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目的 探究胃饥饿素(Ghrelin)调控核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)信号通路在前交叉韧带成纤维细胞焦亡中的作用.方法 前交叉韧带成纤维细胞分为对照组、肿瘤坏死因子α(tumor necrotic factor-α,TNF-α)炎症模型组、TNF-α+Ghrelin干预组,通过CCK-8确定TNF-α和Ghrelin干预的剂量和时间,Transwell法检测细胞迁移能力,Western Blot检测细胞焦亡相关蛋白含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-1(cysteinyl aspartate specific proteinase,Caspase-1)、白细胞介素18(Interleukin-18,IL-18)、白细胞介素1β(Interleukin-1β,IL-1β)、消皮素D(gasdermin D,GSDMD)的表达,q-PCR检测Caspase-1、IL-18、IL-1β、GSDMD mRNA表达水平,Western Blot检测磷酸化P65(p-P65)和NLRP3的表达.结果 绘制CCK-8结果曲线,确定Ghrelin的干预浓度为20 ng/mL,TNF-α干预浓度为20 ng/mL,干预时间都为48 h;与对照组相比,TNF-α炎症模型组的细胞迁移能力明显降低(P<0.001),细胞焦亡相关蛋白表达显著增高(P<0.05),p-P65和NLRP3的表达显著增高(P<0.05),Ghrelin干预后细胞迁移能力明显提高(P<0.001),细胞焦亡相关蛋白显

作者:王宗帅;蔡显义;朱旭;刘刚;冯世杰;车伟伟;邹宇聪

来源:骨科 2023 年 14卷 6期

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王宗帅;蔡显义;朱旭;刘刚;冯世杰;车伟伟;邹宇聪
来源:
骨科 2023 年 14卷 6期
标签:
胃饥饿素 细胞焦亡 前交叉韧带损伤 成纤维细胞 核因子κB NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3 Ghrelin Pyroptosis Anterior cruciate ligament injury Fibroblasts NF-κB NLRP3
目的 探究胃饥饿素(Ghrelin)调控核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)信号通路在前交叉韧带成纤维细胞焦亡中的作用.方法 前交叉韧带成纤维细胞分为对照组、肿瘤坏死因子α(tumor necrotic factor-α,TNF-α)炎症模型组、TNF-α+Ghrelin干预组,通过CCK-8确定TNF-α和Ghrelin干预的剂量和时间,Transwell法检测细胞迁移能力,Western Blot检测细胞焦亡相关蛋白含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-1(cysteinyl aspartate specific proteinase,Caspase-1)、白细胞介素18(Interleukin-18,IL-18)、白细胞介素1β(Interleukin-1β,IL-1β)、消皮素D(gasdermin D,GSDMD)的表达,q-PCR检测Caspase-1、IL-18、IL-1β、GSDMD mRNA表达水平,Western Blot检测磷酸化P65(p-P65)和NLRP3的表达.结果 绘制CCK-8结果曲线,确定Ghrelin的干预浓度为20 ng/mL,TNF-α干预浓度为20 ng/mL,干预时间都为48 h;与对照组相比,TNF-α炎症模型组的细胞迁移能力明显降低(P<0.001),细胞焦亡相关蛋白表达显著增高(P<0.05),p-P65和NLRP3的表达显著增高(P<0.05),Ghrelin干预后细胞迁移能力明显提高(P<0.001),细胞焦亡相关蛋白显