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目的 探讨大鼠脑组织8种RNA指标,在不同温度下的表达水平与早期死亡时间(PMI)的相关性.方法 将222只SD大鼠随机分为对照组(死后0 h)和4个实验组,实验组断颈处死后分别置于5℃、15℃、25℃和35℃的环境中,于死后1~24 h内9个时间点提取脑组织RNA,利用实时荧光定量PCR技术检测8种RNA指标(β-actin、GAPDH、RPS29、18S rRNA、5S rRNA、U6 snRNA、miRNA-9及miRNA-125b)的表达水平,geNorm软件选取合适内参,SPSS软件对内参标准化RNA指标进行回归分析,R软件构建推断PMI的数学模型,另选6只已知PMI的SD大鼠予以验证.结果 5S rRNA、miR-9和miR-125b表达稳定,可作为内参指标.β-actin和GAPDH具有良好的时序性降解规律,在24 h内随PMI延长不断降解.R软件拟合得ΔCt值随PMI和温度变化的数学模型可用以推断PMI.运用β-actin和GAPDH验证模型的平均误差率分别为14.1

作者:吕叶辉;李志宏;托娅;刘丽;李堃;卞杰;马剑龙;陈龙

来源:法医学杂志 2016 年 32卷 3期

知识库介绍

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作者:
吕叶辉;李志宏;托娅;刘丽;李堃;卞杰;马剑龙;陈龙
来源:
法医学杂志 2016 年 32卷 3期
标签:
法医病理学 RNA 死亡时间 温度 降解 大鼠 forensic pathology RNA postmortem intervals temperature degradation rats
目的 探讨大鼠脑组织8种RNA指标,在不同温度下的表达水平与早期死亡时间(PMI)的相关性.方法 将222只SD大鼠随机分为对照组(死后0 h)和4个实验组,实验组断颈处死后分别置于5℃、15℃、25℃和35℃的环境中,于死后1~24 h内9个时间点提取脑组织RNA,利用实时荧光定量PCR技术检测8种RNA指标(β-actin、GAPDH、RPS29、18S rRNA、5S rRNA、U6 snRNA、miRNA-9及miRNA-125b)的表达水平,geNorm软件选取合适内参,SPSS软件对内参标准化RNA指标进行回归分析,R软件构建推断PMI的数学模型,另选6只已知PMI的SD大鼠予以验证.结果 5S rRNA、miR-9和miR-125b表达稳定,可作为内参指标.β-actin和GAPDH具有良好的时序性降解规律,在24 h内随PMI延长不断降解.R软件拟合得ΔCt值随PMI和温度变化的数学模型可用以推断PMI.运用β-actin和GAPDH验证模型的平均误差率分别为14.1