目的:探讨miR-497通过靶向调节Yes相关蛋白1（Yes-associated protein 1，YAP1）表达对甲状腺乳头状癌（papillary thyroid carcinoma，PTC）细胞生物学行为的影响。方法:将人PTC细胞株TPC-1细胞分为对照组、miR-497组、si-YAP1组和miR-497+si-YAP1组，采用LipofectamineTM3000脂质体转染，荧光素酶报告实验验证miR-497和YAP1靶向关系。MTT法检测各组细胞增殖活性，流式细胞仪分析细胞凋亡率，Transwell检测侵袭细胞数，划痕实验检测细胞迁移率。Western blot检测细胞周期素D1（CyclinD1）、基质金属蛋白酶2（MMP-2）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）、基质金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）和活化的半胱天冬酶3（cleaved Caspase-3）表达。采用SPSS 22.0分析数据，正态分布计量资料以均数±标准差（ ± s）表示，多组间比较采用单因素方差分析，两两组间比较采用SNK-q。 结果:与对照组比，miR-497组和si-YAP1组细胞YAP1 mRNA和蛋白表达下降（ q=14.682、14.597，23.743、23.571； P<0.05），细胞增殖活性、侵袭细胞数和迁移率下降（ q=4.724、4.568、3.841，4.216、3.952、3.274； P<0.05），凋亡率升高（ q=3.783、4.336， P<0.05），CyclinD1、MMP-2、MMP-9和cleaved Caspase-3蛋白表达下降（ q=5.823、5.981、6.036、6.485，5.934、6.110、6.573、6.614； P<0.05），TIMP-1蛋白表达升高（ q=6.071、6.148， P<0.05）；与si-YAP1组相比，miR-497+si-YAP1组细胞miR-497水平升高（ q=14.726， P<0.05），YAP1 mRNA和蛋白表达下降（ q=3.089、3.126， P<0.05），细胞增殖活性、侵袭细胞数和迁移率下降（ q=2.654、2.537、2.246， P<0.05），凋亡率升高（ q=2.875， P<0.05），CyclinD1、MMP-2、MMP-9和cleaved Caspase-3蛋白表达下降（ q=4.371、4.365、4.383、4.368， P<0.05），TIMP-1蛋白表达升高（ q=4.275， P<0.05）。 结论:miR-497可靶向负调控YAP1表达，抑制TPC-1细胞增殖、侵袭和迁移。

目的:探讨结直肠癌(CRC)患者血清microRNA-497(miR-497)表达量与CRC侵袭转移及预后的关系。方法:实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测93例CRC患者术前及术后、30例结直肠腺瘤息肉患者及30位健康者血清miR-497表达量，同时化学发光法检测血清癌胚抗原(CEA)含量；随访CRC患者术后3年预后，复测血清miR-497表达量；分析术前血清miR-497表达量与CRC临床病理特征及预后的关系。结果:CRC组术前血清miR-497表达量显著低于其术后治疗结束时、腺瘤息肉组和正常对照组( P<0.01)，CEA含量显著高于术后治疗结束时、结直肠腺瘤息肉组和正常对照组( P<0.01)；结直肠癌组术后治疗结束时血清miR-497表达量低于正常对照组( P<0.05)，血清CEA含量高于术后正常对照组( P<0.05)；CRC组术前血清miR-497诊断阳性率显著高于血清CEA( P<0.01)；复发转移组术前及术后血清miR-497表达量均显著低于无复发转移组( P<0.01)；术前血清miR-497表达量与CRC分化程度、TNM分期、是否淋巴结转移、是否远处转移、生存期长短有关( P<0.01)，而与患者年龄、性别、肿瘤大小及部位均无相关性( P>0.05)。Cox多因素分析显示肿瘤分化程度、TNM分期、术前血清miR-497表达量、淋巴结转移及远处转移均是影响CRC患者预后的独立危险因素( P<0.05)；血清miR-497低表达量组1、2、3年生存率低于血清miR-497高表达量组( P<0.05)。 结论:术前血清miR-497低表达与CRC侵袭转移、不良预后密切相关，可成为其预后评价指标；术后血清miR-497表达量降低对CRC术后复发转移有一定预测价值。

