目的:探讨布比卡因对肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其机制。方法:分别使用浓度为100（BUP组）、300、600、1 000 μmol/L的布比卡因处理H1299细胞，未使用布比卡因处理的设为对照组。分别将miR-NC、miR-381-3p、si-NC、si-HERC4、anti-miR-NC、anti-miR-381-3p转染至H1299细胞中，其中转染anti-miR-NC和anti-miR-381-3p的细胞再使用100 μmol/L布比卡因进行处理，分别记为miR-NC组、miR-381-3p组、si-NC组、si-HERC4组、BUP+anti-miR-NC组、BUP+anti-miR-381-3p组。qRT-PCR检测miR-381-3p和HERC4 mRNA的表达水平，免疫印迹法检测细胞周期蛋白D1（CyclinD1）、基质金属蛋白酶2（MMP-2）、MMP-9、p21等蛋白表达，MTT法检测细胞增殖抑制率，Transwell实验检测细胞迁移和侵袭，双荧光素酶报告基因检测实验检测miR-381-3p对HERC4的靶向调控作用。结果:与对照组比较，随着布比卡因浓度增加，细胞增殖抑制率显著升高，细胞迁移和侵袭数量显著降低；且miR-381-3p表达水平显著升高，HERC4 mRNA和蛋白表达水平显著降低（均 P<0.05）。双荧光素酶报告基因检测实验和免疫印迹显示，miR-381-3p靶向负调控HERC4的表达。过表达miR-381-3p或抑制HERC4表达均可抑制肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭，而下调miR-381-3p表达可逆转布比卡因对肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用。 结论:布比卡因可抑制肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭，其机制可能与调控miR-381-3p/HERC4的表达有关。

目的:分析宫颈癌组织中同源形成素样蛋白2(FMNL2)、HERC4表达量与癌细胞浸润性生长的相关性.方法:选择在我院接受手术切除治疗的宫颈癌患者作为研究对象,术后收集入组患者的宫颈癌组织和癌旁组织,抽提RNA后采用PCR反应试剂盒测定FMNL2、HERC4及上皮间质转化基因、增殖基因的mRNA表达量.结果:宫颈癌组织中FMNL2、HERC4、Exosomes、Cripto-1、ZEB1、Snail、Vi-mentin、Piwil2、STOML-2、BCL-2、Smo、XIAP 的 mRNA 表达量显著高于癌旁组织(P< 0.05);高FMNL2表达量的宫颈癌组织中Exosomes、Cripto-1、ZEB1、Snail、Vimentin的mRNA 表达量显著高于低FMNL2表达量的宫颈癌组织(P<0.05);高 HERC4表达量的宫颈癌组织中Piwil2、STOML-2、BCL-2、Smo、XIAP的mRNA表达量显著高于低HERC4表达量的宫颈癌组织(P<0.05).结论:宫颈癌组织中高表达的FMNL2及HERC4分别能够促进癌细胞的上皮间质转化以及增殖,进而参与癌细胞浸润性生长的过程.

目的:研究宫颈癌病灶内SFRP2、T PX2表达量与癌细胞凋亡、EM T过程的相关性.方法:选取2015年6月～2016年12月期间在中国人民解放军第一七四manbet官网登录 接受手术切除治疗的宫颈癌患者作为研究对象,手术切除后留取宫颈癌病灶和癌旁病灶适量,抽提RNA后采用荧光定量PCR试剂盒测定病灶组织内SFRP2、TPX2、凋亡基因、EMT基因的表达量.结果:宫颈癌病灶内SFRP2、SARI、AIF、FHIT、NDRG4、MCPH1、E-cadherin的mRNA表达量显著低于癌旁病灶,TPX2、SP2、CyclinD1、Pi-wil2、HERC4、EFEMP1、EZH2、TGF-β1、N-cadherin、Vimentin1的mRNA表达量显著高于癌旁病灶;宫颈癌病灶内SFRP2的mRNA表达量与SARI、AIF、FHIT、NDRG4、MCPH1、E-cadherin的mRNA表达量呈正相关,与SP2、CyclinD1、Piwil2、HERC4、EFEMP1、EZH2、TGF-β1、N-cadherin、Vimentin1的mRNA表达量呈负相关,TPX2的mRNA表达量与SARI、AIF、FHIT、NDRG4、MCPH1、E-cadher-in的mRNA表达量呈负相关,与SP2、CyclinD1、Piwil2、HERC4、EFEMP1、EZH2、TGF-β1、N-cadher-in、Vimentin1的mRNA表达量呈正相关.结论:宫颈癌病灶内低表达的SFRP2及高表达的TPX2能够抑制癌细胞凋亡、促进癌细胞EM T过程.

