目的:探讨花旗松素（taxifolin，TAX）改善顺铂（cisplatin）致急性肾损伤的作用及机制。方法:（1）40只C57BL/6小鼠随机分为4组：对照组、TAX组、顺铂组、顺铂+TAX组。测量各组小鼠体重情况。检测各组小鼠血清肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）水平；通过HE染色观察小鼠肾组织病理学改变；通过酶联免疫吸附测定（ELISA）法测定血清炎性因子白细胞介素（IL）-6和肿瘤坏死因子（TNF）-α水平；通过试剂盒测定各组小鼠肾组织氧化应激指标[活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、还原型谷胱甘肽（GSH）]；实时荧光定量PCR法测定炎性因子 IL- 6、 TNF- α和 IL- 1β，抗氧化基因解耦联蛋白2（ UCP2）、 SOD2、 CAT以及过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α（ PGC- 1α）mRNA表达情况；通过测定肾组织ATP水平和线粒体DNA（mtDNA）含量评价线粒体功能；通过Western印迹法测定腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）和磷酸化（p）-AMPK蛋白表达情况。（2）通过建立Lewis肺癌移植瘤C57BL/6小鼠模型评价TAX对顺铂化疗效果的影响。 结果:与对照组比较，TAX组小鼠体重未明显降低，且未出现明显肾损伤（均 P>0.05），提示口服TAX具有良好的安全性。与顺铂组比较，TAX能够显著延缓顺铂引起的小鼠体重下降，降低小鼠血清Scr和BUN水平，并缓解肾组织病理学改变（均 P<0.05）。TAX能够显著下调顺铂诱导的小鼠血清炎性因子IL-6和TNF-α水平，以及肾脏炎性因子 IL- 6、 TNF- α、 IL- 1β mRNA表达（均 P<0.05）。TAX能够显著降低顺铂致急性肾损伤小鼠肾组织ROS和MDA水平，并提高SOD、CAT和GSH活性（均 P<0.01）。同时，TAX能够显著上调顺铂致急性肾损伤小鼠肾脏抗氧化基因 UCP2、 SOD2、 CAT mRNA以及 PGC- 1α mRNA表达，并提高肾组织ATP和mtDNA水平（均 P<0.01）。Western印迹结果显示，TAX显著促进顺铂致急性肾损伤小鼠肾脏AMPK磷酸化蛋白表达（ P<0.01）。此外，通过Lewis肺癌移植瘤C57BL/6小鼠模型证实，TAX对顺铂抗肿瘤疗效无显著影响。 结论:TAX能够改善顺铂引起的肾脏氧化损伤，其机制可能与激活AMPK/PGC-1α通路有关。

目的 建立运脾消食方的HPLC指纹图谱并进行多成分含量测定,考察提取、浓缩、离心、制粒不同工艺阶段对运脾消食颗粒的影响.方法 以运脾消食颗粒的提取液、浓缩液、离心液、颗粒为供试品,采用高效液相色谱法建立不同工艺阶段的指纹图谱,同时进行相似度分析与色谱峰指认,测定方中绿原酸、阿魏酸、花旗松素、异牡荆素、芸香柚皮苷、橙皮苷、木犀草素、川陈皮素的含量.结果 10批运脾消食颗粒制备过程中不同工艺阶段与对照图谱相比,相似度均大于0.990,表明制剂工艺稳定可行,提取液中标定了 19个共有峰,浓缩、离心后共有峰增至21个,颗粒中共有峰为20个;含量测定结果显示运脾消食颗粒制备过程中不同工艺阶段对其整体质量有不同程度的影响.结论 浓缩期间稳定性较差的成分绿原酸损失较多,橙皮苷分子量相对较大在离心后转移率偏低,制粒后异牡荆素转移率略大于1.基于不同工艺阶段对运脾消食颗粒质量的影响进行探讨分析,可为中药制剂制备过程中整体质量评价的共性技术提供参考.

花旗松素是存在于松科植物、蔬菜和水果中的天然黄酮类化合物.本文对近年来花旗松素在神经系统疾病中的研究进展进行综述,包括帕金森病、阿尔茨海默病、亨廷顿病、脑淀粉样血管病、脊髓损伤、肝性脑病、脑缺血再灌注、胶质瘤和癫痫,并从花旗松素的抗神经元凋亡、抗神经炎症、抗氧化损伤和抑制蛋白异常积累的神经保护作用机制进行探讨,以期为进一步了解和研究花旗松素对神经系统疾病的防治作用提供科学依据.