目的:探讨miR-497在碱烧伤诱导的角膜新生血管(CNV)形成过程中的作用及其机制。方法:选用健康清洁级6~8周龄野生型(WT)C57BL/6小鼠42只以及成功鉴定为CRISPR/Cas9介导的miR-497敲除(KO)和过表达转基因(TG)小鼠各42只，分别作为WT组、KO组和TG组。构建角膜碱烧伤模型，分别于造模后第3、7、14、21天行裂隙灯显微镜检查并进行角膜上皮损伤评分和角膜基质混浊评分，测量CNV面积；采用组织病理染色法观察角膜结构变化和炎症细胞的表达；采用免疫组织化学染色法检测角膜组织中CD31的表达；采用荧光素酶报告基因检测miR-497与信号转导及转录激活蛋白3(STAT3)之间的靶向结合关系；采用实时荧光定量PCR法检测各时间点小鼠角膜组织中miR-497以及血管内皮生长因子A(VEGFA)、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、IL-1β、单核细胞趋化蛋白(MCP)-1 mRNA的相对表达量变化；采用Western blot法检测各组造模后14 d角膜组织中STAT3、p-STAT3蛋白的表达。结果:小鼠角膜碱烧伤后出现角膜损伤和炎症细胞浸润，同时出现CNV。角膜上皮损伤评分、角膜基质混浊评分和CNV面积呈现先升高后降低的趋势，并在造模后第14天时达峰值。各组造模后不同时间点角膜上皮损伤评分、角膜基质混浊评分、CNV面积和CD31阳性细胞数总体比较差异均有统计学意义( F分组＝49.19、34.56、44.56、77.56，均 P<0.01； F时间＝51.62、65.62、71.32、46.12，均 P<0.01)；其中KO组各时间点角膜上皮损伤评分、角膜基质混浊评分、CNV面积和CD31阳性细胞数均高于WT组和TG组，TG组各指标均低于WT组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。在野生型STAT3共转染细胞中，miR-497组荧光素酶活性明显低于miR-阴性对照组和正常对照组，差异有统计学意义(均 P<0.05)；在突变型STAT3转染细胞中，各组间荧光素酶活性比较，差异无统计学意义( F＝0.69， P＝0.56)。WT组、KO组、TG组造模后14 d角膜组织中miR-497的相对表达量分别为0.68±0.11、0.41±0.06、1.05±0.14，均明显低于造模前的1.00±0.04、0.56±0.07、1.34±0.11，差异均有统计学意义(均 P<0.01)。造模后第14天，KO组STAT3及p-STAT3蛋白相对表达量均明显高于WT组和TG组，TG组各蛋白相对表达量低于WT组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。各组造模后各时间点VEGFA、TNF-α、IL-6、IL-1β和MCP-1 mRNA相对表达量均明显高于造模前，KO组各mRNA相对表达量明显高于同时间点WT组和TG组，TG组各mRNA相对表达量明显低于同时间点WT组，差异均有统计学意义(均 P<0.01)。 结论:MiR-497可抑制碱烧伤诱导的角膜炎症反应及CNV形成，其可能通过靶向STAT3抑制炎症信号通路的激活。

目的:探讨恶性胶质瘤组织中微小RNA(miR)-497表达特性及临床预后的关系。方法:2015年1月至2019年7月收集南方医科大学附属珠江manbet官网登录 25例胶质瘤组织，16例非肿瘤病变正常脑组织组织，分为实验组及对照组。荧光实时定量聚合酶链反应(PCR)测定胶质瘤组织和正常脑组织中miR-497、Wnt3a表达，线性相关分析miR-497与Wnt3a之间的关系。根据miR-497表达量高低分为高表达组、低表达组，生存分析(Kaplan-Meier分析)无病生存曲线和总生存曲线，分析miR-497表达与胶质瘤预后之间的关系。两独立样本 t检验比较胶质瘤组织和非肿瘤正常脑组织中miR-497平均表达水平；采用单因素方差分析比较实时荧光定量PCR检测结果中各个细胞株ΔCt值的差异(One-way ANOVA)。 结果:实时荧光定量PCR检测胶质瘤组织中miR-497的表达(1.29±0.61)低于正常脑组织(5.76±1.45， t＝3.215， P<0.05)，差异有统计学意义。胶质瘤组织中miR-497和Wnt3a基因RNA之间表达明显相关，miR-497和Wnt3a基因表达呈负相关( P<0.05)。高表达miR-497组与低表达miR-497组胶质瘤患者的Kaplan-Meier无病生存曲线和总生存曲线，miR-497表达高的胶质瘤患者无病生存率和总生存率显著高于miR-497低表达者，差异有统计学意义( t＝5.147， P<0.05)。 结论:恶性胶质瘤中miR-497表达下调，Wnt3a表达上调。miR-497表达高的胶质瘤患者无病生存率和总生存率显著高于miR-497低表达者。miR-497表达水平可能与恶性胶质瘤预后明显相关。

