目的:建立采用1H定量核磁共振波谱法(1H qNMR)测定帕瑞昔布钠对照品质量分数的方法.方法:在1H qNMR中,使用Bruker Ascend 600超导核磁共振谱仪,以氘代二甲基亚砜为溶剂,采用zg30脉冲序列,弛豫延迟时间为30s,扫描次数为64次.结果:以帕瑞昔布钠δ7.74的氢质子响应信号作为样品定量信号,以马来酸86.23的氢质子响应信号作为内标物定量信号.样品内标物信号响应面积比与质量比的线性回归方程为y=0.296 2x-0.001 0,相关系数为0.999 7,重复性实验的RSD为0.15％(n=6).测得帕瑞昔布钠(以C19H17N2O4S-计)的质量分数为93.91％,与质量平衡法(93.83％,按C19H17N2O4S-计)、HPLC外标一点法(93.89％)结果一致.结论:本文建立的核磁定量方法可用于帕瑞昔布钠的质量分数测定,该方法准确、快速,并为质量平衡法对标准物质定值提供有力佐证.

目的:建立1H核磁共振波谱绝对定量法和相对定量法测定氘代新药甲苯磺酸多纳非尼中非氘代杂质的含量.方法:采用氘代二甲基亚砜-重水(10∶1)混合溶剂,以90°脉冲,弛豫延迟时间15 s,扫描次数64次,测试温度25 ℃为采样条件.加入马来酸作为内标物,以马来酸化学位移δ6.29的内标峰和非氘代杂质δ2.79的特征定量峰计算非氘代杂质的绝对含量;不加入任何内标物,以δ8.63的芳香1H峰和82.79的非氘代杂质特征1H峰为定量峰,计算非氘代杂质对甲苯磺酸多纳非尼的相对含量.并将2种定量方法测定结果与液质联用法进行比较.结果:2种测定方法的定量限、线性、精密度、准确度及稳定性经验证均符合要求.对3批商业化样品进行测定,2种定量方法测定结果分别为0.14％、0.14％、0.14％和0.14％、0.13％、0.14％,与液质联用法测定结果基本一致.结论:建立的1 H核磁共振波谱绝对定量法和相对定量法准确、灵敏,可用于测定甲苯磺酸多纳非尼中非氘代杂质的含量,且具有操作简单、分析时间短、无需杂质对照品的优势,也为其他氘代药物中非氘代杂质的测定提供了借鉴.

目的:建立采用1H定量核磁共振(qNMR)波谱法测定那红地那非对照品的含量.方法:在1 H qNMR中,使用Bruker Ascend 600超导核磁共振谱仪,以氘代氯仿为溶剂,采用noesyigld1 d脉冲序列,弛豫延迟时间为30 s,扫描次数32次.结果:以那红地那非δ8.15和δ9.14的氢质子响应信号作为样品定量信号,以1,3,5-三甲氧基苯δ6.09的氢质子响应信号作为内标物定量信号.样品δ8.15与内标物δ6.09信号响应面积比与质量比的线性回归方程为y=0.1197 x+0.0034,相关系数为0.9991,重现性实验的RSD为1.66％(n=5),重复性实验的RSD为0.76％,测得那红地那非的含量为97.48％;样品 δ9.14与内标物δ6.09信号响应面积比与质量比的线性回归方程为:y=0.1168 x+0.0045,相关系数为0.9991,重现性实验的RSD为1.69％,重复性实验的RSD为0.43％,测得那红地那非的含量为95.35％.1 H qNMR法测得那红地那非的含量(两组响应信号测得的含量平均值)为96.42％,与质量平衡法结果(96.54％)以及HPLC外标一点法结果(97.07％)一致.结论:本研究建立的核磁定量方法可用于那红地那非的含量测定,该方法准确、快速,并为质量平衡法对标准物质定值提供有力的佐证.

