目的:通过检测肝郁化火型迟发性痤疮女性病人血清趋化因子CCL5、CXCL10表达水平,分析其与病人病情关系.方法:收集80例肝郁化火型迟发性痤疮女性病人作为痤疮组,根据痤疮Pillsbury国际改良分级法分为轻组(n=23)、中组(n=32)、重组(n=25).以同时段一般资料有可比性的80名女性体检健康者作为对照组.采用酶联免疫吸附法检测血清CCL5、CXCL10表达水平以及炎性因子白细胞介素(IL)-1β、干扰素-γ(IFN-γ)、IL-2水平,并分析其在各组中表达差异.Pearson法分析CCL5、CXCL10与IL-1β、IFN-γ、IL-2的相关性.结果:痤疮组血清CCL5、CXCL10、IL-1β、IFN-γ、IL-2表达水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01).血清CCL5、CXCL10表达水平与痤疮组病人年龄、体质量指数、经期状态无关(P>0.05);月经前加重病人血清CCL5、CXCL10表达水平高于月经前无加重者,差异有统计学意义(P<0.01).重组、中组及轻组血清CCL5、CXCL10、IL-1β、IFN-γ、IL-2表达水平逐次降低,差异有统计学意义(P<0.05).相关性显示,CCL5、CXCL10均与IL-1β、IFN-γ、IL-2存在正相关关系(P<0.05～P<0.01).结论:肝郁化火型迟发性痤疮女性病人血清中CCL5、CXCL10呈上调表达,病情越重,其表达水平越高,可为临床评估和治疗迟发性痤疮病情严重度提供参考.

目的 探讨罗沙司他联合多糖铁复合物、生血宁治疗重组人促红素效果不佳的维持性血液透析肾性贫血患者的临床疗效.方法 将重组人促红素效果不佳的维持性血液透析肾性贫血患者以随机数字表法分成对照组与试验组.对照组口服罗沙司他,体质量＞60 kg,每次120 mg,每周3次,体质量45～60 kg,每次100 mg,每周3次;口服多糖铁复合物,每次300 mg,每天1次.试验组在对照组基础上口服生血宁,每次0.25～0.50 g,每天3次.2组均治疗3个月.对比2组临床疗效、炎症因子、铁代谢、肾功能、贫血指标、中医证候评分及药物不良反应发生情况.结果 对照组入组34例,脱落1例,最终33例纳入分析;试验组入组35例,脱落1例,最终34例纳入分析.试验组和对照组治疗后的总有效率分别为97.06％(33例/34例)和81.82％(27例/33例),在统计学上差异有统计学意义(P＜0.05).治疗后,试验组和对照组的核转录因子-κB(NF-κB)分别为(24.09±3.06)和(35.23±4.11)ng·L-1,干扰素 γ(IFN-γ)分别为(41.39±4.13)和(50.10±5.27)ng·L-1,转铁蛋白饱和度(TAST)分别为(38.62±5.91)％和(31.16±4.73)％,血清铁蛋白(SF)分别为(28.13±5.77)和(22.47±4.65)μmol·L-1,血清铁(SI)分别为(15.66±3.76)和(13.19±2.94)μmol·L-1,24 h尿蛋白排泄率(24 h UPE)分别为(1.85±0.41)和(2.91±0.62)g·24 h-1,血尿素氮(BUN)分别为(5.16±0.67)和(6.89±0.97)mmol·L-1,血红蛋白(Hb)分别为(91.38±11.23)和(83.19±8.54)g·L-1,血细胞比容(Hct)分别为(29.01±7.40)％和(24.56±5.69)％,主症评分分别为(5.29±1.05)和(7.15±1.53)分,次症评分分别为(3.11±0.46)和(4.98±0.77)分,总评分分别为(8.40±1.49)和(12.13±2.30)分,在统计学上差异均有统计学意义(均P＜0.05).试验组和对照组的药物不良反应总发生率分别为14.71％和9.09％,在统计学上差异无统计学意义(P＞0.05).结论 罗沙司他联合多糖铁复合物、生血宁治疗重组人促红素效果不佳的维持性血液透析肾性贫血患者的疗效好,可减轻炎症反应,调节铁代谢,改善肾功能,且药物不良反应少.

