背景与目的:促、抑凋亡因子间的相互作用与肿瘤的发生、发展密切相关.Omi/HtrA2是新近发现的一种凋亡调节因子,PED/PEA-15是一种广泛表达的抗凋亡蛋白.本研究旨在探讨Omi/HtrA2对PED/PEA-15表达和前列腺癌细胞PC-3凋亡的影响.方法:构建Omi/HtrA2的表达载体和siRNA载体,并用脂质体法分别将两载体转染至PC-3细胞中,Western blot和ELISA法检测Omi/HtrA2对PED/PEA-15表达和细胞凋亡的影响;Caspase-8检测试剂盒检测PED/PEA-15对Caspase-8活性的影响;Western blot、RT-PCR法检测Omi/HtrA2特异siRNA序列对其转录、翻译的影响,流式细胞仪检测siRNA导致Omi/HtrA2基因沉默后PC-3细胞凋亡的变化.结果:酶切和DNA测序证实Omi/HtrA2的表达载体和siRNA载体构建成功.通过转染Omi/HtrA2表达载体高表达Omi/HtrA2可抑制PED/PEA-1 5表达,并增加肿瘤细胞的凋亡率;抑制PED/PEA-15的表达可提高Caspase-8活性.siRNA沉默Omi/HtrA2基因后PC-3细胞对顺铂的敏感性降低.结论:Omi/HtrA2可通过抑制抗凋亡蛋白PED/PEA-15表达而在PC-3细胞凋亡中发挥重要作用.
作者:胡晓勇;陈晓春;朱朝辉;陈朝晖;曾甫清;鲁功成
来源:癌症 2006 年 25卷 6期