目的:观察氧诱导视网膜病变（OIR）小鼠视网膜组织中miRNA的表达，筛选与p21及视网膜新生血管（RNV）形成相关的miRNA。方法:实验研究。40只健康7日龄C57BL/6J小鼠随机分为正常组和OIR组，每组20只。OIR组构建氧诱导RNV模型，正常组不做任何处理。小鼠17日龄时，处死小鼠，视网膜荧光铺片观察小鼠RNV发生情况；光学显微镜下计数突破视网膜内界膜的血管内皮细胞核。取视网膜组织行miRNA芯片分析，检测正常组与OIR组之间差异表达的miRNA。所得差异miRNA靶基因分别进行基于基因注释（GO）和京都基因与基因组百科全书（KEGG）的富集分析；通过Targetscan、MiRanda、MicroT-CDS数据库比对筛选可能与p21有关的miRNA及通路。组间两两比较采用独立样本 t检验。 结果:与正常组比较，OIR组小鼠视网膜无灌注区面积、RNV及突破视网膜内界膜的血管内皮细胞核数量增加，差异均有统计学意义（ t=18.800、9.025， P<0.05）。与正常组比较，OIR组有统计学差异表达的miRNA 54个，其中，上调、下调者分别为47、7个。从3个数据库与所得差异miRNA的比对结果中共筛选到与p21相关miRNA 13个，按差异倍数从高到低分别为miR-7218-5p、miR-322-5p、miR-224-5p、miR-335-5p、miR-329-3p、miR-362-3p、miR-532-5p、miR-20b-5p、miR-20a-5p、miR-195a-5p、miR-423-5p、miR-497a-5p、miR-129-5p。差异miRNA靶基因富集分析，得到1 112个GO条目及50条KEGG通路，其中50个GO条目和13条KEGG通路与p21相关。 结论:在OIR模型中共筛选出13个与P21相关的miRNA。

目的:探讨长链非编码RNA（lncRNA）胃癌相关转录本3（GACAT3）在胶质瘤细胞放射敏感性中的作用及机制。方法:实时反转录PCR（RT-qPCR）实验检测lncRNA GACAT3、miR-497在人星形胶质细胞NHA和胶质瘤细胞U251中的表达。将NC-siRNA、GACAT3-siRNA转染至U251细胞中，使用X射线照射处理细胞，克隆形成实验检测U251细胞存活分数，流式细胞术检测U251细胞凋亡，蛋白质印迹法实验检测U251细胞中胱天蛋白酶3（Caspase-3）蛋白的表达。通过生物信息学软件和双荧光素酶报告基因实验预测和验证lncRNA GACAT3与miR-497以及miR-497与Yes相关蛋白1（YAP1）的靶向关系。将NC mimic、miR-497 mimic、GACAT3-siRNA与NC抑制剂、GACAT3-siRNA与miR-497抑制剂共转染至U251细胞中，通过克隆形成实验、流式细胞术、蛋白质印迹法实验检测过表达miR-497以及lncRNA GACAT3通过调控miR-497对U251细胞放射敏感性的影响。结果:与NHA细胞相比，lncRNA GACAT3在U251细胞中的表达明显升高，miR-497在U251细胞中的表达明显降低（ P<0.05）。敲低GACAT3后，照射后的U251细胞存活分数明显降低，细胞凋亡率和Caspase-3蛋白的表达均明显升高（ P<0.05）。lncRNA GACAT3靶向并负调控miR-497的表达。过表达miR-497可显著降低照射后的U251细胞存活分数，升高细胞凋亡率和Caspase-3蛋白的表达。抑制miR-497可显著逆转lncRNA GACAT3敲低对U251细胞放射敏感性的促进作用。miR-497靶向并负调控YAP1的表达。 结论:敲低lncRNA GACAT3可通过调控miR-497/YAP1轴增强胶质瘤细胞的放射敏感性。