目的 探讨白细胞介素-38(IL-38)在乳腺癌患者中的表达及其对CD8+T细胞功能的调控作用.方法 纳入2020 年7 月—2022 年9 月在新乡医学院第一附属manbet官网登录 就诊的44 例乳腺癌患者、25 例乳腺良性肿瘤患者和20 例对照者.分离所有受试者的血浆和外周血单个核细胞,分离乳腺癌患者肿瘤组织中的肿瘤浸润淋巴细胞,纯化CD8+T细胞.应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆IL-38 蛋白水平,应用实时定量PCR检测组织IL-38 mRNA相对表达量.使用重组人IL-38 刺激乳腺癌患者外周血和肿瘤组织分离的CD8+T细胞,建立CD8+T细胞与乳腺癌细胞系MCF-7 的共培养系统,通过测定乳酸脱氢酶水平计算靶细胞死亡比例,ELISA法检测培养上清中穿孔素、颗粒酶B、干扰素-γ和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,流式细胞术检测CD8+T细胞的免疫检查点分子表达.结果 乳腺癌患者血浆IL-38 水平(74.23±19.88 pg/mL)高于乳腺良性肿瘤患者(62.87±16.27 pg/mL,P=0.018)和对照者(61.77±12.75 pg/mL,P=0.013).乳腺癌患者肿瘤组织中IL-38 mRNA相对表达量显著高于癌旁组织(1.57±0.22 vs.1.00±0.18,P<0.001).外周血和肿瘤浸润CD8+T细胞诱导靶细胞死亡比例、穿孔素和颗粒酶B分泌在直接接触共培养组中的水平高于间接接触共培养组(P<0.05),但干扰素-γ和TNF-α分泌水平在直接接触共培养组和间接接触共培养组之间的差异无统计学意义(P>0.05).在直接接触共培养组内,靶细胞死亡比例、穿孔素、颗粒酶B、干扰素-γ、TNF-α在IL-38 刺激组中的水平低于无刺激组(P<0.05).在间接接触共培养组内,靶细胞死亡比例、干扰素-γ、TNF-α在IL-38 刺激组中的水平亦低于无刺激组(P<0.05),但穿孔素和颗粒酶B水平在间接接触共培养组内的IL-38 刺激组和无刺激组之间的差异无统计学意义(P>0.05).CD8+T细胞中免疫检查点分子表达水平在无刺激组和IL-38 刺激组之间的差异均无统计学意义(P>0.05).结论 乳腺癌患者中高表达的IL-38 可能参与诱导CD8+T细胞功能衰竭.

目的:探讨新疆出血热病毒（XHFV）糖蛋白的2个抗原优势区（GcⅠ和GcⅡ）以不同嵌合策略以及不同免疫方式诱导小鼠免疫应答的效果。方法:以在5'端加入或不加鼠白细胞介素-2（IL-2）信号肽与通用型辅助性T细胞（Th）表位为不同设计策略，将GcⅠ、GcⅡ及GcⅠ上已鉴定出来的表位（Gc 233~248、Gc 241~256和Gc 281~296）分别进行融合并构建至真核表达载体pVAX1与原核表达载体pET-28a上。采用间接免疫荧光法检测重组真核质粒的体外表达效果后进行大量提取，将重组原核质粒转化大肠杆菌BL21进行诱导表达及纯化。通过基因免疫、蛋白免疫和DNA初免-蛋白加强免疫（联合免疫）3种方式免疫BALB/c小鼠，酶联免疫吸附测定法检测小鼠体内IgG抗体水平以及小鼠脾细胞培养上清中IL-4和干扰素-γ（IFN-γ）的含量，噻唑蓝比色法检测小鼠脾T淋巴细胞的增殖情况。 结果:双酶切及测序结果表明8种重组质粒构建成功。荧光显微镜下可见构建的重组真核质粒在体外细胞均能成功表达。3次免疫小鼠后，各实验组的小鼠血清IgG抗体水平和刺激指数均明显高于对照组（均 P<0.01）。Th2型细胞因子IL-4与Th1型细胞因子IFN-γ的质量浓度检测结果表明，联合免疫组引起的免疫应答偏向Th1型。 结论:成功构建了XHFV糖蛋白的多表位嵌合疫苗且靶抗原在小鼠体内可有效表达，各免疫组与对照组相比均激发了较强的体液免疫及细胞免疫应答，其中pVAX1-ST（GcⅠe+GcⅡ）联合重组蛋白r（GcⅠe+GcⅡ）的免疫效果最好，有望作为XHFV的新型候选疫苗。

