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[目的]观察坏死的血管平滑肌细胞对周围正常细胞IL-6表达和增殖能力的影响,同时探讨其可能的作用机制。[方法]采用无血清无糖低氧条件制备血管平滑肌细胞坏死模型,收集坏死细胞培养上清液干预正常细胞。实验设置无血清低糖DM EM培养的对照组(control组)、坏死上清干预组(NCS组)、坏死上清与IL-1拮抗剂联合干预组(NCS+IL-IRA组)、坏死上清与IL-6拮抗剂联合干预组(NCS+ IL-6 RA组)、IL-1β干预组(IL-1β组)以及 IL-6干预组(IL-6组)。CCK-8和BrdU ELISA 方法检测细胞增殖能力变化;ELISA方法和RT-PCR方法检测各组细胞培养上清液中IL-6分泌及细胞中IL-6 mRNA表达情况;Western blot方法检测各组细胞p21Ras、ERK、p-ERK蛋白的表达。[结果]与对照组相比,NCS组和IL-1β组处理下血管平滑肌细胞IL-6表达有所升高( P <0.05),NCS组、IL-1β组和IL-6组细胞增殖能力存在显著性增加( P <0.05),同时,p21Ras和p-ERK的表达也存在增加趋势,而NCS+IL-1 RA组和NCS+IL-6 RA组细胞增殖能力较NCS组及IL-1β组、IL-6组细胞增殖能力有所下降( P <0.05),p21Ras和p-ERK的表达也相应有所降低。[结论]坏死的血管平滑肌细胞可能通过释放 IL-1β促进了周围正常细胞 IL-6的表达,并通过Ras/ERK/C/EBP

作者:孟亮;杨帆;王文刚;李立杰;李敬;刘丽楠;韩冰;贾璇

来源:医学临床研究 2013 年 12期

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作者:
孟亮;杨帆;王文刚;李立杰;李敬;刘丽楠;韩冰;贾璇
来源:
医学临床研究 2013 年 12期
标签:
肌 ,平滑 ,血管 白细胞介素1β 白细胞介素6 细胞增殖 Muscle,Smooth,Vascular Interleukin-1beta Interleukin-6 Cell Proliferation
[目的]观察坏死的血管平滑肌细胞对周围正常细胞IL-6表达和增殖能力的影响,同时探讨其可能的作用机制。[方法]采用无血清无糖低氧条件制备血管平滑肌细胞坏死模型,收集坏死细胞培养上清液干预正常细胞。实验设置无血清低糖DM EM培养的对照组(control组)、坏死上清干预组(NCS组)、坏死上清与IL-1拮抗剂联合干预组(NCS+IL-IRA组)、坏死上清与IL-6拮抗剂联合干预组(NCS+ IL-6 RA组)、IL-1β干预组(IL-1β组)以及 IL-6干预组(IL-6组)。CCK-8和BrdU ELISA 方法检测细胞增殖能力变化;ELISA方法和RT-PCR方法检测各组细胞培养上清液中IL-6分泌及细胞中IL-6 mRNA表达情况;Western blot方法检测各组细胞p21Ras、ERK、p-ERK蛋白的表达。[结果]与对照组相比,NCS组和IL-1β组处理下血管平滑肌细胞IL-6表达有所升高( P <0.05),NCS组、IL-1β组和IL-6组细胞增殖能力存在显著性增加( P <0.05),同时,p21Ras和p-ERK的表达也存在增加趋势,而NCS+IL-1 RA组和NCS+IL-6 RA组细胞增殖能力较NCS组及IL-1β组、IL-6组细胞增殖能力有所下降( P <0.05),p21Ras和p-ERK的表达也相应有所降低。[结论]坏死的血管平滑肌细胞可能通过释放 IL-1β促进了周围正常细胞 IL-6的表达,并通过Ras/ERK/C/EBP