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目的构建人血栓调节蛋白(human thrombomodulin,hTM)基因的真核表达质粒,为研究hTM在抗血栓、抗炎症、抗血管增生等方面的作用及其临床应用奠定基础.方法用PCR法扩增出hTMcDNA表达片段.把载体质粒pcDNA3.1(+)/neo和hTM片段用EcoR I+HindⅢ双酶切,T4DNA连接酶进行连接.结果重组质粒在大肠杆菌菌株DH5α内扩增.提取、纯化后用HindⅢ、EcoR I酶切鉴定及测序鉴定证明hTMcDNA表达片段已被完整、正确的插入到pcDNA3.1(+)/neo质粒中.结论成功构建了hTM基因的真核表达质粒pcDNA-hTM.
作者：戴毅；乔正荣；时德
来源：重庆医学 2003 年 32卷 10期
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