目的:探讨超声剪切波弹性成像(SWE)对乳腺癌病理特征的评估价值.方法:原发性乳腺癌患者76例作为乳腺癌组,乳腺腺瘤患者89例作为乳腺腺瘤组.对比两组患者病灶SWE参数以及病灶中增殖 、凋亡 、侵袭基因表达量的差异,采用相关性分析判断乳腺癌组织Emax水平与基因表达量的相关性.结果:乳腺癌组病灶Emax水平高于乳腺腺瘤组;增殖相关基因Ghrelin、Jab1、galectin-3、TRIM11、RRS1、M TDH mRNA的表达量高于乳腺腺瘤组;凋亡相关基因SFRP2 mRNA的表达量低于乳腺腺瘤组,Smo、TPX2 mRNA的表达量高于乳腺腺瘤组;侵袭相关基因AEG-1、HERC4 mRNA的表达量高于乳腺腺瘤组,HSPC238、TET1 mRNA的表达量低于乳腺腺瘤组;相关性分析发现,乳腺癌病灶SWE参数Emax水平与癌细胞的增殖 、凋亡 、侵袭活力直接相关.结论:乳腺癌组织SWE参数水平与良性病变存在显著差异,具体水平可用于癌细胞恶性程度的判断.

目的:探讨宫颈癌组织中CD24、CD2β 分子表达量与癌细胞生长的关系及其潜在治疗价值探究.方法:宫颈癌患者40例均接受根治性手术治疗,留取癌旁组织 、宫颈癌组织标本.对比癌旁组织 、宫颈癌组织中CD24、CD2β 分子表达量的差异,进一步判断宫颈癌组织中CD24、CD2β 分子表达量与增殖 、凋亡基因表达量的相关关系.结果:宫颈癌组织中CD24的表达量高于癌旁组织,CD2β 的表达量低于癌旁组织.高CD24表达组增殖基因GBP1、eIF4E3 mRNA的表达量低于低CD24表达组,SCD-1、TLR4、HERC4 mRNA的表达量高于低CD24表达组;凋亡基因OPCML、DAPK、TSLC1 mRNA的表达量低于低CD24表达组,GRIM-19 mRNA的表达量高于低CD24表达组.高CD2β 表达组增殖基因GBP1、eIF4E3 mRNA的表达量高于低CD2β 表达组,SCD-1、TLR4、HERC4 mRNA的表达量低于低CD2β 表达组;凋亡基因OPCML、DAPK、TSLC1 mRNA的表达量高于低CD2β 表达组,GRIM-19 mR-NA的表达量低于低CD2β 表达组.结论:宫颈癌组织中CD24分子表达量异常增高 、CD2β 分子表达量异常降低,具体表达量可用于评估宫颈癌细胞的增殖 、凋亡活力,间接反映肿瘤病情并有望成为远期治疗方案制定的参考依据.

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一.随着经济发展,我国女性乳腺癌的发病率和死亡率呈持续上升趋势.最新统计数据表明乳腺癌发病率为5.9/10万,已成为女性恶性肿瘤第2位[1].研究乳腺癌的发病机制、寻找早期诊断和治疗的分子靶标具有重要意义.目前研究发现,泛素-蛋白酶体系统(ubiquitin-proteasome system,UPS)在乳腺癌的发生、发展中发挥重要作用.该系统主要由泛素,泛素活化酶E1、E2、E3,26S蛋白酶体及其底物蛋白组成.其中泛素连接酶E3通过参与底物识别和连接.在蛋白酶体降解蛋白质的底物特异性中起到决定性作用[2].HERC4是近年来发现的泛素连接酶E3,在肝癌、肺癌、宫颈癌等肿瘤组织中表达,与肿瘤的恶性程度相关.既往研究发现,下调宫颈癌细胞HERC4的表达.细胞周期蛋白cyclin D1和细胞凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达均明显下降,说明HERC4可能通过促进cyclin D1和Bcl-2的表达,促进肿瘤细胞增殖和抑制肿瘤细胞凋亡[3].本研究分析乳腺癌组织中HERC4表达,探讨HERC4与乳腺癌恶性程度的关系,以及乳腺癌病人预后的相关性.

