目的：构建黑色素瘤抑制蛋白2（MIA2）慢病毒表达载体，并将其通过脂质体转染到HepG2细胞中，观察转染前后MIA2表达变化及其对细胞凋亡的影响。方法以pDONR223‐MIA2为模板，PCR扩增MIA2，构建pLVX‐IRES‐ZsGreen1‐MIA2慢病毒表达载体，体外瞬时转染肝癌细胞HepG2，荧光显微镜下观察MIA2的表达情况，用实时荧光定量PCR（RT‐PCR）检测HepG2细胞中MIA2mRNA的表达情况，噻唑蓝（MTT）法和克隆形成实验检测细胞增殖的情况。结果成功构建pLVX‐IRES‐ZsGreen1‐MIA2慢病毒表达载体；RT‐PCR结果显示，阴性对照组与实验组细胞MIA2mRNA表达水平差异有统计学意义（P＜0．05）；MTT检测发现，实验组细胞增殖数目较阴性对照组明显减少，差异有统计学意义（P＜0．05）；此外，实验组的克隆形成数和细胞迁移数均较阴性对照组明显减少，差异有统计学意义（P＜0．05）。结论pIRES2‐ZsGreen1‐MIA2可显著下调MIA2的表达水平进而抑制肝癌细胞HepG2的体外增殖及迁移能力。
作者：杨花；杨少奇；何芳；胡建国；李鹏
来源：重庆医学 2014 年 32期
