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目的:对4种建立滋养细胞的方法进行比较,以期寻求一种简便高效的人早孕滋养细胞的体外培养方法,为相关研究提供基础。方法早孕绒毛通过胰酶联合胶原酶消化分离后,分别采用直接接种、差速贴壁联合差速消化法、人外周血淋巴细胞分离液分离纯化法、完整绒毛消化联合简化的 percoll 密度梯度分离法4种方法纯化培养,倒置显微镜观察细胞形态,应用 HE 染色、免疫组化和免疫细胞化学法检测细胞纯度。结果直接接种、差速贴壁联合差速消化法、人外周血淋巴细胞分离液分离纯化法得到的细胞细胞角蛋白7(CK -7)表达阳性率不足60%;简化的 percoll 密度梯度分离法得到的细胞 CK -7表达阳性率达90%以上。结论完整绒毛消化联合简化的 percoll 密度梯度分离纯化可以得到大量较高纯度的滋养细胞以供后期实验。

作者:左彦珍;胡亚涛;李玉红;许倩

来源:广东医学 2015 年 5期

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左彦珍;胡亚涛;李玉红;许倩
来源:
广东医学 2015 年 5期
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早孕滋养细胞 原代培养 胎盘 人外周血淋巴细胞分离液 percoll密度梯度 差速 细胞角蛋白-7 first trimester trophoblast primary cell culture placenta lymphocyte separation medium percoll cytokeratin -7
目的:对4种建立滋养细胞的方法进行比较,以期寻求一种简便高效的人早孕滋养细胞的体外培养方法,为相关研究提供基础。方法早孕绒毛通过胰酶联合胶原酶消化分离后,分别采用直接接种、差速贴壁联合差速消化法、人外周血淋巴细胞分离液分离纯化法、完整绒毛消化联合简化的 percoll 密度梯度分离法4种方法纯化培养,倒置显微镜观察细胞形态,应用 HE 染色、免疫组化和免疫细胞化学法检测细胞纯度。结果直接接种、差速贴壁联合差速消化法、人外周血淋巴细胞分离液分离纯化法得到的细胞细胞角蛋白7(CK -7)表达阳性率不足60%;简化的 percoll 密度梯度分离法得到的细胞 CK -7表达阳性率达90%以上。结论完整绒毛消化联合简化的 percoll 密度梯度分离纯化可以得到大量较高纯度的滋养细胞以供后期实验。