铁元素是生命中不可缺少的元素之一,其参与合成的物质在机体中发挥着各种重要的生理功能,细胞内的铁原子由铁依赖蛋白网络严格调控.体内大部分铁原子储存于铁蛋白内,当细胞内铁含量减少时,铁蛋白就会被降解释放出游离铁,该过程称为铁自噬.铁自噬受细胞内铁含量调节,而E3泛素连接酶HERC2由于与铁蛋白之一有共同核受体辅助激活因子(NCOA)4结合位点,亦参与铁自噬的调节.研究发现,铁自噬异常与血液系统疾病、中枢神经系统疾病及恶性卵巢肿瘤等疾病的发生、发展密切相关.为针对铁自噬异常靶向治疗相关疾病提供理论指导,笔者拟就铁自噬相关研究进展进行综述.

目的 利用基因表达谱筛选与原发性干燥综合征(pSS)相关基因和潜在小分子治疗药物.方法 在GEO数据库获取并分析3个pSS相关基因表达谱,获得差异表达基因,并对差异基因进行GO与KEGG富集分析,通过蛋白互作网络(PPI)筛选pSS的hub基因并验证.最后,利用Cmap数据库预测pSS的潜在治疗药物,并结合药物靶点和药物途径探讨潜在药物在pSS治疗中的作用.结果 共鉴定出90个pSS相关差异基因,其中79个上调基因,11个下调基因,它们主要参与NOD样受体信号通路、甲型流感和细胞因子-细胞因子受体相互作用通路.此外,通过筛选、验证,鉴定出19个hub基因(STAT1、MX1、ISG15、IFIH1、GBP1、IFIT1、XAF1、RSAD2、IFIT2、SAMD9L、TRIM22、IFIT3、IFI44L、HERC5、IFIT5、IFI44、IFI6、RTP4和ISG20),多个是干扰素诱导基因.干扰素可能在pSS发病中起重要作用.最后,通过CMAP数据库筛选出氟替卡松、氯唑西林等15种候选药物,并对其作用通路与靶点分析.结论 本研究通过对pSS hub基因和候选药物的筛选,可以进一步了解pSS的发病机制,为pSS的进一步研究提供线索.

Hedgehog (Hh) signalling plays conserved roles in controlling embryonic development;its dysregulation causes many diseases including cancers.The G protein-coupled receptor Smoothened (Smo) is the key signal transducer of the Hh pathway,whose posttranslational regulation has been shown to be critical for its accumulation and activation.Ubiquitination has been reported an essential posttranslational regulation of Smo.Here,we identify a novel E3 ligase of Smo,Herc4,which binds to Smo,and regulates Hh signalling by controlling Smo ubiquitination and degradation.Interestingly,our data suggest that Herc4-mediated Smo degradation is regulated by Hh in PKA-primed phosphorylation-dependent and independent manners.

The E3 ligase HERC4 is overexpressed in human breast cancer and its expression levels correlated with the prognosis of breast cancer patients. However, the roles of HERC4 in mammary tumorigenesis remain unclear. Here we demonstrate that the knockdown of HERC4 in human breast cancer cells dramatically suppressed their proliferation, survival, migration, and tumor growth in vivo, while the overexpression of HERC4 promoted their aggressive tumorigenic activities. HERC4 is a new E3 ligase for the tumor suppressor LATS1 and destabi-lizes LATS1 by promoting the ubiquitination of LATS1. miRNA-136-5p and miRNA-1285-5p, expression of which is decreased in human breast cancers and is inversely correlated with the prognosis of breast cancer patients, are directly involved in suppressing the expression of HERC4. In summary, we discover a miRNA-HERC4-LATS1 pathway that plays important roles in the patho-genesis of breast cancer and represents new therapeu-tic targets for human breast cancer.