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目的 基于NF-κB通路研究实验性自身免疫性甲状腺炎(EAT)发病过程中相关因子的表达变化,为其治疗提供一定的理论基础.方法 通过提取纯化小鼠甲状腺球蛋白(mTg)并联合弗氏佐剂免疫CBA/j小鼠建造EAT模型;利用HE染色检测病理变化;ELISA实验检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;qPCR实验检测甲状腺组织中TNF-α、Bcl-2、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的mRNA变化;Western blot实验检测甲状腺组织中核因子-κB(NF-κB)蛋白的变化;免疫组化检测甲状腺组织中IKK蛋白的变化.结果 成功提取mTg后,进行免疫造模,结果发现与初次免疫第0周小鼠甲状腺组织相比,初次免疫后第1周甲状腺组织可见炎症细胞的轻微浸润,炎症评分差异有统计学意义(P<0.05),血清中TNF-α含量与甲状腺组织中TNF-αmRNA、Bcl-2 mRNA、ICAM-1 mRNA、NF-κB蛋白以及IKK蛋白表达量均有所上升,但差异无统计学意义(P>0.05);初次免疫后第2周即2次加强免疫时,小鼠甲状腺组织中可见较多炎症细胞浸润,与0周小鼠甲状腺炎症评分相比,差异有统计学意义(P<0.05),血清中TNF-α含量与甲状腺组织中TNF-αmRNA、Bcl-2 mRNA、ICAM-1 mRNA、NF-κB蛋白以及IKK蛋白表达量均增加,Bcl-2 mRNA表达量差异无统计学意义(P>0.05),其余均差异有统计学意义(P<0.05);初次免疫后

作者:祁岗;朱艳媚;李玉娟;李焱;罗世文;李曼

来源:广东医学 2019 年 40卷 3期

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作者:
祁岗;朱艳媚;李玉娟;李焱;罗世文;李曼
来源:
广东医学 2019 年 40卷 3期
标签:
蛋白纯化 自身免疫性甲状腺炎 NF-κB通路 机制 protein purification autoimmune thyroiditis NF-κB pathway mechanism
目的 基于NF-κB通路研究实验性自身免疫性甲状腺炎(EAT)发病过程中相关因子的表达变化,为其治疗提供一定的理论基础.方法 通过提取纯化小鼠甲状腺球蛋白(mTg)并联合弗氏佐剂免疫CBA/j小鼠建造EAT模型;利用HE染色检测病理变化;ELISA实验检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;qPCR实验检测甲状腺组织中TNF-α、Bcl-2、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的mRNA变化;Western blot实验检测甲状腺组织中核因子-κB(NF-κB)蛋白的变化;免疫组化检测甲状腺组织中IKK蛋白的变化.结果 成功提取mTg后,进行免疫造模,结果发现与初次免疫第0周小鼠甲状腺组织相比,初次免疫后第1周甲状腺组织可见炎症细胞的轻微浸润,炎症评分差异有统计学意义(P<0.05),血清中TNF-α含量与甲状腺组织中TNF-αmRNA、Bcl-2 mRNA、ICAM-1 mRNA、NF-κB蛋白以及IKK蛋白表达量均有所上升,但差异无统计学意义(P>0.05);初次免疫后第2周即2次加强免疫时,小鼠甲状腺组织中可见较多炎症细胞浸润,与0周小鼠甲状腺炎症评分相比,差异有统计学意义(P<0.05),血清中TNF-α含量与甲状腺组织中TNF-αmRNA、Bcl-2 mRNA、ICAM-1 mRNA、NF-κB蛋白以及IKK蛋白表达量均增加,Bcl-2 mRNA表达量差异无统计学意义(P>0.05),其余均差异有统计学意义(P<0.05);初次免疫后