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为了表达及纯化甘油脱水酶β亚基蛋白,采用PCR及DNA重组技术将甘油脱水酶β亚基基因gldB重组到含麦芽糖结合蛋白(MBP)的融合蛋白表达载体pMAL-c2x中,在大肠杆菌中进行表达.结果表明,转化重组质粒pMAL/gldB的大肠杆菌经IPTG诱导,SDS-PAGE分析显示:表达出的MBP-gldB融合蛋白相对分子质量约72000,与预期大小一致,并经Western blot分析证实.进一步通过直链淀粉树脂亲和层析纯化得到电泳均一的融合蛋白.已获得的重组甘油脱水酶β亚基蛋白有利于研究其生物学性能.

作者:陈永胜;刘长江;李长彪;翟景波

来源:工业微生物 2005 年 35卷 2期

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作者:
陈永胜;刘长江;李长彪;翟景波
来源:
工业微生物 2005 年 35卷 2期
标签:
甘油脱水酶 gldB基因 原核表达 融合蛋白
为了表达及纯化甘油脱水酶β亚基蛋白,采用PCR及DNA重组技术将甘油脱水酶β亚基基因gldB重组到含麦芽糖结合蛋白(MBP)的融合蛋白表达载体pMAL-c2x中,在大肠杆菌中进行表达.结果表明,转化重组质粒pMAL/gldB的大肠杆菌经IPTG诱导,SDS-PAGE分析显示:表达出的MBP-gldB融合蛋白相对分子质量约72000,与预期大小一致,并经Western blot分析证实.进一步通过直链淀粉树脂亲和层析纯化得到电泳均一的融合蛋白.已获得的重组甘油脱水酶β亚基蛋白有利于研究其生物学性能.