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目的 探讨AKT通路在转化生长因子β1(TGF-β1)诱导肺成纤维细胞合成胶原中的作用,及硫氧环蛋白过氧化物酶1(Prx-1)对此作用的影响.方法 体外培养肺成纤维细胞,随机分为4组:(1)对照组:以0.4%血清浓度MEM作为基础培养液孵育培养;(2)TGF-β1组:0.4%血清培养条件下,给予TGF-β1(5 μg/L)孵育细胞;(3)TGF-β1+转染对照组:空质粒载体转染肺成纤维细胞36 h,同步化12 h后,给予TGF-β1(5μg/L)孵育细胞;(4)TGF-β1+Prx-1转染组:Prx-1表达质粒转染肺成纤维细胞36 h,同步化12 h后,给予TGF-β1(5μg/L)孵育细胞.脂质体转染法将Prx-1表达质粒转染肺成纤维细胞,Western blot法检测Prx-1、Ⅰ和Ⅲ型胶原、磷酸化AKT (p-AKT)表达,二氯荧光素二乙酸检测活性氧(ROS)水平.结果 (1)Prx-1表达质粒转染肺成纤维细胞后,Prx-1蛋白表达高于TGF+β1+转染对照组,差异有统计学意义(P<0.01).(2)与对照组比较,TGF-β1组Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、ROS水平及p-AKT蛋白表达均明显增加,差异有统计学意义(P<0.01).与TGF-β1组比较,TGF-β1+转染对照组的Ⅰ和Ⅲ型胶原、ROS及p-AKT水平无明显变化(P>0.05),但TGF-β1+Prx-1转染组Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、ROS及p-AKT蛋白水平明显下降,差异有统计学意义(P<0.05).结论 TGF-β1能够诱导肺成纤维细胞生成

作者:贾艳春;刘英宇;孙影;范玉磊;梁婷婷;杨方

来源:广东医学 2015 年 36卷 23期

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作者:
贾艳春;刘英宇;孙影;范玉磊;梁婷婷;杨方
来源:
广东医学 2015 年 36卷 23期
标签:
硫氧环蛋白过氧化物酶1 活性氧 AKT 转化生长因子-β1 胶原 肺成纤维细胞
目的 探讨AKT通路在转化生长因子β1(TGF-β1)诱导肺成纤维细胞合成胶原中的作用,及硫氧环蛋白过氧化物酶1(Prx-1)对此作用的影响.方法 体外培养肺成纤维细胞,随机分为4组:(1)对照组:以0.4%血清浓度MEM作为基础培养液孵育培养;(2)TGF-β1组:0.4%血清培养条件下,给予TGF-β1(5 μg/L)孵育细胞;(3)TGF-β1+转染对照组:空质粒载体转染肺成纤维细胞36 h,同步化12 h后,给予TGF-β1(5μg/L)孵育细胞;(4)TGF-β1+Prx-1转染组:Prx-1表达质粒转染肺成纤维细胞36 h,同步化12 h后,给予TGF-β1(5μg/L)孵育细胞.脂质体转染法将Prx-1表达质粒转染肺成纤维细胞,Western blot法检测Prx-1、Ⅰ和Ⅲ型胶原、磷酸化AKT (p-AKT)表达,二氯荧光素二乙酸检测活性氧(ROS)水平.结果 (1)Prx-1表达质粒转染肺成纤维细胞后,Prx-1蛋白表达高于TGF+β1+转染对照组,差异有统计学意义(P<0.01).(2)与对照组比较,TGF-β1组Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、ROS水平及p-AKT蛋白表达均明显增加,差异有统计学意义(P<0.01).与TGF-β1组比较,TGF-β1+转染对照组的Ⅰ和Ⅲ型胶原、ROS及p-AKT水平无明显变化(P>0.05),但TGF-β1+Prx-1转染组Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、ROS及p-AKT蛋白水平明显下降,差异有统计学意义(P<0.05).结论 TGF-β1能够诱导肺成纤维细胞生成