目的:探讨Zeste同源物增强子2(EZH2)和Dickkopf相关蛋白1(DKK1)在重型颅脑损伤患者血清中变化及临床意义。方法:选取2021年6月至2022年10月在遂宁市中心manbet官网登录 接受治疗的160例重型颅脑损伤患者为观察组及165例健康体检志愿者为对照组。以格拉斯哥昏迷评分(GCS)分重型组75例，特重型组85例。酶联免疫吸附法检测患者重型颅脑损伤后第1、3、7天血清EZH2、DKK1水平(对照组为入组第1天)。两组间比较行 t检验；Logistic回归分析影响患者预后的因素；受试者工作特征曲线分析血清中EZH2、DKK1水平对患者预后的预测价值。 结果:观察组患者血清EZH2水平低于对照组[(11.28±3.45) μg/L比(25.23±5.87) μg/L， t＝26.017， P<0.05]，DKK1水平高于对照组[(610.80±126.32) μg/L比(178.94±54.76) μg/L， t＝40.194， P<0.05]；特重型组患者血清EZH2水平低于重型组[(8.54±2.72) μg/L比(14.38±4.28) μg/L， t＝10.421， P<0.05]，DKK1水平高于重型组[(821.06±159.02) μg/L比(385.84±89.26) μg/L， t＝20.962， P<0.05]。第3天重型组与特重型组患者血清EZH2水平均高于第1、7天[(19.45±5.79) μg/L比(14.38±4.28)、(15.25±4.47) μg/L， t＝6.098、4.973， P<0.05；(14.01±4.04) μg/L比(8.54±2.72)、(9.98±3.19) μg/L， t＝10.355、7.218， P<0.05]，第3天重型组与特重型组患者DKK1水平均低于第1、7天[(271.81±72.21) μg/L比(385.84±89.26)、(345.54±84.21) μg/L， t＝8.601、5.756， P<0.05；(576.45±101.50) μg/L比(821.06±159.02)、(757.21±141.49) μg/L， t＝11.954、9.571， P<0.05]；良好组患者血清EZH2水平明显降低于预后不良组[(7.27±2.35) μg/L比(13.27±3.95) μg/L， t＝9.959， P<0.05]，DKK1水平高于预后不良组[(798.02±198.81) μg/L比(525.70±93.37) μg/L， t＝11.812， P<0.05]。第3天预后良好组与预后不良组患者血清EZH2水平均高于第1、7天[(18.46±5.56) μg/L比(13.27±3.95)、(14.36±4.36) μg/L， t＝7.981、6.086， P<0.05；(12.38±3.32) μg/L比(7.27±2.35)、(8.25±2.54) μg/L， t＝8.883、6.986， P<0.05]，第3天预后良好组与预后不良组患者DKK1水平均低于第1、7天[(381.19±82.17) μg/L比(525.70±93.37)、(485.24±85.74) μg/L， t＝17.377，12.512， P<0.05；(549.06±100.09) μg/L比(798.02±198.81)、(738.04±178.22) μg/L， t＝10.693，8.117， P<0.05]；GCS评分高[比值比( OR)＝0.872， P<0.05]、高水平EZH2( OR＝0.515， P<0.05)是影响患者预后的保护因素，高水平DKK1( OR＝1.013， P<0.05)是影响患者预后的危险因素；EZH2、DKK1联合预测患者预后的曲线下面积为0.965[95%可信区间( CI)：0.939~0.991]，均优于其各自单独预测( Z两者联合－EZH2＝1.930， P<0.05； Z两者联合－DKK1＝2.663， P<0.05)。 结论:重型颅脑损伤患者血清EZH2水平随时间先升高再降低，DKK1水平先降低再升高，均与患者病情严重程度及预后明显相关。