目的 建立灯心草抗焦虑有效部位菲类成分的定量核磁共振波谱含量测定方法,同时采用高效液相色谱加以验证.方法 以对苯二甲酸作为内标,探头温度298.2 K,脉冲序列zg 30,扫描次数NS=16,脉冲延迟时间dl=ls.定量特征信号选择为去氢厄弗酚C4-H峰(δ8.35),灯心草酚C4-H峰(δ7.31)和厄弗酚C4-H峰(δ7.07).结果 厄弗酚,核磁共振与高效液相色谱法结果分别为338.75和340.87 mg·g-1;去氢厄弗酚为41.14和42.99 mg·g-1;灯心草酚结果为109.13和107.73 mg·g-1,而对于去氢灯心草酚,HPLC结果为9.561 mg·g-1.结论 两种方法结果基本一致,表明QNMR可用于灯心草抗焦虑有效部位菲类成分的含量测定.QNMR操作简单、快速、专属性强、不需高纯对照品、只需价格低廉的内标物即可同时定量多个化学成分.

目的 采用多种技术手段对黄芪多糖对照品进行标化,以应用于注射用黄芪多糖的质量控制.方法 采用紫外分光光度(UV)法对总糖量进行定量分析,采用HPLC法于250 nm波长处检测1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生化后单糖组成及其量,采用高效凝胶渗透色谱法测定多糖相对分子质量(Mw)及其分布,用薄层色谱法检查其中游离单糖,并采用气相色谱串联质谱法和核磁共振波谱(1H-NMR)对糖苷键连接位置及构型进行判断.采用多个试验参数对首批黄芪多糖对照品的质量进行控制.结果 此批黄芪多糖对照品由鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖组成,其中葡萄糖为主要成分,且本品中未检测出游离单糖;Mw测定结果显示本品依次出现4个色谱峰,其中主峰(3号峰)Mw为12 531,峰面积比例为83％;总糖量以葡萄糖计为94％;气质联用法测得糖苷键类型主要有8种,其中以1,4-葡萄糖连接为主;核磁确认异头氢为α构型.结论 建立了黄芪多糖对照品标化的方法,其定性鉴别及总糖定量测定结果准确、可靠,可进一步对其在黄芪多糖产品中的质量控制技术进行研究.

目的:建立采用1H定量核磁共振波谱法测定二对甲苯磺酸缘生替尼对照品的含量.方法:采用核磁共振波谱法.使用Bruker AscendTM 400超导核磁共振谱仪,以氘代DMSO为溶剂,脉冲宽度为10.0μs,延迟时间为1s和扫描次数32的条件下采集试样氢谱.结果:以化学位移δ分别为5.31和6.28的二对甲苯磺酸缘生替尼和顺丁烯二酸的氢质子峰作为定量峰,其峰面积比与其质量比的线性回归方程为Y=0.128 1X-0.000 4,相关系数为0.999 9,含量测定的重复性试验的RSD为0.20％(n=6).测得二对甲苯磺酸缘生替尼的含量为98.54％.结论:分析结果表明,在没有对照品的情况下,核磁共振波谱法可用于二对甲苯磺酸缘生替尼的含量测定,该方法可行,具有快速、准确、简便的优点.

目的:拉洛他赛是国内外均未上市的新结构药物,未见质量研究相关报道.对拉洛他赛进行波谱解析以验证其分子式、相对分子质量和化学结构式,同时建立一种定量方法用于拉洛他赛脂质体制剂的含量测定.方法:利用质谱、红外吸收光谱、核磁共振波谱测定方法,对拉洛他赛进行药物结构和光谱学解析;利用紫外-可见分光光度法对拉洛他赛进行全波长扫描,确定其吸收波长;利用高效液相色谱法,建立拉洛他赛定量方法并用于脂质体拉洛他赛包封率的测定.结果:揭示了拉洛他赛的四大光谱学特征并制订相应的标准图谱.确认了拉洛他赛的结构为三环二萜,分子式为C45 H53 NO,4,相对分子质量为831.900 1.建立了拉洛他赛的高效液相色谱定量方法,其色谱柱为C18硅胶反相色谱柱(5μm,250 mm ×4.6 mm),流动相为乙腈-水(体积比75:25),检测波长为230 nm,该方法可用于测定脂质体制剂中拉洛他赛的包封率,稳定性、回收率和精密度高.此外,新制备了拉洛他赛脂质体,该脂质体粒径大约105 nm,均一性良好,药物包封率大于80％.结论:制订了拉洛他赛的质谱、红外吸收光谱、核磁共振波谱和紫外-可见光谱图谱,验证了拉洛他赛的分子式、相对分子质量和结构式,建立了拉洛他赛的高效液相色谱定量方法,该方法可用于拉洛他赛脂质体的质量控制.

