目的:探讨降解肿瘤细胞周围基质对聚乙二醇修饰的金纳米星(GNS－PEG)肿瘤递送及三阴性乳腺癌光热治疗疗效的影响。方法:构建GNS－PEG颗粒，观察其理化特征并检测其光热性能。在细胞水平检测常山酮(HF)和光热治疗的细胞毒性。于BALB/c裸鼠皮下接种4T1细胞建立三阴性乳腺癌小鼠模型。经尾静脉注射5次HF(HF组)，对肿瘤组织切片行马松染色及转化生长因子β1(TGFβ1)、α－平滑肌肌动蛋白(α－SMA)、CD31免疫组化染色，观察肿瘤基质降解效果。经尾静脉注射5次HF后再注射GNS－PEG(HF+GNS－PEG组)，采用电感耦合等离子体质谱法测定肿瘤组织中GNS－PEG的含量。以近红外激光照射GNS－PEG组和HF+GNS－PEG组小鼠的肿瘤部位，用红外摄像机记录温度变化。观察各组小鼠的肿瘤生长和体重变化情况。对各组小鼠的肿瘤组织切片行Ki－67免疫组化染色、原位末端转移酶标记染色和HE染色，观察肿瘤增殖、凋亡及坏死情况。对各组小鼠的心、肝、脾、肺及肾组织切片行HE染色，观察细胞形态变化。结果:成功构建了具有多枝结构的GNS－PEG颗粒，粒径为73.5 nm。GNS的吸收峰为810 nm，处于近红外区。GNS－PEG的光热转换率高达79.3%，并且可以通过激光能量控制光热效果。HF具有浓度依赖的细胞毒性，当HF浓度达1 000 nmol/L时，4T1细胞存活率低至(22.8±2.6)%。GNS－PEG的光热作用对4T1细胞杀伤效果显著，当浓度达25 pmol/L时，细胞存活率为(32.7±5.2)%。HF组小鼠肿瘤组织中胶原蛋白容积分数、TGFβ1积分光密度和α－SMA积分光密度分别为(2.1±0.2)%、3.1±0.4、5.2±1.9，均低于对照组(均 P<0.01)，血管直径为(8.6±2.9)μm，高于对照组( P<0.05)。HF+GNS－PEG组小鼠肿瘤组织中金元素浓度为52.4 μg/g，高于GNS－PEG组(15.9 μg/g， P<0.05)。激光照射后，HF+GNS－PEG组小鼠肿瘤部位的温度明显高于GNS－PEG组，第4 min时，GNS－PEG组和HF+GNS－PEG组小鼠肿瘤部位温度分别为51.5 ℃和57.7 ℃；HF+GNS－PEG组小鼠的肿瘤体积得到有效抑制。各组小鼠的体重在监测期间未发生显著变化。GNS－PEG组小鼠的主要脏器未见明显异常，但HF组和HF+GNS－PEG组可见部分肝细胞水肿、变性。 结论:降解三阴性乳腺癌的肿瘤细胞周围基质能明显改善GNS－PEG的肿瘤递送，提高光热治疗疗效。

目的:考察滋肾丸方对糖尿病脑病小鼠胆汁酸代谢的影响，探讨其改善糖尿病脑病的作用机制。方法:选用雄性C57BL/6J小鼠，采用高脂饲料喂养联合单次腹腔注射链脲佐菌素（120 mg/kg）复制T2DM小鼠模型，在高血糖持续刺激8周后采用Morris水迷宫实验筛选糖尿病脑病模型小鼠，并将造模成功小鼠按随机数字表法分为模型组和滋肾丸方组，每组12只，另设12只为对照组。滋肾丸方组小鼠灌胃滋肾丸方粗提取物9.36 g/kg，对照组和模型组灌胃等体积蒸馏水，1次/d，持续8周。采用Morris水迷宫实验检测小鼠认知功能，采用甲酚紫染色检测海马区颗粒神经元数量，采用液质联用技术检测血清及粪便胆汁酸含量，采用荧光定量PCR实验检测肝脏胆汁酸合成酶胆固醇7α-羟化酶（CYP7a1）、甾醇-27-羟化酶（CYP27a1）、法尼醇X受体（FXR）、成纤维生长因子15（FGF15）、成纤维生长因子受体4（FGFR4），回肠顶端钠依赖性胆汁酸转运蛋白（ABST）mRNA水平。结果:与模型组比较，滋肾丸方组小鼠逃避潜伏期缩短（ P<0.05或 P<0.01），首次到达平台时间减少（ P<0.01），穿越平台次数增加（ P<0.01），海马区神经细胞损伤减轻；滋肾丸方组小鼠血清及粪便总胆汁酸含量降低（ P<0.05或 P<0.01）；肝脏中CYP7a1、CYP27a1 mRNA水平增加（ P<0.01），FXR、FGF15 mRNA水平降低（ P<0.01）；回肠ABST mRNA水平降低（ P<0.01）。 结论:滋肾丸方可能调控胆汁酸代谢，抑制FRX-FGF15/FGFR4信号和ABST表达从而促进新胆汁酸合成和结合型胆汁酸重吸收，进而发挥改善糖尿病脑病小鼠认知功能的作用。

