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目的 探讨肾小管低氧诱导因子-1α(HIF-1α)/MicroRNA-23a(miR-23a)通路在脓毒血症急性肾损伤(SA-AKI)中的作用及相关作用机制.方法 体外培养人近曲小管上皮细胞(HK-2 细胞),采用脂多糖(LPS)处理HK-2细胞构建SA-AKI细胞模型.LPS处理的HK-2 细胞分为LPS组、NC siRNA 组、HIF-1α siRNA组、anti-miR-NC组、anti-miR-23a组、HIF-1α siRNA+miR-NC组、HIF-1α siRNA+miR-23a组,以正常培养的HK-2 细胞作为空白对照组(Control组).采用qRT-PCR法检测细胞中HIF-1α、miR-23a基因表达;CCK-8法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡;ELISA法检测细胞中炎性因子[白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)]水平;Western blot法检测细胞中HIF-1α蛋白、NF-κB通路蛋白表达.结果 与Control组比较,LPS组HK-2 细胞中HIF-1α蛋白和mRNA表达水平、miR-23a mRNA表达水平均升高,细胞活力降低,细胞凋亡率、细胞中IL-6、IL-1β和TNF-α水平均升高(P<0.05).与LPS组比较,HIF-1α siRNA组HK-2细胞中HIF-1α蛋白和mRNA表达水平、miR-23a mRNA表达水平均降低,细胞活力升高,细胞凋亡率、细胞中IL-6、IL-1β和TNF-α水平均降低(P<0.05).与LPS组比较,anti-miR-23a组HK-2细胞中miR-23a mRNA表达水平降低,细胞活力升高,

作者:陈思宇;强立娟;朱嘉兴;马世兰;陈占龙

来源:河北医药 2024 年 46卷 5期

知识库介绍

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作者:
陈思宇;强立娟;朱嘉兴;马世兰;陈占龙
来源:
河北医药 2024 年 46卷 5期
标签:
脓毒血症急性肾损伤 肾小管上皮细胞 肾小管低氧诱导因子-1α miR-23a 炎性反应 细胞凋亡 NF-κB信号通路 sepsis associated acute kidney injury renal tubular epithelial cells hypoxia inducible factor-1α(HIF-1 α) MicroRNA-23a(miR-23a) inflammatory response apoptosis nuclear factor kappa B(NF-κB)signaling pathway
目的 探讨肾小管低氧诱导因子-1α(HIF-1α)/MicroRNA-23a(miR-23a)通路在脓毒血症急性肾损伤(SA-AKI)中的作用及相关作用机制.方法 体外培养人近曲小管上皮细胞(HK-2 细胞),采用脂多糖(LPS)处理HK-2细胞构建SA-AKI细胞模型.LPS处理的HK-2 细胞分为LPS组、NC siRNA 组、HIF-1α siRNA组、anti-miR-NC组、anti-miR-23a组、HIF-1α siRNA+miR-NC组、HIF-1α siRNA+miR-23a组,以正常培养的HK-2 细胞作为空白对照组(Control组).采用qRT-PCR法检测细胞中HIF-1α、miR-23a基因表达;CCK-8法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡;ELISA法检测细胞中炎性因子[白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)]水平;Western blot法检测细胞中HIF-1α蛋白、NF-κB通路蛋白表达.结果 与Control组比较,LPS组HK-2 细胞中HIF-1α蛋白和mRNA表达水平、miR-23a mRNA表达水平均升高,细胞活力降低,细胞凋亡率、细胞中IL-6、IL-1β和TNF-α水平均升高(P<0.05).与LPS组比较,HIF-1α siRNA组HK-2细胞中HIF-1α蛋白和mRNA表达水平、miR-23a mRNA表达水平均降低,细胞活力升高,细胞凋亡率、细胞中IL-6、IL-1β和TNF-α水平均降低(P<0.05).与LPS组比较,anti-miR-23a组HK-2细胞中miR-23a mRNA表达水平降低,细胞活力升高,