎(RA)住院患者健康相关生命质量(HRQoL)评分及其影响因素.方法 采用欧洲五维度五水平健康量表(EQ-5D-5L)及自编问卷对2023年4～9月安徽中医药大学第一附属manbet官网登录 风湿免疫科收治的200例RA住院患者进行HRQoL调查,EQ-5D-5L量表中健康描述系统及视觉模拟标尺(EQ-VAS)分别用于测量RA患者健康效用值及整体健康状态,采用单因素分析、Tobit多因素回归分析影响RA患者HRQoL的因素.结果 共收集190份有效问卷,有效回收率95%.RA患者健康效用值为(0.77±0.25),EQ-VAS评分为(76.44±43.65)分,其健康问题多集中于"行动能力"和"疼痛或不适"两个维度.Tobit多因素回归分析显示,文化程度低(P=0.042,95%CI:0.032～0.143)与吸烟(P=0.013,95%CI:-0.154～-0.019)是RA患者HRQoL的危险因素.结论 RA患者HRQoL与EQ-VAS较一般人群相比情况尚可,但仍存在健康效用值较低的问题,其中文化程度低与吸烟的患者HRQoL较差.

研究黄芩清热除痹胶囊(Huangqin Qingre Chubi Capsules,HQC)治疗类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的作用及机制.70 只雄性SPF级大鼠随机分为正常组,模型组,HQC低(0.18 g·kg-1)、中(0.36 g·kg-1)、高(0.72 g·kg-1)剂量组,甲氨蝶呤(MTX,0.75 mg·kg-1)组,阴性对照组(NC组,模型+生理盐水).佐剂性关节炎(AA)大鼠成纤维样滑膜细胞(fibro-blast-like synoviocytes,FLS)分为正常组,模型组,HQC低(5%HQC含药血清+95%滑膜培养基)、中(10%HQC含药血清+90%滑膜培养基)、高(15%HQC含药血清+85%滑膜培养基)剂量组,阴性对照组.采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白免疫印记法(Western blot)检测甲基转移酶3(methyltransgerase like 3,METTL3)、分泌型卷曲相关蛋白4(SFRP4)、β-连环蛋白(β-catenin)、细胞周期蛋白 D1(CCND1)、V-Myc骨髓细胞瘤病毒癌基因同源物(c-Myc)、纤连蛋白(fibronectin)、基质金属蛋白酶3(matrix metalloproteinase 3,MMP3)mRNA和蛋白的表达.免疫荧光法进一步检测MMP3 和β-catenin蛋白表达.在AA-FLS上敲低METTL3 基因表达水平,进一步检测各基因表达情况.酶联免疫吸附法(ELISA)检测白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-8 的水平.结果显示,与正常组相比,模型组大鼠四肢均发现红肿现象,关节肿胀程度明显增加;与模型组相比,各给药组关节肿胀度显著下降(P<0.05),后足撤退阈值和体质量指数均显著增加(P<0.05).METTL3 在AA大鼠高表达,且与SFRP4 的表达呈负相关.AA-FLS经给药后,METTL3、β-catenin、CCND1、c-Myc、fibronectin、MMP3 mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.05).与模型组相比,敲低METTL3 后β-catenin、CCND1、c-Myc、fibronectin、MMP3 mRNA和蛋白表达均降低(P<0.05).同时HQC+敲低METTL3 组的β-catenin、CCND1、c-Myc、fibronectin、MMP3 mRNA和蛋白表达均明显低于METTL3 敲低组(P<0.05).HQC能不同程度降低IL-1β、IL-6、IL-8 水平(P<0.05).结果表明,HQC对AA大鼠有明显改善作用;METTL3 在AA大鼠滑膜组织和AA-FLS中表达显著升高,这可能是诊断和治疗RA的潜在靶点;HQC通过METTL3-SFRP4/Wnt/β-catenin信号通路改善RA,具有明显的抗炎和抗风湿作用.

