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目的:研究RNA干扰(RNAi)人肺癌A549细胞中期因子(MK)基因表达及对肿瘤细胞凋亡的影响。方法构建含MK siRNA真核表达载体,将其转染到人肺癌A549细胞株中(实验组),另有阴性对照组(转染阴性对照质粒)和空白对照组。应用RT‐PCR的方法检测各组细胞中MK mRNA的表达情况;采用Western blot法检测MK蛋白的表达情况;用流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况。结果实验组MK蛋白和mRNA表达都下降,分别下降了89.3%和83.3%。转染实验组A549细胞有自发性凋亡的发生,早期凋亡比阴性对照组和空白组分别提高了15.5倍和9.34倍。实验组caspase‐3活性明显高于阴性对照组和空白对照组(P<0.05)。结论 RNAi下调人肺癌A549细胞株MK的表达,可诱导肿瘤细胞的自身凋亡。

作者:孙常铭;王丽萍;刘敏;赵维川;朴宗方;张秀琴

来源:重庆医学 2015 年 5期

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作者:
孙常铭;王丽萍;刘敏;赵维川;朴宗方;张秀琴
来源:
重庆医学 2015 年 5期
标签:
RNA干扰 细胞凋亡 A549 中期因子 RNA interference apoptosis A549 midkine
目的:研究RNA干扰(RNAi)人肺癌A549细胞中期因子(MK)基因表达及对肿瘤细胞凋亡的影响。方法构建含MK siRNA真核表达载体,将其转染到人肺癌A549细胞株中(实验组),另有阴性对照组(转染阴性对照质粒)和空白对照组。应用RT‐PCR的方法检测各组细胞中MK mRNA的表达情况;采用Western blot法检测MK蛋白的表达情况;用流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况。结果实验组MK蛋白和mRNA表达都下降,分别下降了89.3%和83.3%。转染实验组A549细胞有自发性凋亡的发生,早期凋亡比阴性对照组和空白组分别提高了15.5倍和9.34倍。实验组caspase‐3活性明显高于阴性对照组和空白对照组(P<0.05)。结论 RNAi下调人肺癌A549细胞株MK的表达,可诱导肿瘤细胞的自身凋亡。