目的:探究高迁移率蛋白A2基因(HMGA2)调控微小RNA(miRNA，miR)-497-5p对膀胱癌细胞增殖和侵袭的机制。方法:实时荧光定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和免疫印迹实验(Western blot)测定5种膀胱癌细胞系、膀胱永生化上皮细胞SV-HUC-1和正常膀胱尿路上皮细胞中的HMGA2表达。构建HMGA2过表达和si-HMGA2质粒转染EJ细胞，不做任何处理作为对照，检测各组EJ细胞miR-497-5p和p65、p-p65表达水平。EJ细胞转染不同质粒后，克隆形成实验检测增殖能力，Transwell实验测定侵袭能力。两组间比较采用独立样本 t检验。 结果:5种膀胱癌细胞系的HMGA2表达(10.31±0.86、138.38±19.32、34.55±3.95、10.88±0.56、220.55±15.32)高于SV-HUC-1(2.02±0.32， t＝15.648、12.223、14.218、23.793、24.701， P<0.01)。HMGA2组克隆数和侵袭细胞个数[(254.33±7.64)、(380.67±7.10个)]高于Blank组[(170.67±14.79)、(267±11.37)个， t＝9.768、17.168， P<0.01]；miR-497-5p mimic组克隆数和侵袭细胞个数[(174.00±1.73)、(109±3.46)个]低于miR-NC组[(189.00±7.55)、(219.00±16.64)个， t＝3.354、11.207， P<0.01)]；si-HMGA2+miR-497-5p inhibitor组克隆数和侵袭细胞个数[(203.00±13.08)、(305.00±3.46)个]高于si-HMGA2组[(138.67±19.04)、(170.33±24.99)个， t＝4.825、9.247， P<0.01]。HMGA2转染组p-p65/p65水平的比值(254.33±7.64)高于对照组(254.33±7.64， t＝18.557， P<0.01)。 结论:HMGA2基因负向调控miR-497-5p促进膀胱癌细胞的增殖和侵袭。

目的:探讨miR-497对糖尿病小鼠角膜上皮愈合的抑制作用及其可能机制。方法:取40只健康清洁级野生型C57BL/J6小鼠，采用随机数字表法平均分为空白对照组和模型对照组，另取CRISPR/Cas9介导的miR-497敲除小鼠和miR-497过表达小鼠各20只，分别作为miR-497敲除组和miR-497过表达组。对模型对照组、miR-497敲除组、miR-497过表达组小鼠连续腹腔注射链脲佐菌素(STZ)构建糖尿病模型，空白对照组小鼠注射等量枸橼酸钠缓冲液，正常饲养8周。糖尿病模型建立成功后通过刮除角膜中央直径2 mm上皮，进一步构建角膜上皮损伤模型。采用角膜荧光素钠染色观察角膜上皮损伤后0、12、24和36 h各组小鼠角膜上皮缺损面积。采用Western blot法检测各组小鼠角膜组织中wnt3a、β-catenin蛋白表达；采用实时荧光定量PCR法检测各组小鼠角膜组织miR-497以及细胞增生相关基因 CyclinD1、 c-Myc、 Ki-67 mRNA水平表达。采用双荧光素酶报告基因实验检测miR-497与wnt3a的靶向性关系。体外培养人角膜上皮细胞(HCEC)，通过Lipo8000分别转染miR-497 mimics、miR-497 mimics阴性对照、miR-497 inhibitor、miR-497 inhibitor阴性对照，作为miR-497 mimics组、mimics阴性对照组、miR-497 inhibitor组、inhibitor阴性对照组，并在含25%葡萄糖的高糖培养基中培养；另取2个组HCEC分别置于含5%及25%葡萄糖的培养基进行培养，作为正常对照组及高糖组。采用CCK8检测各组细胞增生活力。 结果:注射STZ后8周，各糖尿病模型组小鼠血糖浓度明显高于空白对照组，体质量明显低于空白对照组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。模型对照组损伤角膜上皮后12、24和36 h角膜上皮缺损面积百分比明显高于相应时间点空白对照组和miR-497敲除组，低于miR-497过表达组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。模型对照组角膜组织中wnt3a、β-catenin蛋白相对表达量明显低于空白对照组和miR-497敲除组，高于miR-497过表达组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。模型对照组CyclinD1、c-Myc和Ki-67 mRNA相对表达量均低于miR-497敲除组，高于miR-497过表达组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。模型对照组、miR-497敲除组和miR-497过表达组miR-497相对表达量分别为1.00±0.02、0.63±0.06和1.48±0.03，总体比较差异均有统计学意义( F＝19.62， P<0.01)。野生型Wnt3a转染细胞中miR-497-5p mimics组荧光素酶活性低于miR-497-5p阴性对照组和空载体组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)；突变型wnt3a转染细胞中，各组荧光素酶活性比较差异无统计学意义( F＝0.73， P＝0.59)。高糖组细胞增生 A值为0.59±0.03，明显低于正常对照组的0.59±0.03和miR-497 inhibitor组的0.88±0.08，明显高于miR-497 mimics组的0.48±0.11，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。 结论:沉默miR-497表达可能通过靶向激活wnt/β-catenin通路促进糖尿病小鼠角膜上皮缺损修复。