目的:观察吉西他滨和奥沙利铂联合靶向药物阿帕替尼治疗胆囊癌的效果。方法:对2017年5月至2018年12月山东省海阳市人民manbet官网登录 、烟台市烟台山manbet官网登录 和烟台市海阳荣军manbet官网登录 收治的82例胆囊癌患者病例资料进行回顾性分析，依据用药情况分为对照组与观察组，各41例。对照组患者采用吉西他滨联合奥沙利铂方案治疗（吉西他滨1 000 mg/m 2，30 min静脉滴注，第1、8天；奥沙利铂100 mg/m 2，3 h静脉滴注，第1天），观察组在对照组的治疗方法基础上，联合甲磺酸阿帕替尼500 mg/d。比较两组患者治疗效果、血清肿瘤标志物水平、不良反应及生存情况。 结果:对照组患者的疾病控制率为70.73%（29/41），低于观察组的92.68%（38/41）（ χ2=6.609， P<0.05）。治疗后观察组血管内皮生长因子（VEGF）、癌胚抗原（CEA）、可溶性白细胞介素2受体（sIL-2R）及Dickkopf-1水平均低于观察组，差异均有统计学意义（ t值分别为6.011、3.048、4.444、4.514，均 P<0.05）。观察组患者蛋白尿、手足综合征发生率均低于对照组，差异均有统计学意义（ χ2值分别为6.116、4.986，均 P<0.05）。随访1年，观察组2例死亡，生存率为95.13%（39/41），对照组8例死亡，生存率为80.49%（33/41），两组患者随访后生存率差异有统计学意义（ χ2=4.100， P<0.05）。 结论:吉西他滨和奥沙利铂联合阿帕替尼治疗胆囊癌效果较好，可有效降低患者血清肿瘤标志物水平，改善患者的预后。

Background::Fibroblast-like synoviocytes (FLSs), resident mesenchymal cells of synovial joints, play an important role in the pathogenesis of rheumatoid arthritis (RA). Dickkopf-1 (DKK-1) has been proposed to be a master regulator of bone remodeling in inflammatory arthritis. Here, potential impairation on the activity of FLSs derived from RA to small interfering RNAs (siRNAs) targeting DKK-1 was investigated.Methods::siRNAs targeting DKK-1 were transfected into FLSs of patients with RA. Interleukin (IL)-1β, IL-6, IL-8, matrix metalloproteinase (MMP) 2, MMP3, MMP9, transforming growth factor (TGF)-β1, TGF-β2 and monocyte chemoattractant protein (MCP)-1 levels in the cell culture supernatant were detected by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Invasion assay and 3H incorporation assay were utilized to investigate the effects of siRNAs targeting DKK-1 on FLSs invasion and cell proliferation, respectively. Western blotting was performed to analyze the expression of nuclear factor (NF)-κB, interleukin-1 receptor-associated kinase (IRAK)1, extracellular regulated protein kinases (ERK)1, Jun N-terminal kinase (JNK) and β-catenin in FLSs. Results::DKK-1 targeting siRNAs inhibited the expression of DKK-1 in FLSs ( P < 0.01). siRNAs induced a significant reduction of the levels of IL-6, IL-8, MMP2, MMP3 and MMP9 in FLSs compared to the control group ( P < 0.05). DKK-1 targeting siRNAs inhibited the proliferation and invasion of FLSs ( P < 0.05). Important molecules of pro-inflammatory signaling in FLSs, including IRAK1 and ERK1, were decreased by the inhibition of DKK-1 in FLSs. In contrast, β-catenin, a pivotal downstream molecule of the Wnt signaling pathway was increased. Conclusions::By inhibiting DKK-1, we were able to inhibit the proliferation, invasion and pro-inflammatory cytokine secretion of FLSs derived from RA, which was mediated by the ERK or the IRAK-1 signaling pathway. These data indicate the application of DKK-1 silencing could be a potential therapeutic approach to RA.

