目的 建立结肠癌(CRC)5-氟尿嘧啶(5-Fu)耐药株探讨EB病毒诱导基因3(EBI3)与CRC 5-Fu耐药的关系.方法 采用5-Fu持续接触浓度递增诱导法建立人CRC耐药细胞系;CCK-8法检测细胞增殖和耐药性;4',6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色观察细胞核形态学改变;流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡;EBI3 CRISPR激活质粒和EBI3 CRISPR/Cas9敲除质粒转染结肠癌耐药和非耐药细胞后,Western blot检测EBI3、细胞色素P450家族成员1B1 (CYP1B1)和有丝分裂原活化蛋白激酶激酶激酶2(MEKK2)表达.结果 采用5-Fu持续接触浓度递增诱导法建立人结肠CRC细胞系SW1116/5-Fu和LoVo/5-Fu;细胞周期检测结果显示,与SW1116和LoVo细胞相比,SW1116和SW1116/5-Fu细胞周期各期百分比无明显差异(P＞0.05).与LoVo细胞相比,LoVo/5-Fu细胞G1期细胞百分比明显增高(P＜0.05),S期细胞百分比明显降低(P＜0.05);Western blot检测结果显示,与SW1116和LoVo细胞相比,SW1116/5-Fu和LoVo/5-Fu细胞EBI3、CYP1B1和MEKK2表达均明显增高;SW1116、SW1116/5-Fu、LoVo和LoVo/5-Fu细胞转染EBI3敲除质粒后,5-Fu作用细胞的半抑制浓度(IC50)值明显降低(P＜0.05),而细胞转染EBI3激活质粒后,5-Fu作用细胞的IC50值明显增高(P＜0.05).结论 EBI3可能介导了CRC细胞对5-Fu的耐药过程.

作者：梁艳芳；叶子瑜；马燕；林碧华；陈灿；曾今诚

来源：重庆医学 2020 年 49卷 13期