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基于UPLC-Q-Orbitrap HRMS代谢组学和16S rRNA基因测序探讨骨疏丹补肾机制
编辑人员丨3周前
目的 整合代谢组学和肠道微生物组学的研究策略探讨骨疏丹(Gushudan,GSD)预防氢化可的松诱导的肾阳虚证(kidney-yang deficiency syndrome,KYDS)大鼠的补肾作用机制.方法 分别采用超高效液相色谱-四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Orbitrap HRMS)的非靶向代谢组学和16S rRNA基因测序分析的肠道微生物组学方法,分析正常对照组、肾阳虚证模型组、骨疏丹给药组和阳性对照组大鼠粪便代谢物谱与肠道菌群组成,采用Pearson相关分析探讨内源性差异代谢物与差异菌群之间的相关性.结果 基于UPLC-Q-Orbitrap HRMS的代谢组学方法在正负离子模式下共发现骨疏丹参与调控肾阳虚症的 22 种差异代谢物,如色氨酸、鹅去氧胆酸、肌酐和油酸酰胺等,主要涉及氨基酸代谢、胆汁酸代谢、能量代谢和脂质代谢.基于 16S rRNA 测序分析发现骨疏丹在属水平显著上调普雷沃氏菌(Prevotellaceae)的相对丰度(P<0.05),显著下调颤杆菌(Oscillibacter)的相对丰度(P<0.05).相关性分析结果表明甘胆酸和鹅去氧胆酸与在属水平显著改变的普雷沃氏菌(Prevotellaceae)显著正相关(P<0.05),而与考拉杆菌(Phascolarctobacte-rium)显著负相关(P<0.05).二十二碳六烯酸与毛螺菌(Lachnospiraceae)显著负相关(P<0.05).结论 骨疏丹通过良性调节内源性代谢和肠道菌群结构发挥补肾作用,为中药通过肠-肾轴治疗疾病提供新的思路和方法.
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编辑人员丨3周前
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一测多评法测定骨疏丹中12种有效成分的含量
编辑人员丨2023/8/5
目的 采用一测多评法同时测定骨疏丹中12种有效成分(淫羊藿苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿次苷Ⅱ、蛇床子素、欧前胡素、佛手内酯、新北美圣草苷、柚皮苷、丹酚酸B、丹参酮ⅡA).方法 色谱柱为Cosmosil 5C1s-MS-Ⅱ柱(250 mm ×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-体积分数0.1％甲酸水系统,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min-1,检测波长为272 nm和285 nm.结果 方法学结果表明各待测成分线性关系良好(r≥0.999 0),各待测成分的回收率在95.6％～106.8％之间(RSD＜3.9％).以淫羊藿苷为内参比物质,各待测成分校正因子的重现性良好(RSD＜5％).斜率校正因子法、多点平均校正因子法和标准曲线法计算的结果间没有显著性差异(RSD＜3.7％,P＞0.1).结论 建立的一测多评法简便、快速、准确,可用于骨疏丹的质量评价研究.
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编辑人员丨2023/8/5
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基于GC-MS的骨疏丹预防糖皮质激素性骨质疏松代谢组学研究
编辑人员丨2023/8/5
目的 建立基于GC-MS的代谢组学方法,考察糖皮质激素性骨质疏松(glucocorticoid-induced osteoporosis,GIOP)大鼠尿液内源性代谢物的变化,寻找与骨质疏松相关的潜在生物标志物,探讨骨疏丹(Gushudan,GSD)干预GIOP大鼠尿液代谢物的变化及其预防骨质疏松的作用机制.方法 建立正常对照组、GIOP模型组和GSD给药组大鼠尿液的GC-MS代谢指纹图谱,利用偏最小二乘-判别分析(PLS-DA)研究给药前后大鼠尿液中内源性代谢物变化,寻找潜在生物标志物,探讨GSD的作用机制.结果 经PLS-DA模式识别分析,对照组、模型组和GSD给药组能够得到很好的区分,共发现了牛磺酸、丙二酸等11种潜在生物标志物,苹果酸、L-苏糖酸等是新发现的与骨质疏松症相关的潜在生物标志物.这些潜在生物标志物主要与氨基酸代谢、能量代谢、脂肪酸代谢和体内的氧化应激状态相关,GSD给药后骨质疏松模型大鼠的内源性代谢物水平发生不同程度的回调.结论 基于GC-MS的代谢组学方法可以很好的从内源性代谢物的变化过程反应GIOP的发生情况,同时也表明代谢组学在中药整体药效评价、作用机制研究等方面具有很好的应用前景.
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编辑人员丨2023/8/5
