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目的:通过同源重组基因失活方法,构建幽门螺旋杆菌(H.pylori)cagA基因失活突变株.方法:使用分子克隆方法构建包含cagA基因上、下游同源臂及氯霉素转乙酰基酶(CAT)的自杀型cagA基因靶向失活质粒pHG1,经PCR验证后将该质粒电转化入H.pylori 11639菌株中,通过氯霉素抗性筛选出cagA基因失活突变株.结果:pHG1质粒构建成功并转化进入H.pylori11639菌株,氯霉素筛选获得cagA基因组区段发生重组的△cagA突变株(△cagA::groEL-cat);PCR结果表明,cagA基因突变株构建成功.结论:使用自杀型同源重组质粒pHG1成功构建幽门螺旋杆菌(H.pylori)cagA基因失活突变株.
作者：洪伟；陈学书；吴昌学；郜双林；赵艳；谢渊；陈峥宏；官志忠；周建奖
来源：贵阳医学院学报 2015 年 40卷 12期
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