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目的 在人肺癌细胞系NCI-H1650中分离出肺癌干细胞及鉴定.方法 将NCI-H1650细胞在含人胰岛素、重组人表皮生长因子(EGF)、重组人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、牛血清清蛋白(BSA)的无血清培养基中连续培养 ,用紫杉醇刺激诱导干细胞 ,通过流式细胞术、免疫荧光的方法分析肺癌干细胞标志物CD133和CD326的表达;采用RT-PCR和Western blot的方法检测干细胞相关标记物Oct4、Nanog和Sox-2的表达.结果 经无血清连续培养结合紫杉醇诱导的NCI-H1650细胞呈球形悬浮生长 ,相比于有血清培养的NCI-H1650细胞 ,其干细胞标志物CD133和CD326高表达 ,干细胞相关标志物Oct4、Nanog和Sox-2表达水平提高(P<0 .05).结论 采用体外无血清连续培养结合紫杉醇刺激诱导 NCI-H1650细胞能有效分离出其中干细胞.

作者:丁曼;张岸梅;朱波

来源:重庆医学 2015 年 44卷 12期

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作者:
丁曼;张岸梅;朱波
来源:
重庆医学 2015 年 44卷 12期
标签:
肺肿瘤 肿瘤干细胞 培养基,无血清 lung neoplasms neoplastic stem cells culture media serum-free
目的 在人肺癌细胞系NCI-H1650中分离出肺癌干细胞及鉴定.方法 将NCI-H1650细胞在含人胰岛素、重组人表皮生长因子(EGF)、重组人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、牛血清清蛋白(BSA)的无血清培养基中连续培养 ,用紫杉醇刺激诱导干细胞 ,通过流式细胞术、免疫荧光的方法分析肺癌干细胞标志物CD133和CD326的表达;采用RT-PCR和Western blot的方法检测干细胞相关标记物Oct4、Nanog和Sox-2的表达.结果 经无血清连续培养结合紫杉醇诱导的NCI-H1650细胞呈球形悬浮生长 ,相比于有血清培养的NCI-H1650细胞 ,其干细胞标志物CD133和CD326高表达 ,干细胞相关标志物Oct4、Nanog和Sox-2表达水平提高(P<0 .05).结论 采用体外无血清连续培养结合紫杉醇刺激诱导 NCI-H1650细胞能有效分离出其中干细胞.