目的:探讨miR-497对人前列腺癌细胞系PC3-AR生长侵袭及奥沙利铂药物敏感性。方法:用RT-PCR检测正常前列腺上皮细胞系RWPE-1和人前列腺癌细胞系PC3-AR中miRNA-497的表达水平。将PC3-AR分别转染不同浓度miR-497模拟物（25、50和100 nmol/L），通过噻唑蓝法和Transwell法检测miR-497对PC3-AR细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。用双报告基因检测miR-497与IκB激酶β（IKKβ）mRNA的3′-UTR的结合。用免疫印迹分析miR-497对抗基质金属蛋白酶9（MMP-9）、细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶8（CDK8）、IKKβ、前列腺特异性抗原（PSA）的影响。分析miR-497对PC3-AR细胞对奥沙利铂敏感性影响。结果:miRNA-497在PC3-AR中的表达水平显著下调（ P<0.01）。过表达的miR-497显著抑制PC3-AR的增殖、迁移和侵袭。miR-497通过抑制IKKβ的蛋白表达，进一步抑制CDK8、MMP-9和PSA的蛋白表达，从而抑制PC3-AR的增殖和迁移。miR-497通过抑制奥沙利铂处理的PC3-AR细胞增殖并促进其凋亡，增加PC3-AR细胞对奥沙利铂的敏感性。 结论:miR-497通过调节PC3-AR细胞的IKK-β而起到肿瘤抑制基因的作用，miR-497可增加PC3-AR细胞对奥沙利铂药物的敏感性。

目的:观察食管癌患者血清miR-497、miR-383水平，并分析其对食管癌的临床意义。方法:收集2018年7月—2020年2月协和武汉红十字会manbet官网登录 收治的食管癌患者作为食管癌组（ n=96），并根据随访结果分为复发组（ n=29）和未复发组（ n=67），对照组为同期在本院进行体检的健康者（ n=83），良性病变组为同期在本院就诊的食管良性病变患者（ n=78）。采用实时荧光定量PCR对各组血清miR-497、miR-383水平进行检测；采用Pearson相关分析探讨食管癌患者血清miR-497和miR-383水平的相关性；分析食管癌患者血清miR-497、miR-383水平与临床病理特征的关系；绘制受试者操作特征（ROC）曲线分析血清miR-497、miR-383以及二者联合预测食管癌患者预后的效能。 结果:对照组、良性病变组以及食管癌组血清miR-497水平分别为1.01±0.18、0.86±0.15、0.77±0.14，血清miR-383水平分别为1.02±0.21、0.95±0.15、0.84±0.15，差异均有统计学意义（ F=52.59， P<0.001； F=25.12， P<0.001）；3组血清miR-497、miR-383水平两两比较，差异均有统计学意义（均 P<0.05）。Pearson相关分析显示，食管癌患者血清miR-497与miR-383水平呈正相关（ r=0.46， P<0.001）。不同肿瘤直径（ t=6.58， P<0.001； t=5.06， P<0.001）、淋巴结转移（ t=5.55， P<0.001； t=4.63， P<0.001）、TNM分期（ t=5.00， P<0.001； t=2.75， P<0.001）食管癌患者的血清miR-497、miR-383水平差异均具有统计学意义。未复发组血清miR-497（0.83±0.15比0.62±0.11， t=6.78， P<0.001）、miR-383（0.91±0.16比0.67±0.13， t=7.12， P<0.001）水平均高于复发组。ROC曲线分析显示，血清miR-497预测食管癌预后情况的临界值为0.72，敏感性为68.97%，特异性为68.66%，曲线下面积（AUC）为0.756；血清miR-383预测食管癌预后情况的临界值为0.84，敏感性为82.76%，特异性为67.16%，AUC为0.827；二者联合预测的敏感性为79.31%，特异性为85.07%，AUC为0.899；与血清miR-497（ Z=3.31， P=0.001）、miR-383（ Z=2.51， P=0.012）单独预测时的AUC相比，二者联合预测的效果更好。 结论:食管癌患者血清miR-497、miR-383水平较健康者及良性病变患者降低，与肿瘤直径、淋巴结转移、TNM分期及预后有关，二者联合检测对食管癌预后具有一定的预测价值。