目的 观察羟基红花黄色素(Hydroxysafflor yellow A,HSYA)对乳鼠原代心肌细胞缺氧复氧(anoxia-reoxygenation,A/R)损伤的保护作用,并进一步探讨该作用与Mst1/YAP信号中Mst1激酶之间的关系.方法 分离新生SD大鼠心肌细胞,孵育48h,细胞贴壁,然后进行分组实验.正常对照组(Con组):正常条件下孵育36h;缺氧复氧组(A/R组):正常孵育24h后行缺氧10h复氧2h;羟基红花黄色素处理组(A/R+H组):正常孵育24h后行缺氧10h同时加用HSYA,后复氧2h;Mst1siRNA后缺氧复氧组(Mst1siRNA+A/R组):小干扰转染后6h,换正常培养基,孵育18h,缺氧10h复氧2h.收集各组心肌细胞培养基上清测LDH,流式细胞仪检测活性氧水平及凋亡率,Western blot检测Mstl,cleaved caspase-3,Caspase-3蛋白表达变化.结果 与Con组比较,A/R组ROS升高,凋亡率增加,活化Mst1的表达增加,cleaved caspase-3蛋白表达增加,差异有统计学意义;与A/R组比较,A/R+H组ROS水平降低,凋亡率下降,P-Mst1蛋白表达下降,cleaved caspase-3蛋白表达减少,差异有统计学意义.与A/R组比较,Mst1siRNA组ROS无明显变化,凋亡率下降,总Mst1及P-Mst1的蛋白表达下降,cleaved caspase-3下降,差异有统计学意义;与A/R+H组比较,Mst1siRNA组ROS水平较高,心肌细胞凋亡率增加,且差异具有统计学意义.结论 HSYA
作者:张琼;李艳茹;张松;沈冰冰;张卓琦
来源:吉林中医药 2017 年 37卷 3期