目的 目的用包含切除修复交叉互补(ERCC1)基因特异RNA序列的慢病毒,将其转染入宣威肺腺癌细胞XWCL05中,沉默ERCC1基因表达,初步探讨其基因沉默效果及对顺铂敏感性的影响,为顺铂耐药逆转提供思路和依据.方法 经293T细胞包装后构建ERCC1基因RNAi的慢病毒载体及阴性对照,分别使用XWCL05空白组(空白对照)、XWCL05-neg组(转染空载体)、XWCL05-RNAi组(转染ERCC1-RNAi慢病毒).Western blot法检测转染前后XWCL05细胞中ERCC1蛋白的表达.12.5 μg/mL顺铂作用48 h后,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测顺铂对各组XWCL05细胞增殖抑制率的影响;流式细胞术检测各组中XWCL05细胞的凋亡率.结果 (1) Western blot结果显示,XWCL05-RNAi组中ERCC1蛋白表达水平显著低于XWCL05-neg组(P＜0.05),而XWCL05-neg和XWCL05空白组差异无统计学意义(P＞0.05).(2)MTT法检测显杀相同浓度顺铂作用下,XWCL05-RNAi组的增殖抑制率显著高于XWCL05-neg组和XWCL05空白组(P＜0.05),而XWCL05-neg组.(3)流式细胞术检测结果显示,XWCL05-RNAi组凋亡率显著高于XWCL05-neg组和XWCL05空白组(P＜0.05).而顺铂作用后,各组凋亡率较前均显著升高(P＜0.05),且XWCL05-RNAi组凋亡率显著高于其余两组.结论 ERCC1基因RNAi的慢病毒能够有效地沉默宣威肺腺癌细胞XWCL05中ER

作者：王巍炜；巫正伟；王德光；张勇

来源：重庆医学 2016 年 45卷 28期