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目的 探讨组蛋白甲基转移酶PR-Set7在亚砷酸钠致人永生化皮肤角质形成细胞(HaCaT细胞)DNA损伤中的作用机制.方法 将处于对数生长期的HaCaT细胞暴露于含终浓度分别为0(对照)、1.25、2.5、5、10 μmol/L亚砷酸钠的DMEM高糖培养基染毒24 h.采用MTT法测定HaCaT细胞的存活情况.另设对照(24h)组、亚砷酸钠(10 μmol/L,24 h)染毒组、PR-Set7小干扰RNA干扰组(SiPR-Set7,50 nmol/L,48 h)和联合暴露(50 nmol/L SiPR-Set7干扰48 h后,10 μmol/L亚砷酸钠暴露24 h)组.分别采用qRT-PCR法检测PR-Set7 mRNA的表达水平,采用Western blot法检测H4K20mel和PR-Set7蛋白的表达水平,采用单细胞凝胶电泳法检测DNA损伤水平.结果 与对照组相比,5、10 μmol/L亚砷酸钠染毒组HaCaT细胞的存活率均较低,差异有统计学意义(P<0.05).与对照组比较,5、10 μmol/L亚砷酸钠染毒组HaCaT细胞PR-Set7蛋白和mRNA的表达水平均升高,而H4K20me1蛋白的表达水平降低;2.5、5、10 μmol/L亚砷酸钠染毒组HaCaT细胞尾部DNA%及尾矩升高,差异有统计学意义(P<0.05).随着亚砷酸钠染毒浓度的升高,HaCaT细胞PR-Set7蛋白和mRNA的表达水平均呈上升趋势,而H4K20me1蛋白和mRNA的表达水平呈下降趋势,DNA损伤水平(尾部DNA%及尾矩)呈上升趋势.与对照组比较,SiPR-Set

作者:陈丽;谢琅;丁雪娇;马璐;王祺;李军;张爱华

来源:环境与健康杂志 2018 年 35卷 2期

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作者:
陈丽;谢琅;丁雪娇;马璐;王祺;李军;张爱华
来源:
环境与健康杂志 2018 年 35卷 2期
标签:
亚砷酸钠 人永生化皮肤角质形成细胞 组蛋白甲基转移酶PR-Set7 H4K20甲基化 DNA损伤
目的 探讨组蛋白甲基转移酶PR-Set7在亚砷酸钠致人永生化皮肤角质形成细胞(HaCaT细胞)DNA损伤中的作用机制.方法 将处于对数生长期的HaCaT细胞暴露于含终浓度分别为0(对照)、1.25、2.5、5、10 μmol/L亚砷酸钠的DMEM高糖培养基染毒24 h.采用MTT法测定HaCaT细胞的存活情况.另设对照(24h)组、亚砷酸钠(10 μmol/L,24 h)染毒组、PR-Set7小干扰RNA干扰组(SiPR-Set7,50 nmol/L,48 h)和联合暴露(50 nmol/L SiPR-Set7干扰48 h后,10 μmol/L亚砷酸钠暴露24 h)组.分别采用qRT-PCR法检测PR-Set7 mRNA的表达水平,采用Western blot法检测H4K20mel和PR-Set7蛋白的表达水平,采用单细胞凝胶电泳法检测DNA损伤水平.结果 与对照组相比,5、10 μmol/L亚砷酸钠染毒组HaCaT细胞的存活率均较低,差异有统计学意义(P<0.05).与对照组比较,5、10 μmol/L亚砷酸钠染毒组HaCaT细胞PR-Set7蛋白和mRNA的表达水平均升高,而H4K20me1蛋白的表达水平降低;2.5、5、10 μmol/L亚砷酸钠染毒组HaCaT细胞尾部DNA%及尾矩升高,差异有统计学意义(P<0.05).随着亚砷酸钠染毒浓度的升高,HaCaT细胞PR-Set7蛋白和mRNA的表达水平均呈上升趋势,而H4K20me1蛋白和mRNA的表达水平呈下降趋势,DNA损伤水平(尾部DNA%及尾矩)呈上升趋势.与对照组比较,SiPR-Set