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目的 探讨大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)在不同无血清培养时间下增殖及分泌血管内皮生长因子(VEGF)的规律.方法 采用贴壁培养法纯化BMSCs,流式细胞仪鉴定第3代(P3)BMSCs的细胞表型;比较BMSCs在不同无血清培养时间下的细胞凋亡率;将BMSCs分为无血清培养12、24、36、48及72 h组,用ELISA方法检测VEGF的分泌.结果 原代BMSCs培养24 h后贴壁生长良好;经流式细胞仪检测,BMSCs表面CD34、CD45阴性,而CD29、CD44、CD90阳性,符合BMSCs特征;无血清培养12、24、36、48、72 h后细胞凋亡率组间比较,差异无统计学意义(P>0.05),培养96 h后凋亡率与其余各组比较差异有统计学意义(P<0.05);随着无血清培养时间的延长,BMSCs分泌VEGF 逐渐增多(P<0.05),无血清培养72 h组分泌VEGF水平最高.结论 大鼠BMSCs在无血清培养条件下,72 h内细胞凋亡无明显增多,且随着无血清培养时间的延长,分泌VEGF 逐渐增多.

作者:林育辉;何晓青;陈敏生;陈晞明

来源:重庆医学 2013 年 42卷 11期

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作者:
林育辉;何晓青;陈敏生;陈晞明
来源:
重庆医学 2013 年 42卷 11期
标签:
血管内皮生长因子A 骨髓间充质干细胞 贴壁法
目的 探讨大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)在不同无血清培养时间下增殖及分泌血管内皮生长因子(VEGF)的规律.方法 采用贴壁培养法纯化BMSCs,流式细胞仪鉴定第3代(P3)BMSCs的细胞表型;比较BMSCs在不同无血清培养时间下的细胞凋亡率;将BMSCs分为无血清培养12、24、36、48及72 h组,用ELISA方法检测VEGF的分泌.结果 原代BMSCs培养24 h后贴壁生长良好;经流式细胞仪检测,BMSCs表面CD34、CD45阴性,而CD29、CD44、CD90阳性,符合BMSCs特征;无血清培养12、24、36、48、72 h后细胞凋亡率组间比较,差异无统计学意义(P>0.05),培养96 h后凋亡率与其余各组比较差异有统计学意义(P<0.05);随着无血清培养时间的延长,BMSCs分泌VEGF 逐渐增多(P<0.05),无血清培养72 h组分泌VEGF水平最高.结论 大鼠BMSCs在无血清培养条件下,72 h内细胞凋亡无明显增多,且随着无血清培养时间的延长,分泌VEGF 逐渐增多.