目的:基于hnRNPF调控的TLR4/NF-κB信号通路探讨肾元颗粒对db/db糖尿病肾脏病小鼠炎症的影响及其作用机制.方法:将16只SPF级db/db小鼠随机分为模型组和肾元颗粒组,予0.2％腺嘌呤模型饲料;另取8只同背景系野生小鼠作为空白组,予普通饲料.肾元颗粒组予以肾元颗粒混悬液灌胃给药,模型组和空白组小鼠予等量双蒸水灌胃,连续12周.给药12周后代谢笼收集小鼠24 h尿液,取各组小鼠血清、肾脏组织.生化检测各组小鼠血清肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)、谷丙转氨酶(ALT);ELISA法检测尿液中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)水平;PAS染色光镜观察肾组织病理改变;R-T PCR法检测小鼠肾脏组织中TLR4 mRNA、IL-6 mRNA、IKKα mRNA、NF-κB P65 mRNA、TNF-α mRNA、hnRNPF mRNA表达水平;Western blotting检测肾脏组织中hnRNPF、TLR4蛋白表达及IKKα、NF-κB P65磷酸化水平.结果:模型组小鼠血清SCr、BUN、ALT显著高于空白组(P＜0.05);肾元颗粒组小鼠血清SCr、BUN、ALT显著低于模型组(P＜0.05).模型组小鼠尿液NGAL水平显著高于空白组(P＜0.05);肾元颗粒组小鼠尿液NGAL水平明显低于模型组(P＜0.05).与空白组比较,模型组小鼠肾脏组织病变严重;与模型组比较,肾元颗粒组小鼠肾脏病变有所改善.模型组小鼠肾脏组织中TLR4 mRNA、IL-6 mRNA、IKKα mRNA、NF-κB P65 mRNA、TNF-α mRNA相对表达量高于空白组(P＜0.05),hnRNPF mRNA相对表达量低于空白组(P＜0.05);肾元颗粒组小鼠肾脏组织中TLR4 mRNA、IL-6 mRNA、IKKα mRNA、NF-κB P65 mRNA、TNF-α mRNA相对表达量低于模型组(P＜0.05),hnRNPFmRNA相对表达量高于模型组(P＜0.05).模型组小鼠肾脏组织中hnRNPF蛋白相对表达量低于空白组(P＜0.05),TLR4蛋白相对表达量及IKKα、NF-κB P65磷酸化水平高于空白组(P＜0.05);肾元颗粒组小鼠肾脏组织中hnRNPF蛋白相对表达量高于模型组(P＜0.05),TLR4蛋白相对表达量及IKKα、NF-κB P65磷酸化水平低于模型组(P＜0.05).结论:肾元颗粒可能通过hnRNPF调控的TLR4/NF-κB信号通路,抑制db/db糖尿病肾脏病小鼠炎症反应,从而改善相关生化指标,减轻肾脏损害.