目的:探讨Dickkopf相关蛋白1 （Dickkopf 1，DKK1）基因启动子甲基化水平与2型糖尿病（type 2 diabetes，T2DM）微血管病变合并骨质疏松（osteoporosis，OP）的相关性。方法:收集2019年1月至2022年12月于临沂市中心manbet官网登录 就诊的T2DM微血管病变患者作为研究对象，根据是否合并OP症将患者分为观察组（44例）和对照组（58例）。测量研究对象的腰椎（L1~4）骨密度，检测骨代谢指标，包括血钙、血磷、25-维生素D 3[25-hydroxy vitamin D 3, 25-（OH）D 3]、甲状旁腺素（parathyroid hormone，PTH）、I型胶原C-末端肽（C-terminal telopeptide of typeI collagen, CTX）、I型前胶原N-末端肽（procollagen of aminoterminal propeptide, PINP）及抗酒石酸酸性磷酸酶（tartrate resistant acid phosphatase, TRACP）水平；测定DKK1基因启动子甲基化水平。 结果:观察组的DKK1基因启动子甲基化水平为5.17%±0.73%，显著高于对照组的3.81%±0.61%，差异有统计学意义（ t=5.22， P<0.001）。观察组的25-（OH）D 3水平、PTH和腰椎骨密度显著低于对照组，CTX和TRACP水平显著高于对照组（ t=5.58、4.35、4.12、4.05、4.17， P均<0.001）。在所有患者中，DKK1基因启动子甲基化水平与CTX、TRACP呈显著正相关关系（ r=0.41、0.39， P=0.006、0.027），与PTH、腰椎骨密度呈显著负相关关系（ r=-0.38、-0.43， P=0.015、0.003）。ROC曲线分析结果显示，DKK1基因甲基化水平区分T2DM微血管病变合并和未合并OP的曲线下面积为0.841（0.762~0.921），灵敏度和特异度分别为86.4%、72.4%。 结论:DKK1基因启动子甲基化水平与T2DM微血管病变患者发生OP及骨代谢指标有关。

Background::Psoriatic arthritis (PsA) is an inflammatory arthropathy characterized by psoriasis and bone erosion on radiology. Dickkopf-1 (Dkk-1) is considered to be the main inhibitor of the Wnt signaling pathway and results in reduced osteoblast proliferation. The aim of this study was to investigate the serum level of Dkk-1 and its association with bone erosion in PsA patients.Methods::Serum Dkk-1 levels were measured by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) in 69 patients with PsA and 60 controls, including 39 rheumatoid arthritis (RA) patients, and 21 healthy controls (HCs). Rheumatoid factor and anti-cyclic citrullinated peptide levels were also determined by ELISA. The association of Dkk-1 level with clinical and laboratory features of PsA was analyzed. Logistic regression analysis was used to analyze the risk factors for bone erosion in PsA.Results::Dkk-1 was elevated in 68.1% (47/69) of the patients with PsA, 46.2% (18/39) of RA patients, and 9.5% (2/21) of HCs. Serum Dkk-1 concentration was significantly higher in PsA patients compared with that in HCs. The level of serum Dkk-1 was correlated with a swollen joint count, and levels of complement components 3 and 4. Elevated Dkk-1 level (odds ratio = 4.440, 95% confidence interval: 1.246-15.817, P = 0.021) was identified as the risk factor for bone erosion in PsA. Conclusions::The serum level of Dkk-1 is abnormally elevated in PsA patients. The elevation of Dkk-1 might be involved in the mechanism of bone erosion in patients with PsA.

原发性肝癌包括肝细胞癌、肝内胆管癌和混合型肝细胞癌-胆管癌3种类型，其中肝细胞癌占75%~85%，严重威胁人类的生命和健康。对肝细胞癌高危人群的筛查与监测，有助于早发现、早诊断和早治疗，是提高肝癌疗效的关键。血清生物学标志物在肝细胞癌监测和诊断中具有重要作用。近年来，新型血清生物学标志物如甲胎蛋白异质体比率、异常凝血酶原/脱-γ-羧基凝血酶原、高尔基体蛋白73、Dickkopf相关蛋白1、醛酮还原酶-AKR1B10、磷脂酰肌醇蛋白聚糖3、液体活检及微小RNA等被推荐用于肝细胞癌监测研究，有些已被列入肝细胞癌指南的辅助诊断工具。本文对这些肝癌新型生物标志物的相关基础研究及临床进展进行总结，供临床参考。

