目的:分离、纯化结直肠癌肿瘤组织中的LAP+CD4+T细胞并检测其细胞因子谱的表达,探讨其在结直肠癌肿瘤微环境中促瘤作用的相关分子机制。方法选取初次手术治疗的30例经病理确诊的结直肠癌患者的肿瘤组织标本。利用免疫磁珠分选法从肿瘤组织中分选出LAP+CD4+T细胞和LAP-CD4+T细胞,流式细胞术分析其纯度,台盼蓝法检测LAP+CD4+T细胞和LAP-CD4+T细胞的活性,RT-qPCR方法检测两种细胞白细胞介素( IL)-2、IL-4、IL-10、IL-17、干扰素-γ( IFN-γ)、转化生长因子-β( TGF-β)的表达。结果经免疫磁珠分选后LAP+CD4+T细胞的纯度为(96.14±3.67)%, LAP-CD4+T细胞的纯度为(95.61±4.66)%,台盼蓝染色结果显示LAP+CD4+T细胞存活率为(91.35±4.11)%,LAP-CD4+T细胞存活率为(92.48±2.56)%;RT-qPCR结果显示LAP+CD4+T细胞高表达IL-10和TGF-β1 mRNA,低表达IL-2、IL-4、IL-17、IFN-γ,与LAP-CD4+T细胞比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论结直肠癌肿瘤组织LAP+CD4+T细胞表达高水平的抑制性细胞因子IL-10和TGF-β,可能参与了肿瘤的免疫逃逸机制。
作者:曹云飞;钟武;江志远;钟世彪;张磊昌;黄家豪;张森;陈利生
来源:广东医学 2016 年 37卷 1期