目的研究丙型肝炎病毒核心蛋白致病作用的细胞内信号传导途径(STPs).方法在前期工作已证实HCV核心蛋白激活NF-κB介导的细胞内STPs这一结论的基础上,对核心蛋白活化NF-κB的机制和作用位点进行了测定.用0.4μg pCXN2-core与pNF-κB共转染Hela细胞3h后分别加入5mmolIKKβ的抑制剂乙酰水杨酸和25μmol消炎痛(作为对照)各0.5ml,继续转染33h,测定荧光素酶比活性,以此检测乙酰水杨酸对NF-κB介导的STPs的抑制作用.以pCXN2 core转染Cos-7细胞36h,收获细胞溶解液,用Western印迹分析检测IκBα表达,确定IκBα的降解情况.用pCXN2-core、pMEKK△(表达非活性MEKK的质粒)、pNF-κB共转染Hela细胞36h,测定荧光素酶比活性,确定HCV核心蛋白是否通过MEKK活化NF-κB介导的STPs.结果(1)HCV核心蛋白活化NF-κB介导的STPs被乙酰水杨酸抑制;(2)pCXN2-core转染后的细胞溶解液中IκBα的量较pCXN2转染后的少;(3)HCV核心蛋白活化NF-κB介导的STPs的作用不被MEKK△阻断.结论(1)乙酰水杨酸通过抑制IKK的IκBα磷酸化作用,抑制IκB降解,阻断NF-κB的活化,表明核心蛋白作用位点可能在IKK或其上游某个部位;(2)在表达HCV核心蛋白的细胞存在IκBα降解的增加,造成NF-κB的活化;(3)核心蛋白的作用位点处于MEKK作用点下游.(4)HCV核心蛋白
作者：朱峰；钱家鸣；孙钢；杨晓鸥；陆星华
来源：肝脏 2003 年 8卷 1期
