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目的 探讨miR-375对人视网膜母细胞瘤细胞增殖和凋亡的影响及作用机制.方法 采用脂质体转染法分别将miR-375 mimics或阴性对照NC mimics转染至Y79细胞,采用qRT-PCR检测转染效率,噻唑蓝比色法(MTT)检测miR-375对Y79细胞增殖能力的影响,流式细胞仪检测miR-375对Y79细胞凋亡的影响,生物信息学工具分析miR-375的靶基因,双荧光素酶报告基因实验检测miR-375和Pax6靶向关系,qRT-PCR和Western blot检测miR-375对Pax6的调控作用.结果 转染miR-375 mimics后,Y79细胞中miR-375的表达明显升高(P<0.05).过表达miR-375可抑制Y79细胞的增殖活力(P<0.05),促进Y79细胞凋亡(P<0.05).生物信息学软件分析结果显示miR-375与Pax63'UTR存在结合位点,双荧光素酶报告基因实验结果显示Pax6是miR-375的靶基因,qRT-PCR和Western blot检测结果显示miR-375可负向调控Pax6 mRNA和蛋白的表达.结论 miR-375靶向Pax6基因抑制视网膜母细胞瘤Y79细胞增殖,诱导Y79细胞凋亡.

作者:桂玉敏;彭建军;郭敬

来源:河北医药 2020 年 42卷 8期

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作者:
桂玉敏;彭建军;郭敬
来源:
河北医药 2020 年 42卷 8期
标签:
miR-375 Pax6基因 视网膜母细胞瘤Y79细胞 增殖 凋亡
目的 探讨miR-375对人视网膜母细胞瘤细胞增殖和凋亡的影响及作用机制.方法 采用脂质体转染法分别将miR-375 mimics或阴性对照NC mimics转染至Y79细胞,采用qRT-PCR检测转染效率,噻唑蓝比色法(MTT)检测miR-375对Y79细胞增殖能力的影响,流式细胞仪检测miR-375对Y79细胞凋亡的影响,生物信息学工具分析miR-375的靶基因,双荧光素酶报告基因实验检测miR-375和Pax6靶向关系,qRT-PCR和Western blot检测miR-375对Pax6的调控作用.结果 转染miR-375 mimics后,Y79细胞中miR-375的表达明显升高(P<0.05).过表达miR-375可抑制Y79细胞的增殖活力(P<0.05),促进Y79细胞凋亡(P<0.05).生物信息学软件分析结果显示miR-375与Pax63'UTR存在结合位点,双荧光素酶报告基因实验结果显示Pax6是miR-375的靶基因,qRT-PCR和Western blot检测结果显示miR-375可负向调控Pax6 mRNA和蛋白的表达.结论 miR-375靶向Pax6基因抑制视网膜母细胞瘤Y79细胞增殖,诱导Y79细胞凋亡.