目的:探讨小干扰RNA(siRNA)沉默EZH2表达对人膀胱癌细胞增殖、侵袭和迁移能力,以及对凋亡的影响。方法构建靶向EZH2基因的siRNA质粒并转染至人膀胱癌细胞中(干扰组),采用RT-PCR法检测EZH2mRNA的表达情况,利用噻唑蓝(MTT)、Transwell细胞小室及划痕实验检测转染后细胞增殖、侵袭和转移能力的变化,通过流式细胞术实验观察转染后细胞的凋亡情况。结果转染EZH2基因的siRNA质粒后(分干扰1组,干扰2组,干扰3组),干扰各组EZH2mRNA表达较阴性对照组有明显抑制(P<0.05),且干扰2组效果最好,因此选干扰2组作后期实验;在转染48h后,干扰2组生长抑制率达37.9%,较阴性对照组受到明显抑制(P<0.05);划痕实验处理24h后,干扰2组细胞的迁移距离较阴性对照组明显降低(P<0.01);干扰2组细胞侵袭能力较阴性对照组下降了67%,差异有统计学意义(P<0.01);转染48h后,干扰2组早、晚期凋亡率分别为22.80%和3.60%,较阴性对照组增加,且以早期明显,差异有统计学意义(P<0.01)。结论EZH2基因沉默能有效抑制人膀胱癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力,并促进其凋亡,为深入研究膀胱癌的基因治疗提供理论依据。
作者:王海峰;杨宏;胡礼炳;雷永虹;秦扬;李俊;毕城伟;霍倩
来源:重庆医学 2014 年 20期