目的：构建微管解离蛋白stathmin过表达的人SMMC-7721肝癌细胞株，并探讨stathmin过表达对肝癌细胞增殖侵袭的影响。方法采用脂质体将Flag-pcDNA3．1-stathmin重组质粒和 Flag-pcDNA3．1空质粒分别转染人SMMC-7221肝癌细胞，抗生素加压筛选，构建稳定表达stathmin的SMMC-7721细胞（实验组），以稳转空质粒的细胞为对照组，Western blot对建系细胞进行鉴定。采用CCK-8和软琼脂克隆形成实验检测细胞增殖；流式细胞术（FCM ）检测细胞凋亡和细胞周期；体外细胞运动侵袭实验（Transwell）测定细胞的运动、侵袭能力。结果实验组中stathmin的表达0．76±0．12较对照组0．16±0．05明显增加（P＜0．05），成功构建了过表达stathmin的人SMMC-7721肝癌细胞株；CCK-8和软琼脂克隆形成实验显示，实验组的细胞增殖较对照组明显增加（A4500．60±0．05 vs．0．29±0．03，P＜0．01）；实验组细胞凋亡降低[（5．80±0．33）％ vs．（11．57±1．09）％，P＜0．05]，细胞周期阻滞在G2/M期；T ransw ell实验结果证实，与对照组比较，实验组细胞运动和侵袭能力均显著加强[运动实验透膜细胞数：（54．03±7．21）个 vs．（130．45±14．13）个；侵袭实验透膜细胞数：（17．75±2．52）个 vs．（57．76±8．50）个]，差异均
作者：龚舒；陶忠桦；刘晓燕；郭坤；刘银坤；甘淋
来源：重庆医学 2014 年 10期
