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目的:探讨新型过氧化物酶Peroxiredoxin-1(Prx-1)对大鼠肺成纤维细胞(FB)增殖和JNK通路的影响。方法体外培养FB,随机分为:对照组、TGF-β1组、空转染组、Prx-1转染组。对照组:以0.4%血清浓度MEM作为基础培养液;TGF-β1组:0.4%血清培养条件下,给予TGF-β1(5μg/L)孵育细胞;空转染组:利用脂质体Lipo2000将空载体转染到FB 36 h,给予同步化处理12 h后,在0.4%血清培养条件下,给予TGF-β1(5μg/L)孵育细胞;Prx-1转染组:Prx-1真核表达质粒转染到FB 36 h,给予同步化处理12 h后,在0.4%血清培养条件下,给予TGF-β1(5μg/L)孵育细胞。质粒转染采用脂质体转染法;免疫荧光检测质粒转染和8-OhdG(DNA氧化产物)的水平;MTT法检测FB增殖;Western blot 检测JNK和Prx-1的表达情况。结果质粒成功转染入FB,转染Prx-1真核表达质粒使Prx-1在FB内蛋白表达水平增高。与对照组比较,TGF-β1组的FB增殖、8-OhdG及磷酸化的JNK表达均明显增加。与TGF-β1组比较,空转染组中的上述观察指标无明显变化,但在Prx-1转染组,这些指标均明显下降。结论 TGF-β1能够诱导FB生成反应性氧物质(ROS),并由此促进JNK的激活和FB增殖,而Prx-1可通过抑制ROS来抑制TGF-β1诱导的FB增殖。

作者:孙影;魏中秋;胡亚萍;郑素琴;刘宝欣;贾艳春;杨方

来源:广东医学 2014 年 10期

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孙影;魏中秋;胡亚萍;郑素琴;刘宝欣;贾艳春;杨方
来源:
广东医学 2014 年 10期
标签:
Peroxiredoxin-1 反应性氧物质 C-Jun氨基末端激酶 转化生长因子-β1 增殖 Peroxiredoxin-1 reactive oxygen species c-Jun N-terminal kinase transforming growth factro-β1 proliferation
目的:探讨新型过氧化物酶Peroxiredoxin-1(Prx-1)对大鼠肺成纤维细胞(FB)增殖和JNK通路的影响。方法体外培养FB,随机分为:对照组、TGF-β1组、空转染组、Prx-1转染组。对照组:以0.4%血清浓度MEM作为基础培养液;TGF-β1组:0.4%血清培养条件下,给予TGF-β1(5μg/L)孵育细胞;空转染组:利用脂质体Lipo2000将空载体转染到FB 36 h,给予同步化处理12 h后,在0.4%血清培养条件下,给予TGF-β1(5μg/L)孵育细胞;Prx-1转染组:Prx-1真核表达质粒转染到FB 36 h,给予同步化处理12 h后,在0.4%血清培养条件下,给予TGF-β1(5μg/L)孵育细胞。质粒转染采用脂质体转染法;免疫荧光检测质粒转染和8-OhdG(DNA氧化产物)的水平;MTT法检测FB增殖;Western blot 检测JNK和Prx-1的表达情况。结果质粒成功转染入FB,转染Prx-1真核表达质粒使Prx-1在FB内蛋白表达水平增高。与对照组比较,TGF-β1组的FB增殖、8-OhdG及磷酸化的JNK表达均明显增加。与TGF-β1组比较,空转染组中的上述观察指标无明显变化,但在Prx-1转染组,这些指标均明显下降。结论 TGF-β1能够诱导FB生成反应性氧物质(ROS),并由此促进JNK的激活和FB增殖,而Prx-1可通过抑制ROS来抑制TGF-β1诱导的FB增殖。