目的:探讨长链非编码RNA(long non-coding RNAs，lncRNA)Gm13568对A1型星形胶质细胞活化及实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis，EAE)小鼠疾病进程的影响与分子机制。方法:构建特异性靶向星形胶质细胞的lncRNA Gm13568沉默与对照的重组慢病毒载体，分别命名为LV-Inhibit-Gm13568和LV-ctrl，并包装病毒。1×10 7 TU病毒悬液静脉注射入C57BL/6小鼠体内7 d后，髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55(myelin oligodendrocyte glycoprotein 35-55，MOG 35-55)多肽诱导EAE模型。实验分为PBS组、EAE组、LV-ctrl+EAE组和LV-Inhibit-Gm13568+EAE组，采用双盲法每日对小鼠进行神经功能评分。EAE小鼠诱导后23 d，取各组小鼠脊髓组织，利用real-time PCR测定A1型星形胶质细胞活化指标Serping 1、C3、Srgn和H2-T23的mRNA转录水平，同时测定IL-6、TNF-α、巨噬细胞趋化蛋白-1(macrophage chemotactic protein-1, MCP-1)和干扰素诱导蛋白-10(interferon-inducible protein-10, IP-10)的生成变化；Western blot检测脊髓组织胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein，GFAP)和Notch1的表达及信号转导与转录激活子3(signal transducer and activator of transcription 3，STAT3)的磷酸化水平(phosphorylated STAT3, p-STAT3)；免疫荧光法检测各组脊髓组织中Notch1活化后的胞内段蛋白(Notch1 intracellular domain，NICD)与GFAP的共表达；HE和劳克坚牢蓝染色(Luxol fast blue，LFB)分别观察脊髓组织内炎症细胞浸润及髓鞘脱失变化。 结果:与PBS组比较，EAE组和LV-ctrl+EAE组小鼠A1型星形胶质细胞活化增生，Notch1的表达显著上调。沉默内源性lncRNA Gm13568后，与LV-ctrl+EAE组比较，小鼠的神经功能评分在抗原诱导后23 d从平均3.5分下降至1分以下，临床症状缓解，A1型星形胶质细胞活化降低，同时炎性因子及趋化因子生成减少；Notch1、GFAP、NICD的蛋白质表达水平和STAT3的磷酸化水平显著降低；小鼠脊髓组织炎性细胞浸润与髓鞘脱失显著减轻。结论:LncRNA Gm13568可能通过调控Notch1/STAT3信号调控A1型星形胶质细胞的活化，从而调节炎性因子及趋化因子的产生，参与EAE的病变进程。

目的:初步研究幽门螺杆菌( Helicobacter pylori ，HP)鞭毛蛋白FliD的部分免疫学特征。 方法:原核表达重组FliD蛋白；制备rFliD兔多克隆抗体，同时酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)检测rFliD特异性免疫球蛋白G(immunoglobulin G, IgG)与免疫球蛋白M(immunoglobulin M, IgM)水平；酶联免疫斑点试验(enzyme-linked immunospot, ELISPOT)检测rFliD刺激Hp患者外周血单核细胞(peripheral blood monocytes, PBMC)后的γ干扰素(interferon-γ，IFN-γ)及白细胞介素4(interleukin4, IL-4)表达水平；流式细胞术(flow cytometry, FCM)检测rFliD蛋白刺激胃粘膜上皮细胞(Gastric epithelial cells, GES-1)细胞后的凋亡比例。结果:rFliD原核表达纯化成功；成功制备高效价rFliD兔多克隆抗体，并发现rFliD可诱导家兔产生高水平IgG与IgM，与免疫前血清比差异具有统计学意义( t值分别为5.42、8.18， P值均<0.05))，效价可达1：102 400；与健康对照组(healthy control, HC)相比，HP组rFliD特异性IFN-γ与IL-4均显著增高( t值分别为21.91, 13.57， P值均<0.05)，但产生IFN-γ的水平显著高于IL-4( t＝7.55， P< 0.05)；与磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline, PBS)对照组相比，rFliD刺激GES-1细胞后24或72 h均可发生显著性凋亡且差异具有统计学意义( t值分别为10.12、10.90， P值均<0.05)。 结论:幽门螺杆菌鞭毛FliD蛋白具有强免疫原性，可诱导产生较强的体液及细胞免疫应答，且细胞免疫应答以IFN-γ高表达的Th2型为主；同时发现其对GES-1细胞存在一定程度的凋亡效应。

