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应用PCR技术分别扩增出编码白喉毒素氨基端389个氨基酸(DT389)的基因片段及人IL-2全基因,将两基因串连插入pET3a载体,构建成含有DT389-IL-2融合基因的表达载体,转化大肠杆菌BL21,经表达、纯化后,用3H-Leucine掺入法测定其对HUT102细胞的蛋白合成抑制作用。SDS-PAGE电泳分析表明,表达产物分子质量(Mr)约为58kD;重组嵌合毒素能够特异性地抑制高表达IL-2受体的HUT102细胞的蛋白生物合成,且有一定的剂量反应关系,其细胞半数抑制浓度(IC50)约为3.3×10-11mol/L。为进一步研制特异性的抗IL-2受体高表达肿瘤和相关疾病的药物打下了基础。

作者:刘扬;王健伟;屈建国;王春晓;洪涛

来源:病毒学报 2001 年 17卷 2期

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作者:
刘扬;王健伟;屈建国;王春晓;洪涛
来源:
病毒学报 2001 年 17卷 2期
标签:
白喉毒素 白细胞介素-2 嵌合毒素 基因表达 细胞毒作用
应用PCR技术分别扩增出编码白喉毒素氨基端389个氨基酸(DT389)的基因片段及人IL-2全基因,将两基因串连插入pET3a载体,构建成含有DT389-IL-2融合基因的表达载体,转化大肠杆菌BL21,经表达、纯化后,用3H-Leucine掺入法测定其对HUT102细胞的蛋白合成抑制作用。SDS-PAGE电泳分析表明,表达产物分子质量(Mr)约为58kD;重组嵌合毒素能够特异性地抑制高表达IL-2受体的HUT102细胞的蛋白生物合成,且有一定的剂量反应关系,其细胞半数抑制浓度(IC50)约为3.3×10-11mol/L。为进一步研制特异性的抗IL-2受体高表达肿瘤和相关疾病的药物打下了基础。