目的:本研究观察温胆宁心颗粒(WDNX)对心肌梗死合并抑郁症大鼠BDNF/TrkB/PI3K/Akt信号通路的影响,探讨其可能的作用机制.方法:通过皮下多点注射异丙肾上腺素和慢性不可预见性轻度应激方法制备心肌梗死合并抑郁症模型大鼠,给予WDNX干预28 d后,经胸心脏超声检测心功能变化;根据糖水偏好和旷场实验评估大鼠抑郁状态;采用苏木素-伊红和尼氏染色观察心肌、脑组织病理变化及神经元损伤;最后通过免疫组化和Western blotting技术检测BDNF/TrkB/PI3K/Akt通路的表达水平.结果:与空白组比较,模型组大鼠左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS)显著降低(P<0.01),心肌组织可见大量纤维水肿,胞质疏松,组织边缘可见心肌纤维溶解,伴有少量淋巴细胞浸润;脑组织有明显弥散型损伤,间质肿胀,炎症细胞聚集,形态不规则;尼氏染色观察,模型组神经元数量显著减少,形态不规则,排列松散紊乱,细胞间隙增大,还导致尼氏体形态的固缩,出现病理改变;模型大鼠糖水偏好度、中央区活动时间和中央穿越次数明显降低(P<0.01);与模型组比较,WDNX组LVEF、LVFS显著升高(P<0.01),心肌纤维水肿、胞质疏松、炎症浸润、细胞空洞变性及纤维溶解程度均有改善,脑组织神经元形态较为规则,排列较整齐紧密,神经元数量相对增多,还可恢复尼氏体形态;WDNX组大鼠糖水偏好度、中央区活动时间和中央穿越次数明显增加(P<0.05).免疫组化染色结果:与空白组比较,模型组大鼠心肌和脑组织(海马、皮层和下丘脑)BDNF蛋白表达明显降低(P<0.01),心肌TrkB、PI3K和Akt蛋白表达均明显降低(P<0.01);与模型组比较,WDNX组心肌和脑组织(海马、皮层和下丘脑)BDNF蛋白表达明显升高(P<0.05),心肌TrkB、PI3K和Akt蛋白表达均明显升高(P<0.01);Western blotting检测结果:与空白组比较,模型组大鼠心肌BDNF、TrkB、PI3K和Akt蛋白表达均明显降低(P<0.01);与模型组比较,WDNX组心肌BDNF、TrkB、PI3K和Akt蛋白表达均明显升高(P<0.05).结论:温胆宁心颗粒能有效改善心肌梗死合并抑郁大鼠的心肌损伤和抑郁行为,这可能与BDNF/TrkB/PI3K/Akt通路的激活相关.

糖尿病肾病是导致终末期肾病的首要病因,王小琴教授运用中医理论诊治糖尿病肾病取得较好的效果.王小琴教授认为本虚标实为本病的中医核心病机,本虚为脾肾亏虚,标实为热毒、水湿、痰浊、瘀血,脉络瘀阻贯穿疾病始终.总治则为补肾健脾、祛瘀通络,早期以养阴益气,补肾填精为主,常以参芪地黄汤加减;中期在扶正固本基础上,针对兼症辨证论治,如无明显浮肿,则以补中益气汤加减,如浮肿伴大量蛋白尿,常选用实脾饮加减;晚期以益肾健脾,调和阴阳,化湿泄浊为主,常以补肾泄浊之肾元颗粒联合自拟益气健脾、活血泄浊方加减治疗.文章归纳总结了王小琴教授运用经方加减分期论治糖尿病肾病的独特辨治经验.

目的 探讨滇桂艾纳香提取物通过促进子宫平滑肌收缩治疗功能失调性子宫出血(DUB)的作用机制.方法 利用米非司酮联合米索前列醇建立DUB大鼠模型,成模的雌性大鼠40只,随机分5组:正常妊娠组、DUB模型组、益母草颗粒3.125 g·kg-1组、滇桂艾纳香提取物0.4 g·kg-1组以及0.2 g·kg-1组,另取8只未受孕性成熟雌性大鼠作空白对照组,观察滇桂艾纳香提取物对DUB模型大鼠子宫平滑肌收缩的影响,Western blotting法测定大鼠子宫平滑肌中β2肾上腺素受体(β2AR)、环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)及p-CREB蛋白表达水平,并检测大鼠子宫平滑肌中蛋白激酶A(PKA)活性和Ca2+离子浓度.结果 与DUB模型组相比,滇桂艾纳香提取物可提高大鼠子宫收缩频率(P＜0.05),增加子宫平滑肌Ca2+离子浓度,并且增加p-CREB/CREB蛋白表达(P＜0.05);滇桂艾纳香提取物还可降低子宫平滑肌PKA活力(P＜0.01),但对β2受体表达没有明显影响.结论 滇桂艾纳香提取物可能是通过抑制β2受体的活化,间接增强转录调节因子CREB对与子宫平滑肌收缩相关的转录调控,从而促使子宫肌层收缩,产生治疗DUB的作用.

