目的 探讨生物钟和细胞周期在骨关节炎(OA)软骨细胞中内在的关系,主要是时钟基因Bmal1 对细胞周期相关基因的调控.方法 将胰岛素-转铁蛋白-硒(ITS)诱导后的软骨样 ATDC5 细胞分为 normal组、OA 组、LV-Bmal1组.采用CCK8 法检测各组细胞活力;RT-qPCR法检测Bmal1、Per1、Wee1、Cdk1、Ccnb1 和Mmp13 mRNA在各组中的表达;Western blot检测BMAL1、PER1、WEE1、CDK1、CCNB1 和MMP13 蛋白在各组中的表达水平;流式细胞测量术分析Bmal1 对细胞周期中不同分期及细胞凋亡的影响;分析Bmal1 对Per1、Wee1、Cdk1、Ccnb1 和Mmp13 的调控和它们在OA中发挥的作用.结果 与normal组相比,OA组细胞活力提高,Bmal1、Wee1 的mRNA相对表达量下降,Per1、Cdk1、Ccnb1、Mmp13 的mRNA相对表达量明显增加;LV-Bmal1 组细胞活力下降,Bmal1、Wee1 的mRNA相对表达量上升,Per1、Cdk1、Ccnb1、Mmp13 的mRNA相对表达量下降(P＜0.05);相关性分析显示,Bmal1 与Wee1 呈正相关,二者与Per1、Cdk1、Ccnb1 或Mmp13 存在负相关;Western blot结果显示,不同组别中蛋白表达水平的结果与PCR趋势一致;细胞周期和细胞凋亡检测结果显示,和normal组相比,OA组S期、G2/M期缩短,细胞比例明显下降,细胞早期和晚期凋亡比例增加,LV-Bmal1 组S期、G2/M期延长,细胞比例

作者：杨春生；王添兴；张铁成；武恒敏；王宝兰

来源：基础医学与临床 2024 年 44卷 4期