目的 建立复方对乙酰氨基酚片中阿司匹林、咖啡因和对乙酰氨基酚测定的氢核磁共振波谱方法.方法 采用氘代甲醇为溶剂,马来酸为内标.采用zg30脉冲序列获取1H-NMR谱图.测试温度:300 K;谱宽:8012 Hz;采集时间:4.01 s:弛豫时间:20 s,样品扫描次数:64次;空扫次数:2次.并采用HPLC法测定进行比较.结果 阿司匹林、对乙酰氨基酚和咖啡因平均回收率分别为101.29％、101.68％、99.13％,RSD值分别为1.15％、1.73％、1.92％.qNMR法测定结果与HPLC法测定结果基本一致.结论 氢核磁共振波谱法操作简便、快速,能准确测定复方对乙酰氨基酚片中阿司匹林、咖啡因和对乙酰氨基酚.

建立了固相萃取(SPE)-定量核磁共振波谱(qNMR)测定双黄连胶囊中绿原酸含量的方法.绿原酸是双黄连胶囊处方中金银花提取物的有效成分.样品用纯水在室温条件下超声提取,以HC-C18型SPE柱对提取液进行富集净化后,用qNMR测定绿原酸的含量.考察了超声时间、SPE样品前处理条件以及定量核磁共振实验条件对结果的影响.选择氘代二甲基亚砜为溶剂,标定后的对苯二甲醛作为内标.选择脉冲宽度P1=14.1 μs,延迟时间d1=1s,扫描次数NS=512为qNMR定量绿原酸的实验条件.绿原酸的定量峰为δ 6.138-6.182 (H-8',d,1H).结果 显示,所建方法的日内精密度的RSD为1.2％,日间精密度RSD为1.5％,绿原酸与对苯二甲醛峰面积比与质量比的零截距标准曲线线性相关系数为0.9999,且斜率与理论值相符.该法测定绿原酸的LOD为0.0017 mg/g;LOQ为0.079 mg/g.包括样品经SPE预处理过程的绿原酸的回收率为100.2％～103.2％.实际测定双黄连胶囊中的绿原酸的含量为9.68～10.35 mg/g.

目的:建立一种测定6B,10A,17F,19A,19F及20型肺炎链球菌荚膜多糖含量的定量核磁共振氢谱(1H-NMR)法.方法:以二甲基砜为内标物,采用Bruker Avance-600型核磁共振波谱仪,设置检测条件,建立定量1 H-NMR法用于供试品溶液的测定.结果:获得各型多糖的1H-NMR谱图,确定用于定量的特征峰.通过比较各型多糖特征峰的峰面积与内标物特征峰的峰面积,计算得到6B,10A,17F,19A,19F及20型肺炎链球菌荚膜多糖含量依次为92.57％,88.56％,84.95％,82.92％,83.98％和85.80％,计算各组数据的相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)值依次为0.29％,0.47％,0.48％,0.13％,0.38％和0.22％.结论:本研究建立的测定肺炎链球菌荚膜多糖含量的定量1H-NMR法,从样品制备到采样参数设置以及数据处理,操作简单,可行性高,重复性好,更能够满足检定工作的需求,可作为肺炎球菌荚膜多糖质量控制的一种合理、有效的技术手段.