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目的 研究化痰除湿祛瘀剂膝痹康对人骨关节炎(osteoarthritis,OA)软骨细胞调控基因表达的影响.方法 取全膝关节置换手术膝骨关节炎患者的软骨组织,采用酶消化培养法培养人软骨细胞,采用甲苯胺蓝染色鉴定细胞来源.将软骨细胞分为对照组、膝痹康0.016、0.08、0.4、2.0、10.0 mg/mL组,培养24 h后,应用甲基噻唑基四唑(MTT)法检测各组细胞的增殖情况.根据增殖结果将软骨细胞分为对照组、膝痹康低、中、高剂量组(0.05、0.1、2.0 mg/mL),用TUNEL法检测各组细胞凋亡情况,以实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测各组细胞Bcl-2、Bcl-2同源水溶性相关蛋白X(Bax)及p53 mRNA表达.结果 本研究成功建立了人骨关节炎软骨细胞有限细胞系,细胞生长状态良好;甲苯胺蓝染色证明所培养的细胞为来自中胚层的软骨细胞.膝痹康在0.016~10.0 mg/mL范围内对OA软骨细胞波长=450 nm处24 h的光密度(OD)有影响.与对照组相比,膝痹康低剂量组细胞凋亡率无明显变化(P>0.05),膝痹康中、高剂量组下降(P<0.05,P<0.01).膝痹康低、中、高剂量组间比较显示,两两比较差异均有统计学意义(P<0.05).与对照组相比,膝痹康低剂量组Bcl-2、Bax及p53 mRNA相对表达量无明显变化(P>0.05),膝痹康中、高剂量组Bcl-2 mRNA表达量明显上调(P<0.05),Bax及p53 mRNA表达量明

作者:孟祥奇;梁国强;尢君怡;马奇翰

来源:河北中医 2017 年 39卷 1期

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作者:
孟祥奇;梁国强;尢君怡;马奇翰
来源:
河北中医 2017 年 39卷 1期
标签:
骨关节炎 化痰 细胞凋亡 bcl-2相关X蛋白质 基因,bcl-2 基因,p53 Osteoarthritis Resolving phlegm Apoptosis Bcl-2-associated X protein Bcl-2 Gene p53
目的 研究化痰除湿祛瘀剂膝痹康对人骨关节炎(osteoarthritis,OA)软骨细胞调控基因表达的影响.方法 取全膝关节置换手术膝骨关节炎患者的软骨组织,采用酶消化培养法培养人软骨细胞,采用甲苯胺蓝染色鉴定细胞来源.将软骨细胞分为对照组、膝痹康0.016、0.08、0.4、2.0、10.0 mg/mL组,培养24 h后,应用甲基噻唑基四唑(MTT)法检测各组细胞的增殖情况.根据增殖结果将软骨细胞分为对照组、膝痹康低、中、高剂量组(0.05、0.1、2.0 mg/mL),用TUNEL法检测各组细胞凋亡情况,以实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测各组细胞Bcl-2、Bcl-2同源水溶性相关蛋白X(Bax)及p53 mRNA表达.结果 本研究成功建立了人骨关节炎软骨细胞有限细胞系,细胞生长状态良好;甲苯胺蓝染色证明所培养的细胞为来自中胚层的软骨细胞.膝痹康在0.016~10.0 mg/mL范围内对OA软骨细胞波长=450 nm处24 h的光密度(OD)有影响.与对照组相比,膝痹康低剂量组细胞凋亡率无明显变化(P>0.05),膝痹康中、高剂量组下降(P<0.05,P<0.01).膝痹康低、中、高剂量组间比较显示,两两比较差异均有统计学意义(P<0.05).与对照组相比,膝痹康低剂量组Bcl-2、Bax及p53 mRNA相对表达量无明显变化(P>0.05),膝痹康中、高剂量组Bcl-2 mRNA表达量明显上调(P<0.05),Bax及p53 mRNA表达量明