目的:1型糖尿病与2型糖尿病均有骨代谢异常，但发病机制存在差异。硬骨抑素(sclerostin, SOST)、Dickkopf相关蛋白1(Dickkopf-related protein 1, DKK-1)、鸢尾素是新近发现的骨代谢调节因子。本研究拟比较1型糖尿病与2型糖尿病患者血清SOST、DKK-1、鸢尾素水平的差异。方法:本横断面研究纳入2017年至2019年于北京协和manbet官网登录 内分泌科门诊就诊的101例1型糖尿病患者、2014年至2015北京昌平社区2型糖尿病管理项目中经口服葡萄糖耐量试验筛查确诊的55例2型糖尿病患者和59名糖耐量正常受试者。使用酶联免疫吸附测定法测SOST、DKK-1及鸢尾素，并分析其组间差异。结果:本研究女性多于男性，平均年龄49岁。1型糖尿病组较2型糖尿病组病程更长( P<0.001)，HbA 1C更高( P<0.001)，两组间年龄差异无统计学意义。1型糖尿病和2型糖尿病组的血清1型原胶原N端前肽(P1NP)均低于对照组[(8 579±400)pg/mL，(7 268±552)pg/mL对(10 051±618)pg/mL, P＝0.039, P＝0.001]，而1型胶原C端肽交联β降解产物(β-CTX)与对照组相比差异无统计学意义。1型糖尿病和2型糖尿病组SOST均高于对照组[(129.7±6.8)pg/mL，(104.8±6.8)pg/mL对(85.9±5.3)pg/mL, P<0.001, P＝0.030]，1型糖尿病与对照组差异在校正血糖、血脂等因素后失去统计学意义，1型糖尿病组与2型糖尿病组组间SOST差异无统计学意义。1型糖尿病组和2型糖尿病组DKK-1与对照组差异无统计学意义，1型糖尿病组DKK-1较2型糖尿病组更低或倾向于更低。1型糖尿病组鸢尾素高于对照组及2型糖尿病组[(16.6±0.7)ng/mL对(9.6±0.6)ng/mL, (9.8±0.6)ng/mL，均 P<0.001]，2型糖尿病组鸢尾素与对照组差异无统计学意义。 结论:1型糖尿病及2型糖尿病患者成骨指标P1NP受到抑制，破骨指标β-CTX无显著改变。SOST在1型糖尿病及2型糖尿病患者中均升高或呈升高趋势，可能与其成骨抑制相关。而1型糖尿病患者还存在鸢尾素升高，也可能参与其骨转换异常的发生发展。

目的:初步探讨在培养的骨髓间充质干细胞(BMSCs)层面，晚期糖基化终末产物(AGEs)对BMSCs成骨分化中β-catenin、碱性磷酸酶(ALP)的影响，以及甲状旁腺激素(PTH)的干预及其机制。方法:取第三代BMSCs，检测AGEs对其增殖的影响。将BMSCs分为对照组、AGEs组、Wnt3a组、AGEs+Wnt3a组；对照组、AGEs组、AGEs+晚期糖基化终末产物受体(RAGE)抗体组；对照组、AGEs组、AGEs+PTH组；对照组、PTH组、PTH+Dickkopf相关蛋白1(DKK1)组，应用Western-blot法检测β-catenin、ALP蛋白的表达。结果:BMSCs的增殖可以被AGEs抑制。0.2 g/L AGEs干预BMSCs 7 d，AGEs抑制β-catenin、ALP蛋白表达有统计学差异；给予Wnt通路促进剂Wnt3a后，AGEs作用被抑制，β-catenin、ALP蛋白表达较AGEs组增加；加入10 mg/L RAGE中和抗体共培养，与AGEs组相比，β-catenin、ALP蛋白表达增高。加入PTH后可以逆转AGEs的负性成骨作用，β-catenin、ALP蛋白表达增高；加入Wnt通路阻滞剂DKK1共培养，β-catenin、ALP蛋白表达较PTH组增加。结论:AGEs-RAGE通过Wnt/β-catenin信号通路抑制大鼠BMSCs ALP蛋白表达；PTH逆转AGEs对β-catenin、ALP的负性作用。