目的:研究花旗松素(Taxifolin)对急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞恶性进展的影响及单核细胞趋化蛋白-1(CCL2)/CC趋化因子受体2(CCR2)轴发挥的作用.方法:体外培养ALL-T淋巴细胞CCRF-CEM;CCK-8法检测不同浓度Taxifolin对CCRF-CEM细胞活力影响,筛选本实验用Taxifolin浓度;将CCRF-CEM 细胞分为 control 组、Taxifolin-L 组、Taxifolin-M 组、Taxifolin-H 组、Taxifolin+rCCL2 组;EDU法检测各组CCRF-CEM细胞增殖;流式细胞术检测各组CCRF-CEM细胞凋亡;Trans well检测各组CCRF-CEM细胞侵袭能力;平板克隆形成实验检测各组CCRF-CEM细胞集落形成能力;RT-PCR检测各组CCRF-CEM细胞CCL2、CCR2基因表达水平;Western blot检测各组CCRF-CEM细胞CCL2、CCR2、Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达水平.结果:选择25、50、100 μmol/L三个Taxifolin浓度进行后续实验;与control组相比,Taxifolin-L、M、H组CCRF-CEM细胞凋亡率、Bax、Caspase-3蛋白表达水平显著升高,CCRF-CEM细胞EDU阳性细胞率、侵袭细胞数量、细胞克隆集落数、CCL2、CCR2基因表达水平、CCL2、CCR2、Bcl-2蛋白表达水平均显著性降低,且呈剂量依赖性(P＜0.05);与Taxifolin-H组相比,Taxifolin+rCCL2组CCRF-CEM细胞凋亡率、Bax、Caspase-3蛋白表达水平显著性降低,CCRF-CEM细胞EDU阳性细胞率、侵袭细胞数量、细胞克隆集落数、CCL2、CCR2基因表达水平、CCL2、CCR2、Bcl-2蛋白表达水平均显著性升高(P＜0.05).结论:Taxifolin可能通过抑制CCL2/CCR2轴,从而抑制CCRF-CEM细胞恶性进展.

目的:研究圆果算盘子Glochidion sphaerogynum(Muell.Arg.)Kurz的化学成分及细胞增殖活性.方法:采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20 葡聚糖凝胶、制备液相等多种色谱技术进行化合物的分离纯化,根据理化性质和波谱数据鉴定化合物的结构.采用 CCK-8 试剂盒检测 11 个化合物对巨噬细胞RAW264.7 的增殖作用.结果:从圆果算盘子 95%乙醇提取物中分离得到 17 个化合物,分别鉴定为:羽扇豆酮(1)、羽扇豆醇(2)、算盘子酮(3)、β-谷甾醇(4)、5,7-二羟基色原酮(5)、羽扇豆-1β,3β-二醇(6)、柚皮素(7)、二氢山柰酚(8)、圣草酚(9)、山柰酚(10)、槲皮素(11)、木犀草素(12)、儿茶素(13)、evofolin B(14)、丁香脂素(15)、正丁基-O-β-D-吡喃果糖苷(16)、花旗松素(17).其中,11 个化合物均可明显促进巨噬细胞RAW264.7 的增殖(P<0.05 或P<0.01).结论:所有化合物均为首次从该植物中分离得到.化合物 2、7、10 促进巨噬细胞RAW264.7 的增殖效果最明显.

目的 考察运脾消食方提取工艺放大影响因素.方法 HPLC法测定儿茶素、阿魏酸、花旗松素、异牡荆素、芸香柚皮苷、白术内酯Ⅱ、柚皮苷、桑色素、橙皮苷、木犀草素、常春藤皂苷元、白术内酯I、柚皮素、橙皮素的含量,建立指纹图谱,评价容器体积、火候、投料量对各成分含量的影响.结果 15 批样品指纹图谱相似度均大于0.995.14 种成分在各自范围内线性关系良好(r>0.999 0),平均加样回收率96.4%～103.3%,RSD 0.5%～2.7%.火候的影响程度大于提取容器体积、投料量.结论 多成分含量测定结合指纹图谱可为运脾消食方提取工艺放大后一致性评价的共性技术提供数据基础和理论参考.

