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目的:探讨沉默ATP1A1基因对人U251胶质瘤干细胞增殖能力的影响。方法采用ATP1A1-shRNA慢病毒感染人U251胶质瘤干细胞,逆转录实时定量PCR(RT-qPCR)及蛋白质印迹法(Western blot)分别检测ATP1A1的mRNA和蛋白表达,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡,M T T法检测细胞体外的增殖情况。结果通过RT-qPCR及Western blot 分析表明,感染后的细胞组ATP1A1的mRNA和蛋白表达均受到明显抑制,ATP1A1 mRNA抑制率为84.15%,蛋白表达抑制率为55.33%,细胞生长变慢,细胞凋亡比例显著增加,G1期细胞增多,而S期细胞减少,二者比较差异有统计学意义( P<0.05)。结论靶向ATP1A1基因干扰能够抑制人U251胶质瘤干细胞ATP1A1的表达,诱导细胞凋亡,调控细胞周期再分布,抑制细胞增殖。

作者:赵洪新;张丽;王玉玉;李刚;李毅

来源:重庆医学 2014 年 8期

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作者:
赵洪新;张丽;王玉玉;李刚;李毅
来源:
重庆医学 2014 年 8期
标签:
RNA ,小分子干扰 神经胶质瘤 干细胞 ATP1A1基因 细胞凋亡 RNA,small interfering glioma stem cells ATP1A1 gene apoptosis
目的:探讨沉默ATP1A1基因对人U251胶质瘤干细胞增殖能力的影响。方法采用ATP1A1-shRNA慢病毒感染人U251胶质瘤干细胞,逆转录实时定量PCR(RT-qPCR)及蛋白质印迹法(Western blot)分别检测ATP1A1的mRNA和蛋白表达,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡,M T T法检测细胞体外的增殖情况。结果通过RT-qPCR及Western blot 分析表明,感染后的细胞组ATP1A1的mRNA和蛋白表达均受到明显抑制,ATP1A1 mRNA抑制率为84.15%,蛋白表达抑制率为55.33%,细胞生长变慢,细胞凋亡比例显著增加,G1期细胞增多,而S期细胞减少,二者比较差异有统计学意义( P<0.05)。结论靶向ATP1A1基因干扰能够抑制人U251胶质瘤干细胞ATP1A1的表达,诱导细胞凋亡,调控细胞周期再分布,抑制细胞增殖。