目的:探讨重组人干扰素α1b联合布地奈德雾化治疗对呼吸道合胞病毒(RSV)感染大鼠肺泡灌洗液及肺组织黏蛋白1的影响。方法:本研究为实验研究。采用随机数字表法将24只Wistar大鼠随机分为4组：阴性对照组、RSV感染组、布地奈德组和联合用药组。4组大鼠均予7%水合氯醛麻醉；阴性对照组予等量生理盐水(0.1 ml/只)滴鼻，其余各组大鼠以RSV Long株病毒(0.1 ml/只)滴鼻染毒，构建病毒感染模型；阴性对照组、RSV感染组大鼠分别给予生理盐水雾化，布地奈德组大鼠单纯给予布地奈德(0.5 mg/次)雾化，联合用药组给予重组人干扰素α1b和布地奈德联合雾化治疗，给药治疗共计6 d；取大鼠肺组织及肺泡灌洗液，观察肺组织病理，免疫组织化学检测黏蛋白1表达水平，对检测结果进行统计学分析。结果:各组大鼠肺泡灌洗液中均有黏蛋白1表达，阴性对照组为(3.52±0.09)μg/L，RVS感染组为(4.05±0.05)μg/L，布地奈德组为(3.90±0.07)μg/L，联合用药组为(3.76±0.07)μg/L，各组间比较差异均有统计学意义( P值均<0.001)。肺组织病理切片结果显示：RSV感染组肺泡间隔明显增宽，部分肺泡塌陷，有明显炎症反应(有较多淋巴细胞、少量中性粒细胞和嗜酸粒细胞，支气管腔内分泌物增多)；布地奈德组肺部炎症略有减轻，可见小灶性肺泡壁增厚和淋巴细胞浸润，联合用药组则炎症明显减轻，仅有少量细胞浸润，支气管腔内分泌物减少。免疫组织化学结果显示：阴性对照组大鼠肺组织黏蛋白1存在表达；RSV感染组黏蛋白1表达水平最高；布地奈德组黏蛋白1表达水平低于RSV感染组；联合用药组黏蛋白1表达水平低于RSV感染组和布地奈德组。 结论:重组人干扰素α1b联合布地奈德雾化治疗可有效降低RSV感染大鼠肺泡灌洗液及肺组织黏蛋白1的含量，从而降低病毒感染引起的炎症反应，控制病毒感染。

目的:构建表达结核分枝杆菌( Mycobacterium tuberculosis， Mtb)潜伏期表达抗原Rv3133c，通过人群以及小鼠实验评价其免疫原性。 方法:构建重组质粒pPROEX-Rv3133c，诱导表达并纯化蛋白质，经Western blot鉴定后，用全血干扰素释放试验评价重组蛋白rRv3133c在 Mtb感染人群中的免疫原性；联合佐剂DC免疫小鼠，检测小鼠血清中rRv3133c特异性抗体分泌水平、脾细胞中抗原特异性Th1型细胞因子分泌水平以及脾细胞中多功能T细胞免疫应答水平和肺脏组织细胞因子mRNA表达水平。 结果:成功构建表达rRv3133c。rRv3133c可刺激 Mtb感染者尤其是潜伏感染者产生高水平的IFN-γ。免疫小鼠后，rRv3133c+DC组小鼠脾脏IFN-γ、TNF-α、IL-2水平，以及IFN-γ +TNF-α +CD4 +T细胞数量和肺脏组织中抗原特异性IFN-γ、TNF-α、iNOS的mRNA表达水平均高于BCG组，但低于BCG+rRv3133c+DC组；rRv3133c+DC组和BCG+rRv3133c+DC组小鼠血清中IgG2a/IgG1比值均大于1，显著高于BCG组。 结论:rRv3133c具有良好的免疫原性，可以诱发机体产生较强的Th1型免疫应答，是结核病亚单位疫苗的潜在候选靶抗原。