目的:研究皂角刺饮片到标准汤剂的量值传递规律.方法:采用 18 批皂角刺饮片制备标准汤剂,测定18 批皂角刺标准汤剂的出膏率、浸出物含量,建立 18 批皂角刺饮片和标准汤剂超高效液相色谱特征图谱,采用高分辨质谱对特征峰进行成分鉴定,建立皂角刺饮片和标准汤剂中指标性成分东莨菪内酯和花旗松素的含量测定方法,以出膏率、浸出物含量、指标性成分含量、转移率、特征图谱为指标,研究饮片到标准汤剂的量值传递规律.结果:18批标准汤剂出膏率为 3.66%～5.99%,浸出物质量分数为 33.38%～47.62%,饮片特征图谱共标定 8 个特征峰,均能传递到标准汤剂中,并指认出其中 6 个成分,饮片与标准汤剂对照特征图谱的相似度＞0.90,特征图谱可作为共性质量特征用于皂角刺的鉴别和质量控制.指标性成分东莨菪内酯和花旗松素的平均转移率分别为 67.32%、24.10%.结论:可为皂角刺药材及其制剂质量标准的提高、皂角刺配方颗粒国家标准的制定提供参考.

目的 构建花旗松素磷脂复合物白蛋白纳米粒(taxifolin phospholipid complex albumin nanoparticles,·Tax-PC/BSA NPs)并优化其制备工艺,考察其肠吸收特性.方法 采用溶剂挥发法和新型白蛋白纳米粒制备技术(NabTM技术)制备花旗松素磷脂复合物白蛋白纳米粒.采用Box-Behnken设计-响应面法(Box-Behnken design-response surface method,BBD-RSM),优化其制备工艺并验证;以透射电子显微镜(transmission electron microscope,TEM)、粒径、多分散指数(polydispersity index,PDI)、ζ电位、差示扫描量热法(differential scanning calorimetry,DSC)、傅里叶变换红外光谱(Fourier transform infrared spectroscopy,FT-IR)及X射线衍射(X-ray diffraction,XRD)技术对Tax-PC/BSA NPs进行表征,测定理化性质并考察制剂稳定性;体外模拟消化释放,探讨制剂在人体消化环境的释放规律;大鼠在体单向肠灌流模型评价Tax-PC/BSANPs肠吸收特性.结果 Tax-PC/BSANPs的最优制备工艺为药脂比1∶3,药/BSA比1∶9.39,油水比1∶11.51,超声时间7.76min;3次验证实验结果显示,Tax-PC/BSANPs的包封率为(86.14±0.38)％,载药量为(7.27±0.03)％,渗漏率为(0.87±0.04)％.按优化后工艺所制Tax-PC/BSA NPs在TEM下呈类球状,平均粒径为(184.90±0.98)nm、PDI为0.275±0.010、ζ电位为(-36.6±0.53)mV,DSC、FT-IR、XRD 进一步验证了 Tax-PC/BSANPs 的形成;Tax-PC/BSANPs 溶解度相较花旗松素提高了 38.48倍,lgP值＞1,脂溶性明显提高;Tax-PC/BSANPs冻干粉在4 ℃下存放3个月稳定性良好;花旗松素、Tax-PC、Tax-PC/BSANPs 累积释放率分别为(48.26±0.71)％、(71.86±1.83)％、(82.73±0.62)％;Tax-PC/BSANPs、Tax-PC 和花旗松素在各肠段均有吸收,主要吸收部位分别为十二指肠和空肠,Tax-PC/BSANPs的吸收速率常数和表观吸收系数均显著高于Tax-PC和花旗松素(P＜0.05、0.01).结论 优化所得Tax-PC/BSANPs制备工艺稳定、可行;所制Tax-PC/BSANPs有效提高药物的脂溶性、水溶性,增强药物在体肠吸收能力.

