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[目的]构建肿瘤坏死因子-α诱导蛋白-1 (TNFAIP1)基因短发卡 RNA (shRNA)慢病毒载体.[方法]根据人TNFAIP1 基因序列设计合成4条 shRNA,构建 shRNA表达质粒,将重组质粒转染至 293T细胞,应用 RT-PCR 检测各组 TNFAIP1 基因 mRNA 的表达水平,筛选出最有效的干扰靶序列,构建HSH018143-LVRH1P-RNAi慢病毒载体,并进行测序鉴定.将确定了的 TNFAIP1-shRNA-0S523409 转染至293T细胞,72 h后,观察绿色荧光表达情况,并测定病毒滴度.[结果]TNFAIP1-shRNA慢病毒表达载体高效转导入 293T细胞并稳定表达,测定其病毒滴度为5×108TU/mL.[结论]本研究成功构建了TNFAIP1基因 shRNA慢病毒表达载体,为研究TNFAIP1 在糖尿病视网膜病变中的作用奠定了实验基础.
作者：丰昀；彭文婷；张嘉玥；张雅倩；张敏；王光伟
来源：医学临床研究 2018 年 35卷 10期
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