目的:探讨细胞周期蛋白依赖性蛋白样激酶1(CDKL1)在肺腺癌(LUAD)中的表达及其对LUAD细胞增殖、侵袭和迁移能力等细胞恶性生物学行为的影响.方法:采用TCGA数据库分析CDKL1基因在LUAD组织和正常肺组织中的表达差异;利用Kaplan-Meier Plotter数据库分析CDKL1基因表达水平与LUAD患者预后的关系;收集78例行手术切除的LUAD组织和对应癌旁组织,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白质免疫印迹(western blotting)法检测LUAD组织和癌旁组织中CDKL1 mRNA和蛋白的表达水平,并分析CDKL1表达水平与LUAD患者临床病理特征的关系.体外培养LUAD细胞系NCI-H1975,并将CDKL1过表达质粒及其空载质粒转染至NCI-H1975细胞中,分别为空白对照(blank)组、空载(Vector)组和CDKL1过表达(oe-CDKL1)组.然后采用细胞增殖检测试剂盒(CCK-8)和BrdU法检测细胞增殖活性;流式细胞术检测细胞凋亡水平;Transwell法检测细胞侵袭和迁移能力变化;Western blotting法检测细胞凋亡蛋白Cleaved-caspase-3蛋白表达水平.结果:与正常肺组织比较,CDKL1在人LUAD肿瘤组织中低表达(P<0.05),且其低表达与LUAD患者肿瘤大小、TNM分期、分化程度和淋巴结转移等病理参数及不良预后显著相关(P<0.05);与blank组和Vector组比较,oe-CDKL1组NCI-H1975细胞CDKL1基因显著
作者:于晋;李波;张武文;庄敏彦
来源:广西医科大学学报 2023 年 40卷 11期