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目的:制备抑制肿瘤细胞侵袭转移的单链抗体片段,用于构建小型化的免疫偶联物。方法:应用噬菌体呈现技术,以产生抗Ⅳ型胶原酶单抗的杂交瘤细胞为基础克隆构建单链抗体( scFv)基因。以表达质粒 pET-30a(+ )为载体在大肠杆菌中进行诱导表达。 ELISA法测定表达产物的免疫反应性,明胶酶谱法测定表达产物对靶酶活性的影响。 Boyden Chamber测定表达产物对肿瘤细胞侵袭的影响。结果:表达的单链抗体以包涵体形式存在,经变性和复性后,检测表明表达产物保留了对抗原的免疫反应性,对高转移性人肺癌 PG细胞分泌的Ⅳ型胶原酶有抑制作用。同时在体外能抑制肿瘤细胞的侵袭,抑制率与表达产物的剂量浓度相关, 1 mg/ml浓度的片段具有 68%的抑制率。结论:运用基因工程手段获得的单链抗体片段保留了亲本抗体的若干特性,对Ⅳ型胶原酶有抑制作用,并能抑制肿瘤细胞的侵袭。
作者:唐勇;甄永苏
来源:癌症 2001 年 20卷 8期
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