目的 利用DNA条形码技术,基于叶绿体核酮糖-1,5-二磷酸羧化/加氧酶大亚基(Ribulose 1,5-bisphosphate carboxylase-oxygenase large subunit,rbcL)基因序列对天南星药材及其常见混伪品进行鉴定,为天南星药材的真伪鉴定和质量评价提供新的技术依据.方法 从市场收集天南星药材及其常见混伪品共计13份,采用广谱植物基因组DNA快速提取试剂盒进行DNA提取,基于rbcL序列选择引物进行PCR,扩增产物进行测序分析.此外,从GenBank数据库下载天南星药材及其常见混伪品的rbcL序列,采用DNAMAN、Editseq、MEGA5.0等分析软件对所得数据进行处理分析,通过计算种间、种内的Kimura 2-parameter(K2-P)遗传距离及构建Neighbor-joining(N-J)系统聚类树对不同样品进行鉴定.结果 13份样品中除1份扩增失败外其余均扩增成功.对rbcL引物扩增序列进行分析,结果显示样本中最大种内遗传距离为0.2％,样本种间遗传距离为0.3％ ～9.2％,中药天南星的正品来源天南星、异叶天南星、东北天南星种间遗传距离相对较小,天南星属与菖蒲属种间遗传距离最大.不同样本之间存在变异位点56处,且构建N-J系统聚类树结果显示同种样本序列严格聚为一支.结论 rbcL引物对天南星药材及其混伪品鉴别效率高,结果准确,可用于市售天南星及其混伪品鉴别.
作者：许贞；刘春生；胡小松；隋丞琳；崔秀梅；侯凤祥；顾选
来源：环球中医药 2020 年 13卷 4期