目的:探讨抗程序性死亡受体-1(PD-1)抗体联合细胞因子诱导的杀伤(CIK)细胞抗肿瘤作用的可能机制，及此过程中CXC趋化因子受体3(CXCR3)-CXC趋化因子配体9/10/11(CXCL9/10/11)信号轴的作用。方法:取肾细胞癌(RCC)患者外周血10 ml，密度梯度离心获取外周血单个核细胞(PBMC)，利用重组纤维连接蛋白(5 μg/ml)、抗CD3抗体(5 μg/ml)、干扰素-γ(IFN-γ，1 000 U/ml)及白细胞介素-2(500 U/ml)制备CIK细胞。流式细胞技术检测CIK细胞表型，CIK细胞及PBMC中T淋巴细胞CXCR3的表达。利用消化酶混合液消化肾癌组织制备RCC单细胞悬液，分为两组，一组加入抗PD-1抗体(抗PD-1组)，另一组加入非特异性IgG设为对照组。实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测CXCL9/10/11及IFN-γ mRNA表达水平，Transwell实验检测CIK细胞迁移能力。两组间比较采用 t检验，相关分析采用线性回归。 结果:CIK细胞中CD3 +CD4 +T淋巴细胞、CD3 +CD8 +T淋巴细胞占比分别为(32.93±11.77)%、(59.67±11.60)%，表达CXCR3的CD3 +T细胞百分比(28.05±4.15)%显著高于PBMC (6.69±5.29)%， t＝6.354， P<0.01。抗PD-1组CXCL9/10/11及IFN-γ的mRNA相对表达水平(1.29±0.41，1.87±0.72，1.58±0.68，1.24±0.39)均显著高于对照组( t＝2.655，4.511，3.175，2.315， P<0.05)，且趋化因子CXCL10/11与IFN-γ的mRNA相对表达水平呈正相关( F＝6.672，9.227， P<0.05)。抗PD-1组CIK细胞的迁移率[(16.64±6.47)%]显著高于对照组[(14.21±6.26)%， t＝4.075， P<0.01]。 结论:RCC中，抗PD-I抗体可能通过CXCR3-CXCL9/10/11信号轴促进CIK细胞的趋化迁移，进而发挥协同抗肿瘤作用。

目的:探讨重组人干扰素α-2b雾化吸入联合高压氧综合治疗在手足口病患者感染防控护理中的应用。方法:选择2016年6月至2018年1月入院治疗的手足口病患者140例，根据护理方案不同分为对照组和观察组，各70例。两组均予以常规方法对症支持治疗，均采用重组人干扰素α-2b雾化吸入联合高压氧综合治疗，对照组采用常规方法护理干预，观察组采用对症护理干预，两组均进行1个月护理。记录并统计两组护理后退热、疱疹结痂、疱疹消退、初次进食及住院时间；采用双抗体夹心法测定两组护理前后C-反应蛋白(CRP)水平；采用酶联免疫吸附试验测定两组护理前后1个月白细胞介素-6(IL-6)、干扰素-γ(TNF-γ)及白细胞介素-1β(IL-1β)水平；记录并统计两组护理后感染、骨髓抑制、白细胞减少、胃绞痛及嗜酸粒细胞增多发生率，比较两组护理效果及对感染率的影响。结果:观察组护理后1个月退热、疱疹结痂、疱疹消退、初次进食及住院时间均短于对照组；观察组与对照组护理后1个月CRP、IL-6、TNF-r和IL-1β水平均低于护理前；观察组治疗、护理后1个月CRP、IL-6、TNF-r和IL-1β水平均低于对照组；观察组护理后1个月感染、骨髓抑制、白细胞减少、胃绞痛及嗜酸粒细胞增多发生率均低于对照组，差异均有统计学意义( P<0.05)。 结论:将重组人干扰素α-2b雾化吸入联合高压氧综合治疗用于手足口病患者中有助于缩短症状改善时间，降低炎性因子水平，治疗过程中加强患者对症护理干预有助于降低感染率，值得推广应用。