目的:基于免疫-炎症调节作用探讨固元汤治疗儿童频复发肾病综合征(FRNS)的疗效及其作用机制.方法:浙江中医药大学附属第一manbet官网登录 2018 年1 月至2021 年1 月期间门诊就诊及住院的FRNS患儿86 例,按1∶1 比例随机分为对照组与观察组,两组均使用激素和(或)免疫抑制剂治疗,在此基础上对照组加用黄芪颗粒,观察组加用固元汤治疗.分别于治疗前及治疗 6、18 个月后,评价两组患儿的中医证候评分,检测血清白蛋白和尿蛋白定量,检测外周血T淋巴细胞亚群(CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)、炎症因子(TNF-α、IL-6、IL-10)和免疫球蛋白(IgA、IgG、IgM)水平变化,随访统计复发及感染情况.结果:观察组与对照组分别有 42、40 例完成研究,观察组总有效率显著高于对照组(P<0.05);治疗 6 个月,观察组患儿CD4+、CD4+/CD8+显著高于对照组.治疗后 6、18 个月,观察组中医证候评分、尿蛋白定量及血清TNF-α、IL-6、IL-10 均显著低于对照组,IgA、IgG及血清白蛋白显著高于对照组(P<0.05).随访期间,观察组的复发率、复发频次、呼吸道感染率均显著低于对照组,感染事件发生率显著低于对照组(P<0.05).结论:固元汤治疗儿童FRNS可提高近期疾病控制效果,减轻蛋白尿及临床症状,降低复发及感染尤其是呼吸道感染风险,其机制可能与调节免疫-炎症反应有关.

目的:探讨肾元颗粒对糖尿病小鼠肾脏中miR-199b-5p/Klotho/FGFR-1/EGR-1通路及钙磷代谢的影响.方法:链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)诱导小鼠糖尿病模型,模型成功后随机分为肾元颗粒组[4.55g/(kg·d)]10只和模型对照组10只,另设空白对照组10只.给予相应药物灌胃8周,给药前后检测血糖以及血清中肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、钙(Ca)和磷(P),采用RT-qPCR检测肾脏组织中miR-199b-5p、Klotho、FG-FR-1和EGR-1核糖核酸表达情况,采用westem-blot(WB)法检测Klotho、FGFR-1和EGR-1蛋白表达情况,检测小鼠右下肢平均骨密度.结果:用药后与空白对照组相比,模型对照组P、SCr升高(P＜0.05),Ca、骨密度明显降低(P＜0.05),同时miR-199b-5p和EGR-1表达上调(P＜0.05),Klotho和FGFR-1表达下调(P＜0.05).用药后与模型对照组比较,肾元颗粒组P、SCr降低(P＜0.05),Ca升高(P＜0.05),miR-199b-5p、EGR-1表达下调(P＜0.05),Klotho、FGFR-1表达上调(P＜0.05).结论:肾元颗粒缓解糖尿病肾损害和改善钙磷代谢异常的作用机制,或与miR-199b-5p/Klotho/FGFR-1/EGR-1通路有关.

目的:观察太芪培元颗粒治疗气阴两虚肺肾不足的人类免疫缺陷病毒(HIV)感染者的临床疗效.方法:采取前瞻性队列研究的方法,纳入HIV感染者81例,给予太芪培元颗粒口服180d,按照CD4+T淋巴细胞计数上升>50个和上升<5个分为治疗有效组和治疗无效组,并按照性别、民族匹配选取10个样本进行病例观察.观察指标包括CD4 +T淋巴细胞、CD8 +T淋巴细胞、中医症状体征积分、HIV-RNA病毒载量的差异.结果:治疗有效组CD4 +T淋巴细胞显著升高(P<0.05),中医症状体征总积分显著降低(P<0.05),治疗无效组CD4 +T淋巴细胞显著降低(P<0.05).且总样本前后比较,中医症状体征总积分降低,差异有统计学意义(P<0.05);对CD4 +T淋巴细胞和中医症状总积分进行Pearson相关分析得出,治疗有效组、治疗无效组以及总样本中这种相关性均无统计学意义.结论:太芪培元颗粒可有效改善气阴两虚肺肾不足型HIV感染者中医症状总积分,且这种改善与CD4 +T淋巴细胞计数的升高不具有相关性.

目的:观察太芪培元颗粒对气阴两虚肺肾不足型CD4 +T淋巴细胞>350个· uL-1的HIV感染者的临床疗效.方法:采用队列研究,将108例HIV感染者根据是否服用太芪培元颗粒分为暴露组及非暴露组.观察6个月,对比两组患者的CD4 +T淋巴细胞、HIV-RNA病毒载量、中医症状体征积分、Toll 样受体-4(toll like receptor-4,TLR-4)、白介素-10(IL-10)等指标的差异.结果:经过6个月的治疗,暴露组比非暴露组的中医症状体征积分、TLR-4受体指标变化差异有统计学意义(P<0.05).CD4 +T淋巴细胞、HIV-RNA病毒载量、IL-10等指标差异无统计学意义(P>0.05).结论:运用太芪培元颗粒治疗气阴两虚肺肾不足型CD4 +T淋巴细胞>350个· uL-1HIV的感染者,可以改善患者临床症状,稳定患者CD4 +T淋巴细胞计数,抑制TLR-4受体.太芪培元颗粒可能是通过机体免疫调节的过程发挥作用.