目的 类风湿性关节炎(RA)患者对艾拉莫德的治疗反应与患者预后显著相关,早期识别对艾拉莫德治疗不应答的患者并及时调整治疗方案,对改善预后具有重要意义.基于此,本研究将微血流成像应用于艾拉莫德治疗的RA患者中,并探讨其对RA患者艾拉莫德治疗反应性的预测价值.方法 纳入湖州市第三人民manbet官网登录 2022年1月—2023年1月接受艾拉莫德治疗的139例RA患者,根据治疗反应将患者分为应答组(88例)和无应答组(51例).收集患者治疗前微血流成像资料,采用多因素logistic回归分析筛选RA艾拉莫德治疗不应答的影响因素,构建预测模型,并分析模型预测价值.结果 多因素logistic回归分析显示,动脉阻力指数(OR=0.362)、血流分级 0 级(OR=0.440)、Ⅰ 级(OR=0.314)、Ⅱ级(OR=0.120)、红细胞沉降率(ESR,OR=1.117)、疾病活动指数(DAS,OR=1.367)、晨僵时间(OR=1.159)均是RA艾拉莫德治疗不应答的影响因素(P＜0.05).基于上述5项指标构建的预测模型预测RA患者对艾拉莫德治疗不应答的C-index为0.816,AUC为0.816(95％CI:0.808～0.938).结论 动脉阻力指数、血流分级、ESR、DAS、晨僵时间是RA患者艾拉莫德治疗反应的影响因素,基于此构建的预测模型可用于RA患者艾拉莫德治疗不应答发生风险的预测.

目的:探讨多模式超声技术对类风湿关节炎(RA)患者尺侧腕伸肌腱(ECU)病变诊断价值.方法:选取2021年12月至2023年1月烟台市烟台山manbet官网登录 风湿科确诊的175例RA患者,将其纳入RA组,将50例非RA但存在手腕部临床症状的患者纳入非RA组,另选取50名健康志愿者纳入健康对照组.所有受试者均行腕部常规超声及剪切波弹性成像(SWE)检查,记录腕关节超声图像特征及ECU能量多普勒(PDUS)血流分布情况,SWE测量ECU得出弹性模量值(EI)、速度模量值(VI).比较组间差异,绘制RA患者受试者工作特征(ROC)曲线,确定曲线下面积及最佳截断值.结果:3组ECU的EI、VI比较,差异有统计学意义(F=61.15、61.28,P＜0.05);RA患者EI、VI最佳截断值分别为319.35 kPa和10.55 m/s;RA患者中年龄与病程因素对EI有统计学意义(r=0.19、0.21,P＜0.05),年龄、病程、腕关节超声评分、尺侧腕伸肌腱能量多普勒(ECUPDUS)分级对VI有统计学意义(r=0.19、0.15、-0.16、-0.17,P＜0.05).结论:SWE可以定量、无创评估RA患者ECU硬度信息,对灰阶超声及PDUS进行补充,多模式超声技术可明确判断RA患者ECU病变相关性.

目的 探讨藏药十味乳香胶囊对类风湿性关节炎(RA)大鼠的治疗作用.方法 建立胶原诱导的RA大鼠病证结合模型并给予相应药物,观察大鼠的一般状态,测量体重、足跖厚度和踝关节肿胀度.给药28 d后,处死大鼠并收集血液、关节、胸腺和脾组织,用于生化和病理检测.结果 十味乳香胶囊可抑制血清和滑膜组织中白细胞介素-6、白细胞介素-1β、肿瘤坏死因子-α的含量,降低CD4+/CD8+T细胞的比例,改善RA大鼠的关节炎症状.结论 十味乳香胶囊对RA大鼠具有较好的治疗效果.

经皮给药可避免口服给药后胃肠道消化作用和肝脏首过效应的影响,近年来逐渐成为研究的热点.现总结了经皮给药系统在治疗类风湿性关节炎方面的应用,为后续的开发及临床应用提供参考.