目的 探索花旗松素对肝星状细胞的激活作用,通过转录组测序表征基因表达谱,分析潜在的作用机制.方法 在10 μg/L转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导下,体外培养大鼠肝星状细胞HSC-T6,分别给予62.5 μmol/L、125 μmol/L和250 μmol/L花旗松素处理,在24 h、48 h分别加入CCK8试剂,450 nm波长测定吸光度,计算不同浓度和时间下的细胞增殖率.在24 h通过AnnexinV/7AAD染色,流式细胞检测细胞凋亡.通过荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)法检测α-平滑肌肌动蛋白(alpha smooth muscle actin,α-SMA)、Ⅰ型胶原α1链(Collagen1A1)及Ⅲ型胶原α1链(Collagen3A1)基因mRNA相对表达量.通过Western blot检测α-SMA、Collagen1A1蛋白表达量.通过转录组测序,表征细胞基因表达谱并对差异基因进行基因本体论(Gene Ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)功能注释及功能富集分析.结果 花旗松素可显著抑制肝星状细胞增殖,处理24 h,125 μmol/L组和250 μmol/L组细胞增殖率分别为(66.7±8.6)%和(45.6±3.0)%.处理48 h,125 μmol/L组和250 μmol/L组的细胞增殖率分别为(60.5±2.9)%和(43.9±1.9)%,均显著低于模型组(P均＜0.05).花旗松素可促进细胞凋亡,处理24 h,花旗松素62.5 μmol/L组、125 μmol/L组、250 μmol/L组细胞凋亡率分别为(8.537±0.445)%、(8.85±0.169)%及(14.453±0.577)%,均显著高于模型组(P均＜0.05).处理24 h,花旗松素125 μmol/L组、250 μmol/L组可抑制α-SMA、Collagen1A1、Collagen3A1基因和α-SMA、Collagen1A1蛋白表达(P均＜0.05).差异基因表达表现为促肝纤维化发生相关基因下调,如氧化型低密度脂蛋白受体1(oxidized low-density lipoprotein receptor 1,Olr1)、人从状蛋白(Plexin A4,Plxna4)、反应蛋白1(Spondin 1,Spon1)、聚集蛋白(Agrn)等,以及细胞抗氧化及死亡相关的基因上调,如血红素加氧酶1(heme oxygenase 1,Hmox1)等.结论 花旗松素对肝星状细胞具有抑制增殖、促进凋亡、抑制激活的作用,推测其可能通过调控多项基因表达,主要调控因子之间相互作用信号通路、卟啉与叶绿素代谢信号通路、Hedgehog信号通路和PPARγ信号通路发挥作用.

目的 探讨花旗松素(TAX)对自发性高血压大鼠(SHR)心肌肥厚的影响及分子机制.方法 24只SHR分为SHR对照组(SHR组)、TAX组(20 mg/kg)、TAX+PERK激活剂CCT020312(CCT)组(20 mg/kg TAX+2 mg/kg CCT),每组 8 只;另选 8 只正常血压Wistar-Kyoto(WKY)大鼠作为正常对照组(WKY组),给予相应的药物持续干预 8 周.实验过程中观察大鼠血压变化,并于干预结束后超声心动图检测大鼠舒张期室间隔厚度(IVSd)、收缩期室间隔厚度(IVSs)、左心室射血分数(LVEF)判断心肌肥厚程度和心脏功能,计算心脏指数、左心室指数,苏木精-伊红(HE)染色、小麦胚芽凝集素(WGA)染色和Masson染色评估心肌组织病理学变化,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测心肌组织中心房钠尿肽(ANP)、B型利钠肽(BNP)、I型胶原蛋白α1 链(COL1A1)和Ⅲ型胶原蛋白α1 链(COL3A1)mRNA表达,Western blot 检测心肌组织蛋白激酶 R 样内质网激酶(PERK)-转录激活因子 4(ATF4)通路相关蛋白表达.结果 干预结束后,与WKY组相比,SHR组收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、IVSd、IVSs、心脏指数、左心室指数、心肌细胞横截面积、胶原容积分数(CVF)、心肌组织ANP、BNP、COL1A1 和COL3A1 mRNA表达、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、ATF4、C/EBP同源蛋白(CHOP)蛋白水平和p-PERK/PERK比值升高(均P<0.05),LVEF降低(P<0.05);与SHR组相比,TAX组SBP、DBP、IVSd、IVSs、心脏指数、左心室指数、心肌细胞横截面积、CVF、心肌组织ANP、BNP、COL1A1和COL3A1 mRNA表达、GRP78、ATF4、CHOP蛋白水平和p-PERK/PERK比值降低(均P<0.05),LVEF升高(P<0.05);CCT020312可部分逆转TAX对心脏功能和心肌肥厚的保护作用.结论 TAX可通过抑制内质网应激(ERS),改善高血压心肌肥厚,其作用机制可能与抑制PERK-ATF4通路有关.