Dickkopf-1（DKK1）是一种分泌型糖蛋白，作为Wnt/β-连环素通路的抑制剂，在胚胎发育、神经发生和突触发生等方面发挥重要作用。脑缺血后，DKK1通过促进神经元凋亡及血脑屏障损伤，抑制神经发生和血管生成，从而加重脑损伤。此外，缺血性卒中患者血清DKK1与不同病期及转归相关。因此，开发以DKK1作为靶点的特异抑制剂，有望应用于缺血性卒中的治疗。

目的:探讨Dickkopf相关蛋白3(DKK3)基因高甲基化对直肠癌增殖、迁移及侵袭的影响及其临床价值。方法:SW480、LOVO、HT29及HCT116等直肠癌细胞购自中国科学院细胞库。选择2016年1月至2016年12月直肠癌患者(直肠癌组)及直肠良性疾病患者(对照组)为研究对象。设计合成寡核苷酸序列(MON、UMON和CON)并转染至LOVO直肠癌细胞。采用甲基特异性PCR检测直肠癌患者(肿瘤组织、癌旁组织)、对照组直肠组织及直肠癌细胞系中DKK3基因甲基化状态；分析DKK3基因甲基化与临床病理因素、无进展生存期(PFS)及总生存期的关系；Transwell小室检测MON组、UMON组及CON组LOVO直肠癌细胞迁移及侵袭。两组间均数比较用独立样本 t检验；多组间均数比较用单因素方差分析(组间比较用LSD- t检验)。Kaplan-Meier生存分析并采用Log-rank比较。 结果:直肠癌组患者肿瘤组织DKK3基因甲基化率显著高于癌旁组织及对照组直肠组织(甲基化率分别72.2%、11.1%比12.0%)，差异有统计学意义( χ2＝88.756， P<0.05)。SW480、HT29及HCT116等直肠癌细胞系中DKK3基因呈甲基化状态，而在LOVO直肠癌细胞中呈未甲基化状态。低+中分化、N2淋巴结转移、肿瘤最大径≥3 cm、T3+T4及Ⅲ+Ⅳ期患者DKK3基因甲基化率显著高于高分化、N0+N1淋巴结转移、肿瘤最大径<3 cm、T1+T2及Ⅰ+Ⅱ期患者(甲基化率分别79.31%比59.38%、86.11%比62.96%、83.67%比58.54%、83.33%比59.52%、82.76%比53.13%)，差异有统计学意义( χ2＝5.922、4.673、5.833、5.198、7.610，均 P<0.05)。DKK3基因甲基化患者PFS及中位生存期显著低于DKK3基因未甲基化患者[PFS为(24.4±3.8)个月比(33.7±4.1)个月，中位生存期为(31.5±4.2)个月比(42.8±5.4)个月]，差异有统计学意义(Log-rank＝21.135、30.876， P<0.05)。MON组LOVO直肠癌细胞1~6 d细胞活力、细胞迁移数及侵袭数均显著高于UMON组及CON组LOVO直肠癌细胞[1 d的吸光度( A)值分别为0.21±0.03、0.14±0.03比0.15±0.04、2 d的 A值分别为0.31±0.04、0.21±0.04比0.23±0.05、3 d的 A值分别为0.42±0.05、0.29±0.05比0.28±0.06、4 d的 A值分别为0.57±0.05、0.33±0.06比0.35±0.05、5 d的 A值分别为0.71±0.08、0.45±0.06比0.44±0.07、6 d的 A值分别为0.89±0.09、0.53±0.08比0.54±0.09，细胞迁移数分别为(687.1±23.5)、(287.5±15.4)个比(285.9±15.1)个；细胞侵袭数分别为(419.6±34.2)、(151.7±14.9)个比(152.6±15.5)个]，差异有统计学意义( F＝11.382、13.263、14.651、16.128、19.877、21.235、44.981、37.247， P<0.05)。 结论:DKK3基因高甲基化可促进直肠癌细胞增殖、迁移及侵袭，有助于直肠癌病情及预后评估。