目的：利用 RNAi （RNA interference， RNAi）技术抑制食管癌 Eca －109细胞 survivin 基因表达，观察 survivin 基因沉默后对 Eca －109细胞化疗敏感性的影响。方法构建靶向 survivin 基因特定序列的小干扰 RNA（small interference RNA， siRNA）真核表达载体并转染 Eca －109细胞，筛选得到稳定转染的 survivin 干扰组细胞 Eca －109／si －survivin，同时设转染无关干扰质粒的 Eca －109细胞为阴性对照组，未转染的 Eca －109细胞为空白对照组；通过 Western Blot 法检测干扰前后 survivin 基因沉默抑制效果；随后将各组细胞与不同浓度的氟尿嘧啶（5－Fu）作用，MTT 法检测各组细胞对5－Fu 的半数抑制浓度（IC50），流式细胞仪分析各组细胞的凋亡率。结果干扰组 Eca －109／si －survivin 细胞 survivin 蛋白表达水平（18．75±3．12）较阴性对照组 Eca －109／si －control（44．17±3．15）及空白对照组 Eca －109（46．20±2．62）明显下调（P ＜0．05）；联合应用5－Fu 的Eca －109／si －survivin 干扰组细胞 IC50为（18．75±1．53）mg? L－1，显著低于空白对照组（39．65±1．75）mg? L－1和阴性对照组（38．95±1．34）mg? L－1，差异具有统计学意义（P ＜0．05）；联合应用5－Fu 的 Eca －

作者：牛朝霞；彭蕤蕤；陈洁；秦紫芳；裴瑞

来源：安徽医药 2016 年 20卷 4期