目的 探究敲低序列相似性 83 蛋白质家族成员D(FAM83D)对调节宫颈癌细胞干细胞特性的作用及其机制.方法 收集手术切除的宫颈癌组织及对应癌旁组织,培养宫颈癌细胞株 Hela、Siha、C33A及正常宫颈上皮细胞株 H8,检测FAM83D及干细胞标志基因 Sox2、Oct4 的 mRNA 及蛋白表达水平.对 Hela 细胞进行分组,转染阴性对照(NC)siRNA、FAM83D siRNA,感染NC shRNA慢病毒、FAM83D shRNA慢病毒,联合使用对照溶剂二甲基亚砜(DMSO)或β-catenin 通路激动剂 SKL2001,检测 FAM83D 及干细胞标志基因Sox2、Oct4 的 mRNA及蛋白表达水平,并采用瘤球形成实验检测肿瘤干细胞特性.结果 宫颈癌组织中FAM83D、Oct4、Sox2 mRNA 相对表达水平均明显高于癌旁组织(P<0.001),且宫颈癌组织中 FAM83D mRNA与 Oct4、Sox2 mRNA相对表达水平均呈负相关(r=-0.351、-0.332,P<0.05).Hela、Siha、C33A细胞中FAM83D、Oct4、Sox2 mRNA和蛋白相对表达水平均明显高于 H8 细胞(P<0.05),并且 Hela 细胞中FAM83D、Oct4、Sox2 mRNA和蛋白相对表达水平均明显高于Siha、C33A细胞(P<0.05).转染 siRNA或感染 shRNA慢病毒敲低FAM83D后,Hela细胞的细胞球形成率及 Oct4、Sox2、β-catenin mRNA 和蛋白相对表达水平均明显降低(P<0.05);联合使用β-catenin 通路激动剂
作者:张岚;王静依;刘述江;叶礼翠;吴欣瑜
来源:重庆医学 2023 年 52卷 14期