目的:探讨利用慢病毒介导小干扰核糖核酸( siRNA)沉默人体端粒酶反转录酶( hTERT)的可行性及其对宫颈癌Caski细胞增殖和凋亡的影响。方法用前期构建的慢病毒表达载体anti-hTERT-LV 和 NC-LV转染宫颈癌 Caski细胞。实验共分3组,分别为空白对照组( NC组)、阴性对照组( NC-LV组)及干扰组( anti-hTERT-LV组)。采用实时荧光定量PCR检测hTERT mRNA表达量,采用流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡情况。结果 anti-hTERT-LV组hTERT mRNA相对表达量为(0.28±0.02)明显低于NC组(1.0)及NC-LV组(0.87±0.05)( P均<0.05)。 anti-hTERT-LV组G1期细胞比例(71.52±0.79)%明显高于NC组(54.69±2.84)%和NC-LV组(55.70±1.31)%(P均<0.05);anti-hTERT-LV组S期细胞比例(18.69±1.95)%明显低于NC组(36.06±1.56)%和NC-LV组(34.16±1.09)%(P均<0.05)。 anti-hTERT-LV组细胞凋亡率(36.45±5.39)%明显高于NC-LV组(8.75±3.75)%和NC组(9.55±2.57)%(P均<0.05)。结论慢病毒介导siRNA可以沉默hTERT基因,高效特异地抑制宫颈癌Caski细胞hTERT基因的表达,促进细胞凋亡,抑制肿瘤细胞的生长和增殖。
作者:赵红珂;莫凌昭
来源:广西医学 2015 年 5期